一株喜树内生真菌的分离及其产喜树碱的初步分析

从秦巴山区喜树中分离到42株内生真菌,其发酵产物经HPLC检测发现,菌株M-20氯仿-甲醇提取物的出峰时间为5.314 min,同喜树碱标准品的出峰时间(5.453 mim)靠近。HPLC-MS分析显示,菌株M-20产生一个M+H+核质比为349.4的离子峰,喜树碱标准品的M+H+核质比为349.2。上述结果表明,菌株M-20代谢产喜树碱,含量为233.3μg/L。结合形态特征和ITS序列分析,将菌株M-20初步鉴定为炭角菌属(Xylaria)真菌。     

雅致放射毛霉3.2778羧肽酶性质及其活性中心结构的研究

固态发酵雅致放射毛霉菌株(Actinomucor elegans)3.2778得到羧肽酶粗酶液,以N-苄氧羰酰基-L-苯丙胺酰-L-亮氨酸(N-CBZ-Phe-Leu)为底物,采用镉-茚三酮法测定羧肽酶水解产物。结果表明:雅致放射毛霉3.2778羧肽酶最适作用pH值范围为6.5～7.2,最适作用温度范围在40℃～45℃,最适作用温度为40℃,在30℃～40℃具有良好的温度稳定性。0.99mmol/L金属离子中,Mg2+对羧肽酶活力表现出显著的促进作用,酶活提高37%;而Cu2+、Fe2+、Fe3+、Hg2+可以抑制绝大部分酶活,残留的相对酶活力约10%。9.1mmol/L金属蛋白酶抑制剂1,10-邻菲啰啉(OP)和丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)和二异丙基磷酰氟(DFP)均可以完全抑制该酶活性,同时,对巯基有修饰作用的蛋白酶抑制剂PCMB、DTT、碘乙酸和β-巯基乙醇对羧肽酶有强烈的抑制作用。因此,推断该酶可能是一种丝氨酸羧肽酶,其活性中心有丝氨酸残基和二硫键结构,酶活受Mg2+激活。     

橡子壳色素稳定性研究

为了科学合理地应用橡子壳色素,对橡子壳色素的稳定性进行了实验研究。本研究主要考察了pH、光照、温度、氧化剂、还原剂、山梨酸钾等食品添加剂等对橡子壳色素稳定性的影响情况。通过测定橡子壳色素在不同环境条件下吸光度变化情况及目测色素液颜色变化情况对色素稳定性进行评价。研究结果表明,橡子壳色素是一种由多种成分组成的红褐色粉末,可溶于极性溶剂(如水、酒精),不溶于非极性溶剂,在酸性(pH≤4)条件下显黄色,在碱性(pH≥8)条件下显红棕色,对光、热、氧化剂(H2O2)、还原剂(Na2SO3)及山梨酸钾均具有良好的稳定性,但对柠檬酸、抗坏血酸(VC)、苯甲酸的稳定性相对较差。     

响应曲面分析法对青藤碱超临界CO2流体萃取条件的优化

以青风藤药材为原料,在单因素实验研究的基础上,采用Box-Behnken响应曲面分析法对影响青风藤药材中青藤碱超临界CO2萃取得率的关键因素:萃取时间、压力、温度进行了优化,旨在为青藤碱新型、绿色提取分离方法作探讨.根据统计模型进行了工艺参数的优选,以得率为指标,优化后所得青藤碱超临界CO2萃取工艺条件为:萃取压力为27.63 MPa,萃取温度为50.68℃,萃取时间为120.24 mim.该条件下得率为1.372%.验证试验证实了该方程的预测值与试验值之间具有较好的拟合度.     

