抗真菌蛋白Rs-AFP2基因定点突变及其对大肠杆菌中表达的影响

为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量.     

双光源虹膜防散焦成像及特征增强方法

为解决特征图像采集过程中的散焦和图像增强问题,研究基于光斑特征分析的自适应图像复原和增强方法,提出一种基于光斑点的人机交互和图像复原解决方案。在不改变成像系统技术结构、不提高成本的前提下,显著降低散焦程度,清除散焦对图像质量的影响;利用约束最小二乘滤波器进行散焦图像的进一步复原,得到有效的适用于编码和识别的排序测度特征。实验结果表明,该方法可以大幅度提升成像图像质量,在增强编码处理后,提供优质的虹膜特征数据,为下一步虹膜图像编码和识别提供支撑。     

淡紫灰链霉菌S3-5田间防效初探及生防制剂助剂的筛选

尾孢菌(Cercospora zeae-maydis)是引起玉米灰斑病的病原真菌,淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)S3-5为课题组前期研究筛选出的尾孢菌拮抗菌株。为探究S3-5在田间对玉米灰斑病的防治效果,并研制有效防控玉米灰斑病的生防制剂,该研究进行田间试验,并对S3-5稳定剂及紫外保护剂进行筛选。结果表明,初步应用S3-5孢子悬液于田间栽培品种正红311上,发现其对玉米灰斑病具有一定的防治效果,喷施两次的效果更显著(P0.05);最佳稳定剂为2.5%甲基纤维素,最佳紫外保护剂为0.3%异维C钠。可为S3-5制剂的后续研究奠定基础。     

估算水电工程对生态系统生产力影响的一种方法

初级生产力是描述生态系统功能和稳定性的重要参数之一,但目前尚无定量估算水电工程占地对评价区生态系统初级生产力影响的适用方法。提出多个群落组成的生态系统加权平均净初级生产力的概念,用于定量估算水电站等各类工程占地对评价区生态系统净初级生产力的影响,并以川西某在建大型水电站的永久占地数据为例子,对方法的应用作了说明。该方法同时适用于评价水电或其他工程占地引起陆生和水生生态系统净初级生产力的变化。     

生态护坡和鱼道在水利水电工程中的应用

随着全球经济的发展,环境问题日益严重,“可持续发展”成为当今我国的主要发展方向。水是国民经济的命脉,水利工程在我国国民经济发展中占据相当重要的位置。如何在开发利用水资源的同时,降低其开发对环境的影响,达到兴利除害的要求？介绍了在水利水电工程中应用的生态护坡和鱼道。     

酶法制备猪肺抗氧化肽

为了分离制备猪肺抗氧化肽,该文研究了中心组合设计和响应面分析优化猪肺抗氧化肽的提取工艺,以DPPH自由基清除率为响应值,分析了料液比、水解时间和酶浓度对制备抗氧化肽的影响,再通过葡聚糖凝胶Sephadex G-50、G-25和G-10对抗氧化肽进行分离纯化,得到了具有抗氧化活性的肽段,测定其清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基、羟基自由基以及金属螯合的能力。猪肺抗氧化肽的最佳提取工艺参数为:新鲜猪肺质量与水质量的比例(料液比)为1∶3,水解6 h,酶浓度为6 500 U/g,此时DPPH自由基清除率为66.89%;抗氧化活性最强的组分A5清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基和羟基自由基的IC50分别为0.073、0.989、0.192和1.261 g/L,金属螯合能力的IC50为6.505 g/L;其相对分子质量为175。     

高效丢糟纤维素分解菌的筛选及产酶研究

从白酒丢糟堆腐物中筛选出5株分解丢糟纤维素能力强的菌株,以其中降解能力最强的绿色木霉S7为出发菌株。通过对其固态发酵产酶条件的单因素优化试验,初步确定其固体培养基质中丢糟粉与麸皮的最适质量比为4∶1,硫酸铵2%,初始pH值为4.0,30～35℃发酵96 h,羧甲基纤维素酶活和滤纸酶活分别达到57.08μg/min.mL和26.02μg/min.mL。     

碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件的优化

通过固体平板法从含油脂土样中筛选出一株产碱性脂肪酶活力较高的菌株 ,鉴定为解淀粉芽孢杆菌。此菌最佳产酶条件为 :1%淀粉为碳源 ,2 %黄豆粉和 2 %玉米粉为氮源 ,培养基起始 pH 7.0 ,3 0℃培养 72h。对发酵液性质进行初步研究发现 ,此酶最适反应温度为3 7℃ ,最佳反应 pH为 8.5。 0 .0 1mol/LCa2 + 和K+ 对酶有激活作用 ,而Cu2 + 和Fe3 + 则对该酶有抑制作用。     

新霉素酶联免疫检测方法的研究——新霉素抗体的制备

以碳化二亚胺作为偶联剂,分别将新霉素(Neomycin,NEO)和牛血清白蛋白(Bovine serum albu-min,BSA)、血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)进行偶联,得到偶联产物BSA-NEO和KLH-NEO。对BSA、KLH、NEO及其偶联产物BSA-NEO、KLH-NEO进行红外光谱分析,结果显示偶联产物的红外光谱中同时存在载体蛋白和NEO的特征吸收峰,初步证明偶联成功;将偶联产物BSA-NEO和KLH-NEO作为新霉素免疫抗原,分别免疫新西兰大白兔,成功获取新霉素抗血清,间接ELISA法测得抗血清效价可达1.28×105以上。     

ACA微囊化酵母细胞利用酒糟水解液发酵木糖醇的初步研究

通过ACA(Chitosan-alginate)微胶囊技术包埋的热带假丝酵母(Candidatropicalis)细胞能有效地发酵酒糟(文中均指丢糟)半纤维素水解液生产木糖醇。在摇瓶条件下,适宜的工艺条件为:初始木糖质量浓度100g/L,发酵液初始pH值6.0,限制性供氧,分段改变摇床转速(0～24h为180r/min,24～48h为120r/min)使菌株在培养早期获得较高水平的通气率,而后降低菌株的呼吸率。每升氮源含酵母膏1.8g,蛋白胨3.0g,微囊化胶珠与水解液体积比为1∶4。此方法有望大幅降低原料预处理的成本,发酵结果良好,显示了良好的应用潜力。