壳聚糖／果胶水凝胶的制备及其在药物控制释放中的应用

以戊二醛（GA）为交联剂制备了一系列壳聚糖／果胶（CS-PT）pH值敏感水凝胶。研究了合成条件对CS-PT水凝胶溶胀性能的影响。试验结果表明,交联剂含量、pH值、离子强度对水凝胶溶胀率的影响较大,且在酸性条件下的水凝胶的溶胀率远大于碱性条件下的溶胀率,包埋在此水凝胶中的牛血清蛋白（BSA）释放随载药介质的pH值的变化而显著不同,pH值1．0条件下载药的水凝胶释药率大于pH值7．4和9．18条件下的释药率。     

牛凝乳酶基因的克隆与表达

为了获得大量高纯度高活性的凝乳酶制剂,采用基因工程方法,从犊牛皱胃黏膜细胞中克隆得到凝乳酶基因,然后将此基因插入原核表达载体pTWIN1中,使之与几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)融合,从而获得原核表达质粒:pTWIN1/EchybF2.经转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下进行凝乳酶的表达.SDS-PAGE电泳分析和酶活性实验结果显示,CBD-intein-EchybF2融合蛋白在BL21(DE3)中获得高效表达,在低温诱导时主要以可溶性蛋白的形式存在,并具有凝乳活性.     

牛对氧磷酶-1蛋白多克隆抗体的制备及其双抗夹心ELISA检测方法的建立

目的制备牛对氧磷酶-1(paraoxonase-1,PON-1)蛋白多克隆抗体,并建立PON-1的双抗夹心ELISA检测方法。方法将重组牛PON-1蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,经AKTA蛋白纯化系统纯化抗体。以获得的多克隆抗体为捕获抗体,牛PON-1单克隆抗体为检测抗体,HRP标记的山羊抗小鼠IgG为二抗,构建牛PON-1蛋白的双抗夹心ELISA检测法,并对多克隆抗体(1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800)及单克隆抗体浓度(0. 2、0. 4、0. 8、1. 6、3. 2、6. 4 mg/mL)、包被条件(37℃孵育2 h、4℃孵育过夜)、封闭液(1%脱脂奶粉、5%脱脂奶粉、0. 5 mol/L氯化铵)、封闭条件(37℃2 h、37℃4 h、4℃过夜)进行优化,同时验证方法的线性及准确度。采用该方法及市售试剂盒同时检测酮病组及对照组奶牛血清中的PON-1含量。结果建立的双抗夹心ELISA法最适检测条件为:单克隆抗体浓度为3. 2 mg/mL,多克隆抗体工作浓度为1∶800稀释,封闭液为5%脱脂奶粉,包被及封闭条件均为4℃过夜。牛PON-1蛋白标准品浓度在90～3 125 ng/mL浓度范围内,与A_(450)值呈良好的线性关系,标准曲线方程为y=0. 618 6 x-0. 753 6,R~2=0. 981 3;5份样品检测结果均值为764. 21 ng/mL,回收率为97. 97%。市售试剂盒和本实验建立方法检测酮病组奶牛体内PON-1含量均显著低于对照组(P 0. 001)。结论成功获得了抗牛PON-1蛋白的多克隆抗体,并建立了牛PON-1蛋白的双抗夹心ELISA检测方法,且该方法具有良好的线性及准确度。     

牛类芽孢杆菌BD3526产α-葡萄糖苷酶抑制剂的条件优化

为了提高牛类芽孢杆菌BD3526发酵乳中α-葡萄糖苷酶抑制剂的产量,采用单因素实验和响应面法对发酵参数进行优化。BD3526合成α-葡萄糖苷酶抑制剂的优选参数为:培养时间43 h、培养温度29℃、脱脂乳质量浓度为5 g/100 g(水)、三角瓶装量为50 mL/250 mL。在此条件下,BD3526发酵乳对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC50为15. 1 mg/mL,与理论值(14. 6 mg/mL)基本一致,比优化前(22. 4 mg/mL)降低了33%。该研究为α-葡萄糖苷酶抑制剂的后续分离工作提供了保障,也为其他类似的研究提供了理论依据。     