镉对黄鳝红细胞微核率和肝组织的影响

通过注射染毒法和常规组织学方法，研究Cd2＋对黄鳝红细胞微核率和肝组织的影响。结果表明：Cd2＋在浓度1．0，1．5，2．0，2．5，3．0mg／kg的剂量范围内，能诱发黄鳝外周血红细胞发生微核，微核率与染毒剂量有明显的正相关，肝细胞核形态发生异常。     

欧姆加热对嗜酸耐热菌的杀灭作用研究

本实验探讨了欧姆加热对嗜酸耐热菌的杀灭作用。利用自行设计的批式欧姆加热装置,对苹果汁中嗜酸耐热菌进行处理,分析了欧姆加热的电压、pH值、时间及加热体积等对杀菌效果的影响,并利用扫描电镜观察微生物细胞壁膜结构的变化,利用电导率仪和紫外吸收分光光度计测定菌悬液的成分变化。结果表明欧姆加热可以有效的杀灭苹果汁中的嗜酸耐热菌,杀菌率随电压、加热体积的升高而增大,随pH值的降低而增大。通过环境扫描电镜可观察到嗜酸耐热菌的表面出现凹陷和破损,电导率仪和紫外吸收分光光度计测定细胞内容物的溢出,据此推测欧姆加热造成了嗜酸耐热菌的"电穿孔"。     

响应面法优化紫薯汁糖化工艺研究

以紫薯液化汁为原料,采用单因素试验对紫薯汁的糖化工艺进行研究,并通过响应面法优化得到紫薯汁糖化最佳工艺参数。结果表明,各因素对紫薯液化汁糖化的影响大小依次为时间、糖化酶添加量、温度和pH值。并得到紫薯汁糖化最佳工艺参数:温度60℃、pH值4.5、糖化酶添加量1.0%、糖化酶作用时间2.0 h。在此条件下,紫薯汁总糖含量为38.691 g/L。     

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术定性分析黑豆皮中花青苷类物质

利用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术(UPLC MS/MS),对黑豆皮中花青苷类物质进行定性分析。黑豆皮经石油醚索氏提取和6%甲酸水溶液回流提取,取上清液,超滤后用UPLC MS/MS、ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以6%甲酸和乙腈为流动相,进行梯度洗脱,在电喷雾(ESI)正离子模式下,用MRM模式监测。在黑豆皮中检测出矢车菊素类、芍药素类、天竺葵素类、锦葵素类、矮牵牛素类和飞燕草素类这6类共15种花青苷类物质,矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、芍药素-3,5-双葡萄糖苷、芍药素-3-半乳糖苷、锦葵素-3-半乳糖苷、锦葵素-3-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-半乳糖苷、矮牵牛素这8种花青苷在黑豆皮花青苷类物质研究中未见报道。通过对黑豆皮花青苷类物质的分析,建立了UPLC MS/MS检测黑豆皮中花青苷类物质方法,该方法具有操作简便、准确、快速、选择性强的特点。     

响应面法优化草莓中花青素提取工艺参数

采用超声辅助提取草莓中花青素,并利用响应面分析法(RSM)对草莓花青素的提取工艺进行优化,在单因素实验基础上选取实验因素与水平,根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理采用四因素三水平的响应面分析法对各个因素的显著性和交互作用进行分析,结果表明,料液比对草莓花青素提取量影响最为显著,草莓花青素提取的最优工艺条件为超声功率90W、超声时间14min、料液比1∶16、提取温度44℃,在此条件下,花青素提取量实际可达1657.3μg/g,与理论值(1737.3μg/g)基本一致.     

黑羽乌骨鸡毛中黑色素提取工艺

以黑羽乌骨鸡毛为原料,采用盐酸水解法从乌骨鸡毛中提取黑色素并对黑色素的含量进行测定。通过单因素实验考察了提取时间、盐酸浓度、料液比对乌骨鸡毛中黑色素得率的影响,在单因素实验基础上通过响应面实验分析法得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明:乌骨鸡毛中黑色素提取的最佳工艺条件为,HCl浓度27%,提取时间6h,料液比(g∶mL)1∶2,在此条件下黑色素得率达4.72%。黑色素样品经过氧化氢法氧化处理,采用高效液相色谱法测出黑色素含量为76.20%。