灰树花发酵过程天麻成分变化的HPLC检测方法研究

建立HPLC方法对天麻醇提取物成分及灰树花发酵液进行分析.色谱柱为Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为A:0.1％磷酸水和B:乙腈,以梯度洗脱:0min～35min,B:3％～30％(V/V);35min～45min,B:30％～70％ (Ⅴ/Ⅴ).流速1mL/min,柱温30℃,检测波长221nm.在此条件下,天麻提取液及灰树花发酵液中3种己确定的天麻成分具有良好的分离度,且线性关系良好;精密度高(RSD＜5％);回收率在96％～102％之间,同时检测到经过6d发酵后发酵液中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛质量浓度与发酵第0d相比分别下降了46.38％、11.85％和36.75％.该方法可以用于灰树花发酵过程中天麻成分变化情况的跟踪检测,为进一步探明天麻成分与灰树花代谢相互作用打下基础,同时也初步探明了灰树花对于天麻成分的利用情况.     

灰树花加硒米糠培养基液态发酵产富硒多糖的研究

为高值化利用稻谷加工副产品米糠,开发新型的保健食品,在加入米糠的培养基中,对灰树花液态发酵生产富硒灰树花多糖进行研究。通过单因素实验选择得到灰树花富硒液体培养过程中Se的最适添加量,并以菌丝干重、多糖含量、硒含量和富硒率为评价指标,按U12(124)均匀设计的实验方案,探索富集硒的多糖的产物与葡萄糖、米糠添加量和添加方式之间的关系。实验结果为:在硒含量为0～300mg/L下液态深层培养,菌丝均能生长,硒最适添加量为10mg/L,但超过50mg/L,菌丝生长和多糖生产都受到明显地抑制。回归得到方程,并通过方程预测优化培养基:硒、米糠、葡糖糖的添加量分别为0.11、7.5、2.5g/100mL时,此时菌丝干重为1.32g/100mL,菌丝多糖为0.444g/100mL。     

灰树花双歧杆菌功能性乳饮料生产工艺的探讨

将脱脂乳和以灰树花为原料提取的菌汁相混合，经杀菌后接种双歧杆菌和普通乳酸菌进行发酵，再经调配后制成功能性乳饮料，通过各项实验确定出最佳工艺条件及配方。     

灰树花液体菌种固体栽培

采用一种特殊培养基培育灰树花液体菌种 ,并进行固体料的搅拌式接种 .此栽培方式由于发菌很快而大大缩短了栽培周期 ,是一种灰树花的制种、栽培新技术 .     

灰树花保健食品的开发

介绍了菌类“灰树花”的类属、营养保健价值以及所开发的灰树花保健饮料、旅游方便食品的加工工艺流程、操作技术要点与产品质量。     

Zn、La对灰树花液体培养菌丝产量的影响

研究了微量元素锌、镧对灰树花菌丝产量的影响。在灰树 花液体发酵液中,加入不同浓度的硝酸镧和硫酸锌,接种 培养7d后,测定其菌丝干重。结果表明,锌含量对菌丝体 的生长影响显著,当培养基中锌含量大于1000mg/L时, 菌丝体的生长受到抑制。最佳工艺参数是:每1L培养基 中含锌100mg、马铃薯300g、葡萄糖36g、麸皮35g、 La(NO3)3 100mg,培养温度为25℃,摇床转速为150r/min。 实验中所得灰树花菌丝平均干重为0.4725g/25mL,最高 干重值为0.5938g/25mL。     

三种药用真菌灵芝、灰树花和姬松茸富锌能力的初步研究

对三种药用真菌灵芝、灰树花和姬松茸的富锌能力进行比较，在三种药用真菌中灵芝对于锌的富集能力最强．锌浓度在240mg／L时，菌丝锌含量达到6．42mg／g，富集率达30．39％；灰树花的富集能力最弱，富集率最高仅为1．66％．锌浓度超过100mg／L后有明显的抑制作用；姬松茸的富集能力也较强，锌浓度在300mg／L时富集率达到最大7．53％，茵丝锌含量也达到了4．07mg／g，相比较而言灵芝与姬松茸较适合作为富锌的载体。     

加锎液体培养灰树花富集有机锌的研究

灰树花是药食两用真菌,富含多糖、氨基酸和多种矿物元素.利用灰树花将无机锌转化为有机锌,能为人体补锌提供一条新的有效途径.稀土元素对生物的生长代谢具有促进作用.为了研究镧和锌元素存在时灰树花液体培养富集锌的能力,设计了四因素四水平的正交试验方案.其因素和水平分别为硝酸镧浓度50、100、150、200(mg/L培养基),1 L培养基中碳源马铃薯/葡萄糖150/18、200/24、250/30、300/36(g/g),氮源麸皮20、25、30、35(g/L培养基)和7水硫酸锌浓度100、600、1300、2000(mg/L培养基).分别以干菌丝有机锌含量、25 ml培养基有机锌产量和锌的转化率3个指标进行了分析,并分别给出了其最优培养条件,以用于指导灰树花液体培养基的设计.以25 ml培养基有机锌产量为指标时,得到优化培养基为1 L培养基中含ZnSO4·7H2O 2000 mg、麸皮35 g、La(NO3)3 50 mg、马铃薯300 g、葡萄糖36 g.优化培养基下有机锌的产量为1.472 mg/25ml,即58.88 mg/L培养基.     

灰树花深层培养中影响因素的研究

利用发酵罐对灰树花进行了深层培养。试验结果表明,发酵温度25℃、起始pH6.5、搅拌转速150r/min、接种量10%是最佳的培养条件;pH和通气量对菌丝的生长有极显著的影响,pH在5.50～6.50,通气量体积比(V/V)在1.00～1.40时,菌丝生物量积累最多;通过营养分析,认为可以利用深层培养灰树花进行功能及保健产品的开发。     

天麻、苦荞醇提物对灰树花胞外多糖合成酶类的影响及天麻苦荞醇提物复配发酵液的抗疲劳作用

该实验探究了天麻（Gastrodin elata Bl.）、苦荞（Tartary Buckwheat）醇提物的添加对灰树花（Grifola frondosa）胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）合成过程中磷酸葡萄糖变位酶（Phosphogluconate Mutase,PGM）、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose Pyrophosphorylase,UGPase）和磷酸葡萄糖异构酶（Phosphogluconate Isomerase,GPI）三种关键酶的影响。并以此为前提,采用动物实验进一步探究灰树花发酵液的抗疲劳作用。结果表明：天麻、苦荞醇提物的复配添加可显著增强PGM和UGPase的活力,降低GPI的活力,与空白组相比PGM和UGPase的活力分别增加了86.98%和69.12%,GPI的活力降低了65.78%。此外,其复配发酵液在抗疲劳作用方面表现最佳,显著高于空白组（p<0.05）和实验组（p<0.05）。主要在提高小鼠游泳力竭时间、肝糖原（Hepatic Glycogen,HG）和乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase,LDH）含量,降低乳酸（Lactic Acid,LA）和尿素氮（Blood Urea Nitrogen,BUN）含量几个方面体现。研究表明复配液的添加可显著改变灰树花EPS合成途径中关键酶类的活力,从而提升发酵液中EPS的含量,使其具有良好的抗疲劳作用。