水浴加热对牛半腱肌冷藏形成彩虹色斑的影响

研究水浴加热对牛半腱肌冷藏条件下形成彩虹色斑的影响。以新鲜牛半腱肌为实验材料,对其进行水浴(97℃)加热处理,使中心温度分别为70、80、90℃,在4℃条件下冷藏0～5 d,研究彩虹色斑强度、非血红素铁含量、蛋白质与脂质氧化、色泽等相关指标的变化,探讨水浴加热对牛半腱肌冷藏形成彩虹色斑的影响。结果表明,随水浴加热温度的升高和冷藏时间的延长,牛半腱肌彩虹色斑强度不断增强,其中亮度值(L*)和黄度值(b*)总体略有升高,而红度值(a*)略有降低,均出现显著差异(P<0.05);冷藏期间,牛半腱肌的非血红素铁含量、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARs)值、羰基含量显著升高(P<0.05),游离巯基含量显著降低(P<0.05);通过相关性分析得知,牛半腱肌彩虹色斑强度与非血红素铁含量、羰基含量、TBARs值呈显著正相关(P<0.05),与游离巯基含量呈显著负相关(P<0.05),与a*呈极显著负相关(P<0.01),可能是由于较高的非血红素铁含量促进TBARs值在冷藏0～1 d时迅速上升,同时促进蛋白质氧化进程,蛋白质与脂肪氧化过程同时发生,相互促进,从而共同影响彩虹色斑的形成。     

新疆褐牛不同部位牛肉肌纤维类型及品质差异研究

为了研究新疆褐牛不同部位牛肉肌纤维类型组成及品质差异,测定了冈上肌、冈下肌、臂三头肌、腰大肌、背最长肌、半腱肌、半膜肌和股二头肌的肌纤维特性和品质特性,并通过相关性分析研究了牛肉品质和肌纤维特性之间的相关性。结果显示腰大肌、背最长肌和股二头肌分别具有最高的Ⅰ型、ⅡA型和ⅡB型肌纤维比例,八个部位肉的肌纤维直径为ⅡB型>ⅡA型>Ⅰ型,且腰大肌三种肌纤维类型直径均小于其他部位。冈上肌具有较低的b*值,冈下肌具有较低的剪切力、蒸煮损失率;臂三头肌具有较高的剪切力,腰大肌具有较低的剪切力、硬度、胶着性和pH,较高的粘聚性和压力失水率;背最长肌具有较低的咀嚼性、回复性和弹性;半腱肌具有较低的压力失水率、粘聚性和回复性,较高的L*值;半膜肌具有较低的L*值和咀嚼性,股二头肌具有较高的弹性、胶着性和咀嚼性。Ⅰ型、ⅡA型和ⅡB型纤维面积、直径与剪切力、硬度和蒸煮损失显著正相关(p<0.05),与压力失水率显著负相关(p<0.01);Ⅰ型肌纤维比例与硬度、剪切力显著负相关(p<0.05),ⅡB型肌纤维比例与剪切力正相关。结果表明,肌肉部位显著影响牛肉品质,特别是嫩度,增加Ⅰ型肌纤维比例、减少ⅡB型肌纤维比例均有利于提高牛肉嫩度。     

内蒙古东部肉牛主产区牛肉品质和脂肪特性研究

选择体重相近的锡林郭勒盟放牧条件下西门塔尔牛和蒙古牛、通辽地区舍饲条件下西门塔尔牛各5头分析肉品质和脂肪特性。结果表明:放牧西门塔尔牛和放牧蒙古牛背最长肌和皮下脂肪黄度值(b^*值)和熟肉率均显著高于舍饲西门塔尔(P<0.05);舍饲西门塔尔牛必需氨基酸和婴儿必需氨基酸显著高于放牧蒙古牛(P<0.05),蒙古牛鲜味氨基酸显著高于放牧西门塔尔牛(P<0.05);肌肉组织脂肪酸而言,放牧蒙古牛饱和脂肪酸显著高于舍饲西门塔尔牛(P<0.05)。就单不饱和脂肪酸而言,放牧西门塔尔牛和蒙古牛显著高于舍饲西门塔尔牛(P<0.05)。就多不饱和脂肪酸而言,舍饲西门塔尔牛显著高于其他2组(P<0.05)。从肌肉肉品质和脂肪特性综合考虑,舍饲西门塔尔牛相比放牧西门塔尔牛具有更高的营养价值,而与舍饲相比放牧方式表现出较优的风味前体物质油酸和亚麻酸趋势。放牧方式下蒙古牛鲜味氨基酸含量显著高于西门塔尔牛。     

