灰树花多糖的分离纯化及其体外抗肿瘤活性

探究低温提取的灰树花多糖的结构及其体外抗肿瘤活性。利用低温(4℃)水提醇沉法提取灰树花粗多糖,采用Sevage法除去粗糖中的蛋白,透析除去盐类、寡糖等小分子物质,得到多糖组分命名为GFP,其得率为2.13%;离子色谱检测其主要单糖为葡萄糖、半乳糖和甘露糖;高效液相色谱分析结果表明GFP为混合物,含有两个主要的大分子群体,分子量分别为1700.00 ku和34.12ku,其组分峰面积分别为66.57%和28.23%;红外光谱显示GFP可能为α-吡喃多糖。GFP的抗肿瘤活性研究表明:在一定的浓度范围内,GFP能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖;通过JC-1染色检测线粒体膜电势的变化发现GFP会引起线粒体膜电位降低,这说明GFP诱导的细胞凋亡伴随着膜电位的改变;经过GFP处理的HepG2细胞出现了典型的细胞凋亡的形态变化,细胞收缩,形成微核。以上均说明GFP诱导HepG2细胞凋亡。     

灰树花抗氧化活性多酚的提取纯化及其鉴定

以抗氧化活性为指标,通过单因素试验和正交试验对灰树花多酚提取工艺进行优化,确定最佳提取条件为提取时间2.5 h,提取温度70 ℃,料液比1∶50（g∶mL）。提取的多酚经大孔树脂NKA-Ⅱ动态吸附和解吸得到3个不同多酚组分,分别为体积分数为20%、40%及60%乙醇洗脱物。以DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率以及总还原力为指标测定不同组分的抗氧化活性,结果表明,体积分数为40%乙醇洗脱物的抗氧化作用最强。采用高效液相色谱-串联质谱对体积分数为40%乙醇洗脱物多酚组分进行分离鉴定,通过对应的质谱结果分析可推测其中的多酚组分包括2-羟基丁二酸、香豆酸、3-羟基白藜芦醇、白藜芦醇、二羟基苯乙酸、咖啡酸和4-羟基苯甲酸等物质。     

灰树花在米糠培养基上固态发酵产多糖研究

为高效利用稻谷加工副产品米糠并拟在固态发酵设备中发酵生产多糖保健食品,以米糠为基础培养基,对灰树花固态发酵米糠产多糖条件进行探索。针对定量米糠,选取水分、蛋白胨、葡萄糖和pH 值影响因素,以总多糖含量为评价指标进行试验,按L16(45)的正交试验方案得到优化培养基,并进一步通过单因素试验选择得到较优的固态发酵工艺条件。结果表明：优化固态培养基组成为原始米糠(水分为65%,按原始米糠质量计)、蛋白胨0.5%、葡萄糖4%、pH5.5、装样量20g/250mL 三角瓶,发酵条件为：接种量10%、培养温度25℃、摇床转速170r/min、培养时间11d,多糖得率以米糠为标准计算,可达4.52%。用SPSS 软件处理数据,得到表征多糖产量和培养基成分关系的回归方程。     

山药、苦荞对灰树花深层发酵产胞外多糖的影响

灰树花是一种药食两用真菌,可用液体深层发酵大规模生产灰树花胞外多糖。试验采用现代化的液体深层发酵技术,添加山药和苦荞,可分别使灰树花胞外多糖产量较传统液体深层发酵技术提高1．2g／L和0．5g／L左右。同时,对碳源、氮源作了进一步优化,为今后深入研究如何提高灰树花胞外多糖产量奠定了基础。     

