响应面法提取灰树花多糖研究

利用试验设计软件Design-Expert,通过二次回归设计得到灰树花多糖提取量与提取温度、提取时间、乙醇浓度关系的回归模型,该模型能够较好地预测灰树花多糖提取量.在对影响多糖提取量的关键因素及其相互作用进行探讨后,得到的优化提取工艺参数为:提取温度11 ℃、提取时间10.35 h、乙醇浓度96%,此条件下,多糖的提取量为1.72 g/L.     

灰树花漆酶的双水相萃取及酶学性质

研究双水相萃取法分离灰树花漆酶。以PEG6000/(NH4)2SO4作为成相系统,通过单因素试验研究酶液添加量、PEG6000质量分数、(NH4)2SO4质量分数和体系pH对灰树花漆酶萃取效应的影响,并通过正交试验确定最佳萃取条件,同时进行纯化漆酶的酶学性质研究。结果表明,在pH为6时,PEG6000/(NH4)2SO4双水相萃取的最佳条件为:酶液添加量5%,PEG6000质量分数25%,(NH4)2SO4质量分数17%,此时漆酶的分配系数和酶活收率分别高达7.6和96.6%。纯化漆酶的最适反应温度和最适pH分别为45℃和2.97,在30~45℃和pH 3.5~5.0之间具有很好的稳定性。金属离子Cu2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+、K+、Ca2+对漆酶酶活有促进作用,其中Cu2+和Mg2+的促进作用最显著,而Co2+、Fe2+、Na+对漆酶酶活有抑制作用,其中Fe2+的抑制作用最明显。     

灰树花深层发酵培养基的优化及一种胞外粗多糖快速测定方法的建立

研究了不同碳、氮源对灰树花菌体干重的影响，从中选择出适于该菌深层发酵的最适碳，氮源，通过正交试验优化了深层发酵培养基；并初步建立了一种胞外粗多糖的快速测定方法。     

灰树花液态发酵转化米糠制备多糖的研究

为提高米糠的利用价值,将米糠作为培养基的主要成分,对灰树花液态发酵转化米糠生产灰树花多糖的培养基组成进行研究。从基础发酵培养基出发,在米糠添加量（1%～5%（wt））、葡萄糖添加量（0.5%～2.5%）单因素试验的基础上,选择葡萄糖添加量（1%～2%）、米糠添加量（4%～6%）和蛋白胨添加量（0.3%～0.5%）三个因素进行L9（34）正交试验,得到了灰树花液态发酵过程中在基础培养基中最优的额外添加物和量为：米糠40～60g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨3～4g/L。得到胞内多糖为281.3mg/100mL,菌丝的平均产量值为1 246.7mg/100mL。试验结果表明,可以米糠为主要培养基成分替代或少用葡萄糖等碳源,以降低成本。     

灰树花多糖的制备及其生物活性研究进展

灰树花多糖因其独特的生物活性而日益引起人们的广泛关注,尤其在抗肿瘤、改善免疫系统功能、抗辐射和抗HIV等方面,现已被开发成多种保健品.本文综述了近年来国内外关于灰树花多糖的制备、构效关系及其生物活性的研究现状,并结合当前实际分析了灰树花多糖的应用与发展前景,旨在为灰树花多糖的相关研究和开发提供参考.     

种子深层培养对灰树花生长的影响

灰树花是食药两用真菌中的极品,其中灰树花多糖具有抗辐射、抗氧化、抑制肿瘤、激活免疫等功能.研究种子深层培养对灰树花生长的影响.结果显示:灰树花最佳种子培养基为马铃薯-葡萄糖-蛋白胨培养基;种子培养基初始pH为6.0;种子培养温度为25℃,最佳接种时间为108 h;接种量为10%.在此条件下进行深层发酵,灰树花菌丝体干重和胞外粗多糖的含量分别为5.325g/L和0.53g/L.     

液体发酵灰树花胞外多糖动力学研究

通过对灰树花胞外多糖的发酵研究,根据Logistic方程,提出了发酵过程中菌体生长、胞外多糖合成、基质消耗的动力学模型.采用数据分析软件对实验数据进行处理,得到了灰树花发酵合成胞外多糖的动力学模型参数,并对实验数据与模型进行了比较,结果表明模型与实验数据能较好地拟合,基本上反映了灰树花分批发酵胞外多糖过程的动力学特征.     

灰树花菌丝体糖肽GFPS1b体内抗肿瘤作用的研究

采用移植型小鼠黑色素瘤B16模型进行试验，研究灰树花菌丝体糖肽GFPS1b的体内抗肿瘤作用。结果表明，灰树花菌丝体糖肽GFPS1b对移植型小鼠黑色素瘤B16有显著的抑制作用，抑瘤率在30％以上；样品作用组瘤体积生长速率比阴性对照组慢，且瘤体积小；同时能延长荷瘤小鼠的存活期；HE染色结果表明，GFPS1b中、高剂量组能使B16肿瘤细胞呈团索状实性排列或弥漫性分布，并有肿瘤细胞大片坏死，坏死区周围可见凋亡细胞；免疫组化技术进一步显示，GFPS1b能诱导瘤组织中Bax基因蛋白表达，同时也能显著下调Bcl-2蛋白的表达。研究表明，GFPS1b对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用。     

基于亚铁螯合能力的灰树花蛋白酶解工艺优化及其抗氧化活性

以灰树花为原料,探究灰树花蛋白亚铁螯合肽的最佳制备条件,并对其抗氧化活性进行评价。从6?种蛋白酶中筛选出酶解最佳用酶,在此基础上,以亚铁螯合能力为响应值,进行单因素和正交试验,同时研究了灰树花蛋白亚铁螯合肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基的清除效果。结果表明,碱性蛋白酶酶解物的亚铁螯合能力最强,在pH?9、加酶量1?800?U/g、酶解温度55?℃、底物质量浓度0.5?g/100?mL、酶解时间2.5?h的条件下,灰树花蛋白亚铁螯合肽的亚铁螯合能力最强,可达1.854?mg/g,此时水解度为6.14%。灰树花蛋白亚铁螯合肽对DPPH自由基和羟自由基有较强的清除效果,且与多肽质量浓度呈正相关。结果显示,灰树花蛋白亚铁螯合肽具有良好的亚铁螯合能力,并具有较好的抗氧化活性,有望发展为新型的膳食补充剂。     

灰树花液态发酵菌丝体工艺优化及其体外抗氧化活性

以葡萄糖、蛋白胨、KH₂PO₄、果蔬汁用量为影响因素,应用响应面分析法探讨灰树花液体发酵的最优条件,并以菌丝体生物量为指标,测定体外抗氧化活性。实验结果表明,100 mL液体培养基,接种量10%时,最优培养基的配方:葡萄糖2.5%(w·v-1),蛋白胨0.5%(w·v-1),KH₂PO₄ 0.1%(w·v-1),果蔬汁15%(v·v-1)。在此条件下菌丝体生物量预测值为19.06 mg·mL-1,与实际测量值(18.12±0.214)mg·mL-1在误差范围内。抗氧化结果表明,灰树花菌丝体具有较强的清除能力,当质量浓度为1.5 mg·mL-1时,DPPH自由基的清除率达到69.78%±6.17%;ABTS自由基的清除率达到82.11%±7.24%;羟基自由基清除率达到59.73%±3.15%。因此,灰树花液体发酵培养的菌丝体可以作为潜在的抗氧化剂。