几种发酵饲料对高纤维日粮后备牛的生长性能、抗氧化功能和免疫状态的影响

使用2个试验研究了几种发酵饲料,耐盐短杆菌、啤酒酵母和白腐真菌对高纤维日粮营养物质消化率、后备牛生长性能、血液抗氧化功能和免疫状态的影响。试验分为4个处理组,即对照组、白腐真菌发酵饲料组、啤酒酵母发酵饲料组和耐盐短杆菌发酵饲料组。每头牛每天饲喂50g发酵饲料,每种发酵饲料均含有活菌1×10~9 CFU/g。试验1的结果表明,这3种发酵饲料对后备牛的干物质采食量没有显著影响,耐盐短杆菌发酵饲料提高了后备牛的平均日增重、末体重和饲料效率(P0.05),基础日粮中添加耐盐短杆菌提高了日粮干物质和有机物质的消化率(P0.05)。试验2的结果表明,耐盐短杆菌发酵饲料改善了后备牛血液抗氧化功能,超氧化物歧化酶浓度高于其它处理组(P0.05),丙二醛浓度低于其它处理组(P0.05)。同时,耐盐短杆菌发酵饲料降低了前列腺素浓度和细胞干扰素的浓度(P0.05)。3种发酵饲料对后备牛白细胞介素-2、白细胞介素-4、白细胞介素-6和白细胞介素-10均没有影响(P0.05),对后备牛免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G也没有影响(P0.05)。     

牛血清白蛋白与槲皮素及花青素相互作用方式及其纳米颗粒特征的比较

实验比较了牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)与脂溶性小分子槲皮素(quercetin,QUE)和水溶性花青素(anthocyanin,ACN)相互作用方式及其纳米颗粒的特征。QUE对BSA荧光猝灭作用为静态猝灭方式(低浓度),但在较高浓度时为静态与动态并存的复合猝灭方式,两者的相互作用力为疏水作用力;ACN对BSA的荧光猝灭程度小于QUE对BSA的,为静态猝灭方式,相互作用力为静电作用力。BSA与QUE的结合常数大于BSA与ACN的结合常数。BSA与QUE或ACN相互作用可形成纳米颗粒,其大小分别为42.5 nm和53.7 nm,ζ-电势分别为-25.64 m V和-21.50 m V。1 mol BSA分子可分别与8 mol QUE和10 mol ACN结合。BSA与QUE形成的纳米颗粒(BSA-QUE)粒径较BSA与ACN(BSA-ACN)的小,且稳定性较高。BSA-QUE对DPPH自由基和ABTS+·清除率均高于BSA-ACN。     

食盐对调理重组牛肉制品品质及水分分布特性的影响

为探讨不同食盐添加量(0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和2.5%)对调理重组牛肉制品品质特性的影响,以碎牛肉为实验原料,经过调理和重组工艺,研究不同食盐添加量对产品的质构特性、黏结强度、色差、水分活度、弛豫时间以及肌肉微观结构的变化。结果表明,随着食盐添加量的增加,调理重组牛肉制品的水分活度显著降低,黏结强度显著增强,产品的质构特性得到显著改善(P0.05),但是色泽变暗。另外,低场核磁共振分析发现,增加食盐的添加量,不易流动水含量逐渐增多,自由水含量逐渐减少,产品的保水性逐渐增强。扫描电子显微镜结果显示,增加食盐的添加量可以使肉块黏结处的三维网络结构越来越致密,提高了产品的保水性和黏结强度。对产品进行感官评价表明,当食盐添加量为1.5%时,产品品质最好,咸味适中。综合考虑产品品质和感官品质,确定在调理重组牛肉制品中食盐的最佳添加量为1.5%。