灰树花多糖复合酶协同微波辅助提取工艺及抗氧化性研究

以灰树花干物质为原料,通过响应面Box－Behnken法优化复合酶协同微波辅助提取多糖工艺,采用sevage法去蛋白、001×7大孔树脂脱色,并对DEAE-52纤维素层析柱分离的组分进行抗氧化性研究。响应面试验结果显示,灰树花多糖最佳提取工艺条件为：在微波时间7 min、料水比1∶27（g/mL）、酶配比1∶1（质量比）、酶料比0.02 g/g条件下,灰树花多糖提取量为73.25 mg/g,与预测值的相对偏差为3.17%。采用纯水和0.05 mol/L NaCl对DEAE-52纤维素层析柱进行洗脱得到两种灰树花多糖（Grifola frondosa polysaccharide,GFP）GFP1、GFP2。体外抗氧化试验表明：GFP1、GFP2浓度为6 mg/mL时,还原力达到0.43和0.48;对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl,DPPH）自由基清除率最高分别为33.54%和50.38%、对羟自由基清除率最高分别为81.59%和90.21%、对超氧阴离子自由基清除率最高分别为79.23%和87.23%,GFP2相较GFP1具有更好的抗氧化能力。     

灰树花多糖的促进合成及其对酒精性胃损伤的缓解作用

目的探究鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb,HCT)醇提物对灰树花多糖(Grifolafrondosa polysaccharide, GFP)产量的影响及对慢性酒精性胃组织损伤的缓解作用。方法 基于HCT醇提物与GF发酵制得灰树花多糖(命名为HCTGFP),将108只KM雄性小鼠随机分为9组,除空白组外,各处理组每周二、四、六给药1 h后以5 mL/kg剂量灌胃50%食品级乙醇,连续给药4周;测定小鼠胃组织中氧化应激指标、抗炎标记物、炎症因子含量及其基因表达;测定小鼠血清中炎症因子含量并观察小鼠胃组织病理变化;采用16sRNA高通量测序法检测小鼠肠道菌群的变化。结果 HCT提高了37.6%胞外多糖产量(P<0.01),且产生的HCTGFP能够有效增加超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽含量、降低丙二醛含量,提高机体抗氧化水平;有效抑制环氧合酶-2、白细胞介素-1β、白细胞介素-6和一氧化氮合酶基因的表达,缓解体内炎症反应。在门水平上,与模型组相比,HCTGFPH显著回调了F/B比值(P<0.05),显著增加了拟杆菌门丰度(P<0.05)以及显著降低了厚...     

灰树花水提物的提取及其抑菌功能

为研究水溶液提取灰树花营养成分,采用水溶液对灰树花多糖进行了单因素及正交实验提取,用苯酚-硫酸法对多糖进行了测定。并用滤纸片法研究了灰树花水提物的抑菌能力。正交实验结果表明,影响灰树花多糖提取率的因素大小顺序依次是:温度、液料比、提取时间。灰树花多糖的提取最优条件为:温度80℃、液料比60∶1(mL∶g)、提取时间2.0h。灰树花水提物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有不同程度的抑制作用,抑菌圈直径分别为8.74、10.23、12.42mm。     

灰树花多糖抗肿瘤作用的临床观察

以晚期恶性肿瘤患者临床症状和体征是否改善为指标,对灰树花多糖在晚期恶性肿瘤中的辅助治疗作用采用随机分组的方法进行了临床研究.试验结果表明,灰树花多糖具有直接、迅速改善晚期恶性肿瘤患者临床症状和体征的作用,应用灰树花多糖辅助治疗晚期恶性肿瘤是安全有效的.     

响应面法优化灰树花中多糖超声波提取工艺的研究

通过响应面法分析优化了超声提取灰树花中多糖的工艺条件,并与传统水提法进行了比较分析.结果表明,超声提取灰树花中多糖的最佳工艺条件为:提取时间171 s,提取功率352.4 W,液料比47.9:1(mL:g),提取率预测值为14.23%,验证值为14.26%,与预测值的相对误差为0.21%,多糖得率比传统水提法有所提高,且提取时间大大减少.     

灰树花多糖深层发酵pH值及溶氧条件控制研究

对灰树花真菌发酵工艺参数pH值和溶氧进行优化研究表明,pH值及溶氧对灰树花菌体及胞内外多糖产量影响较大,优化的工艺参数为:溶氧75%,pH值为5.1(0h～96h),pH值为4.2(96h～160h),此条件下菌体、胞内外多糖产量分别提高23.02%、28.95%、25.95%,表明该优化设计工艺切实可行。