酿酒酵母中基于外壳蛋白复合物Ⅱ囊泡的蛋白分泌调控机制的研究进展

在酿酒酵母中,外壳蛋白复合物Ⅱ(COPⅡ)包裹的囊泡是蛋白质从内质网转运至高尔基体的媒介,其中COPⅡ囊泡介导的运输是蛋白分泌途径中至关重要的一步.COPⅡ囊泡的运输包括囊泡形成、出芽、束缚和融合.整个过程需要外壳蛋白亚基、三磷酸鸟苷(GTP)、束缚因子等多种组分的参与,且部分组分之间存在的相互作用确保了蛋白质的正确运输.研究对COPⅡ囊泡整个运输过程中受到的外壳亚基组装、蛋白质捕获以及膜融合等一系列调控机制进行较系统综述,有望为改造酿酒酵母中蛋白分泌途径提供参考.     

脂肪酶不对称立体选择性能改善的研究进展

脂肪酶已广泛用于制备光学纯手性化合物的不对称反应中，但大多数酶催化拆分外消旋化合物的立体选择性不很理想. 目前，改善脂肪酶立体选择性的研究主要从改造脂肪酶酶蛋白结构、优化体系的反应条件、改善反应过程以及对映选择性抑制等方面进行. 通过微波照射也能在一定程度上改善脂肪酶催化反应的立体选择性. 本文主要介绍了几种改善脂肪酶催化不对称反应的立体选择性的方法.     

苯酚对厌氧颗粒污泥活性的抑制效应和恢复

通过间歇培养的方式，研究了苯酚对EGSB反应器中颗粒污泥产甲烷活性的抑制和恢复，并通过测定颗粒污泥中辅酶F420、胞外多聚物（ECP）等的含量，研究苯酚对厌氧颗粒污泥微生物的毒性作用。结果表明，不同浓度的苯酚对厌氧颗粒污泥的产甲烷活性都有一定抑制，苯酚浓度越高，抑制程度越严重。如果将苯酚从生物体中迅速去除，产甲烷活性可以逐渐恢复。苯酚对厌氧颗粒污泥中辅酶F420 及胞外多聚物ECP的分泌都有抑制作用。     

玉米芯木聚糖硫酸酯化条件的研究

用碱提法从玉米芯中提取木聚糖,采用氯磺酸吡啶法进行硫酸酯化,通过正交试验确定最佳工艺条件为:吡啶与氯磺酸摩尔比1∶1,温度65℃,时间6h;木聚糖硫酸酯wisX-S通过DEAESepharoseFF层析柱分离得到一个相对分子量为1.3×104的组分,硫酸基取代度为2.24。对此木聚糖硫酸酯进行红外光谱分析,结果显示在波数1259、1228和813cm-1处分别有S=O和C-O-S键的特征吸收峰。     

水/有机溶剂两相体系微生物催化不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程.有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁酯两相体系能明显改善反应效率.通过系统考察一些因素如相体积比、振摇速度、反应温度和pH等对反应速度、摩尔转化率和产物光学纯度的影响发现,这些因素对还原反应的初速度和摩尔转化率有较明显的影响,而对产物的光学纯度影响不明显.优化后的条件为:水与有机溶剂的相体积比1∶1,振摇速度180 r·min-1,温度30℃,pH 7.0.在该优化反应条件下,水/有机溶剂两相体系中出芽短梗霉SW0202细胞催化COBE生成(S)-CHBE不对称还原反应的最大摩尔转化率和产物的光学纯度分别达到了94.8%和97.9%e.e.,在用Na2CO3溶液控制水相pH 7.0条件下,有机相中的产物浓度积累达58.2 g·L-1.     

基于SASV8.1的黄嘌呤氧化酶产酶培养基的优化

培养基优化属多变量目标函数优化,先通过Plackett-Burman法筛选出黄嘌呤、(NH4)2SO4和CaCl2为重要因素,然后采用Box-Behnken设计重要因素水平,同时应用SASV8.1软件做多元非线性回归,建立黄嘌呤氧化酶产酶培养基的优化模型.用模型预测培养基的最优组成.将预测值与验证值相比较,误差为2.6%,证明采用响应面法寻求最佳培养基组成是可行的;并且优化后黄嘌呤氧化酶产酶水平提高了5倍.     

光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸

丙酮酸是一种重要的有机酸 ,广泛应用于制药、日化、农用化学品和食品等工业中。相对于化工法生产的丙酮酸而言 ,发酵法生产的丙酮酸具有低成本、高质量等优势。考虑到球拟酵母属的多重维生素营养缺陷型菌株是目前发酵法生产中最常用和最具竞争力的生产菌株 ,因此重点介绍了发酵法生产丙酮酸在菌种、发酵条件优化等方面的研究进展 ,并给出了发酵法将来可能的发展方向。     

黑根霉对甾体的C11α-羟基化反应

从黑根霉(Rhizopus nigricans)对16α,17α环氧黄体酮的C11α羟基化反应发酵过程曲线开始,考察了碳源、pH对黑根霉的甾体羟基化转化过程的影响.100 L发酵罐实验结果表明,采用复合碳源C(葡萄糖∶糊精为1∶1),转化率比对照提高2%.100 L发酵罐实验结果表明,氧化期(从投料开始计)调pH至4.0~5.0,转化率提高3%.     

新型蛋白聚糖类生物絮凝剂REA—11的合成途径

谷氨酸棒杆菌CCTCC M201005能合成一种以半乳糖醛酸为主要结构单元的蛋白聚糖类生物絮凝剂(命名为REA—11)。为了研究该聚合物的生物合成途径，首先构建了谷氨酸棒杆菌生物合成REA—11的假设途径，然后从(1)中间代谢产物的添加及相关途径关键酶活性的检测和(2)胞内中间代谢产物的检测两个方面来验证该代谢途径的合理性。研究表明，在培养基中添加代谢途径的中间产物UDP—葡萄糖，可显著提高REA—11的絮凝活性，并且UDP—半乳糖差向酶和UDP—半乳糖脱氢酶的比酶活也分别提高了200％和50％；以不同底物为碳源，UDP—葡萄糖焦磷酸化酶、UDP—半乳糖差向酶和UDP—半乳糖脱氢酶的比酶活与REA—11产量的相关系数可分别达到0．75，0．89，0．97。此外，利用HPLC检测出REA—11合成途径中3种关键中间产物UDP—葡萄糖、UDP—半乳糖和UDP—葡萄糖醛酸。由此证明，所构建的REA—11生物合成途径基本合理。     

脯氨酸肽键数据集的构建

由分辨率<0.25nm,同一性(identity)<30％的2401条肽链中计算提取了全部顺式与反式脯氨酸肽键的位置,数目分别为1221个与26401个,从而建立了一个较大规模的脯氨酸肽键数据集。统计分析了该数据集的基本特征:肽键N端残基的分布、N端残基的二面角统计、在二级结构中的分布情况、顺式肽键在脯氨酸肽键中所占比例。此数据集对于进一步研究顺反X-Pro肽键的结构、与氨基酸序列之间的关系,以及肽链折叠动力学具有重要作用。