杜仲水解液发酵可产丁酸

近日,中科院近代物理所科研人员利用兰州重离子加速器装置(HIRFL)提供的碳离子束非定向性辐照梭菌,筛选突变体与杜仲水解液融合发酵产生天然丁酸,此举填补了国内空白。据近代物理所研究员梁剑平介绍,丁酸是梭菌属代谢的一种产物,是重要的合成香料以及精细化工产品的原料,在香精、食品添加剂、医药等领域有广泛的应用。目前,丁酸大多由石油材料等工业合     

响应面分析法优化黑果枸杞总花色苷提取工艺及结构鉴定

以新疆产黑果枸杞为原料,采用溶剂浸提法提取黑果枸杞总花色苷。通过Box-Behnken响应面实验设计和DesignExpert8.0.6分析软件,以浸提温度、浸提时间、乙醇浓度和液料比四个因素为自变量,浸提液吸光度A为响应值,研究各个变量及其交互作用对黑果枸杞总花色苷浸提率的影响。模拟得到回归方程,并确定最佳工艺条件为:浸提温度58℃、浸提时间74min、乙醇浓度65%、液料比55:1(m L/g)。总花色苷纯化分级后,利用超高效液相色谱-电喷雾串联高分辨质谱(UPLC-DAD-ESI-QTOF-MS/MS)技术对其中流分HG-15进行研究。结果表明,黑果枸杞总花色苷HG-15流分中含有矮牵牛素-3-O-(6-O-对香豆酰)芸香糖苷-5-O-葡萄糖苷(Petunidin-3-O-(6-O-p-coumaryl)-rutinoside-5-O-glucoside)、锦葵素-3-反-对香豆酰芸香糖苷-5-O-葡萄糖糖苷(Malvidin-3-trans-pcoumaryl-rutinoside-5-O-glucoside)、飞燕草素-3-O-(6-O-乙酰)葡萄糖苷(Delphinidin-3-O-(6-Oacetyl)-glucoside)等六种主要花色苷。     

甘草的药用成份分析

目的改进2005年版《中国药典》I部甘草项下甘草苷的含量测定方法。方法对甘草中甘草营的提取方法进行了正交优选，并与药典方法进行了比较。结果最佳提取方法为用药材250倍体积的0．3％氨水，80℃水浴回流30min，含量测定结果高于2005年版《中国药典》I部项下甘草中甘草苷测定方法30％～50％。结论该方法能够准魂地测定甘草中甘草昔的含量。     

青霉菌柚苷酶的分离纯化及酶学性质

对来源于Penicillium sp.1523的柚苷酶分离纯化工艺进行了系统分析,依次采用超滤、硫酸铵盐析和Sephadex G-200凝胶过滤层析操作对柚苷酶进行逐级纯化,通过SDS-PAGE电泳对各步骤的纯化结果进行分析鉴定,并考察了温度、pH及不同金属离子对酶活性的影响。结果显示纯化后的柚苷酶比活力达到4478.76U/mg,纯化倍数为11.99倍,活力回收率为38.10%。纯化后的柚苷酶经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定显示两条清晰的条带,说明该酶由两个亚基组成,其分子量分别为89ku和72ku;同时酶学性质研究发现最适温度为50℃,热稳定性不理想,最适pH为4.0,Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、EDTA、Cu2+对该酶酶活有促进作用,而Fe2+、SDS在低浓度时便对柚苷酶酶活表现出抑制作用。本研究为青霉菌柚苷酶的大规模生物转化及分子改性提供了实验基础。     

紫外分光光度法测定半枝莲黄芩苷的含量

目的 :建立紫外分光光度法测定半枝莲黄芩苷的含量的方法。方法 :采用50%乙醇回流提取工艺和紫外分光光度法测定半枝莲中黄芩苷的含量,以黄芩苷为对照品,在278nm波长处测量。结果:得黄芩苷回归方程y=56.985x+0.0083(r2=0.9996),表明黄芩苷在0.00272~0.0136mg/m L浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)以黄芩苷计为99.8%,RSD为0.58%。结论 :此方法操作简单,精密度、稳定性和重复性良好,可以用于半枝莲中黄芩苷的含量测定方法之一。     

乌骨藤总苷抑制肝癌细胞增殖和AFP分泌

目的研究乌骨藤总苷对肝癌细胞增殖的作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT比色法)或移植瘤小鼠模型,观察不同浓度乌骨藤总苷对人肝癌Bel-7404、HepG2细胞和小鼠肝癌Hepl-6细胞生长的影响;研究乌骨藤总苷抑制HepG2细胞生长与调控甲胎蛋白AFP分泌的关系。结果乌骨藤总苷对人肝癌Bel-7404、HepG2细胞和小鼠肝癌Hepl-6细胞生长有显著的抑制作用,能显著降低AFP的分泌。结论乌骨藤总苷抑制肝癌细胞增殖其机制可能与抑制AFP分泌有关。     

马奶酒样乳杆菌乳糖酶LacZ基因的克隆,原核表达及活性分析

从开菲尔粒(Kefir)中分离出1株马奶酒样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens ZW3),具有较高的乳糖酶活性,以此菌株为材料,从其基因组中克隆得到LacZ型乳糖酶基因,该基因全长2007 bp,编码669个氨基酸。随后将该基因插入原核表达载体pET-32a中转入大肠杆菌BL21(DE3)进行过量表达,获得了其重组蛋白,纯化后分析了该重组蛋白的乳糖水解活性特点。结果显示,此蛋白在50℃,pH 7.0时乳糖水解活力最高,并在30~55℃,pH 5.0~9.0的范围仍能保持50%以上的酶活力,具有良好的工业应用潜力。     

高效液相色谱测定小儿肺热咳喘口服液中绿原酸与木犀草苷的含量

目的高效液相色谱法(HPLC)测定小儿肺热咳喘口服液中绿原酸与木犀草苷含量。方法采用ODS色谱柱,室温下,以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相直线梯度洗脱:0 min(A:10%;B:90%),30 min(A:30%;B:70%),流速0.9 mL/min,检测波长为327 nm。结果绿原酸和木犀草苷浓度分别在4.0～40.0μg/mL和0.46～4.6μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.6%和98.2%。结论本方法简便可行,结果准确可靠,可用于小儿肺热咳口服液的质量控制。     

几种物理因素对黄芩细胞悬浮系生长与黄芩苷含量变化的影响

为建立稳定的黄芩细胞悬浮系,采用悬浮细胞培养技术,研究了接种量、光照与否和pH值等3种物理因素对黄芩细胞悬浮系生长与黄芩苷含量变化的影响。结果表明,黄芩细胞悬浮系浊度随培养时间呈现"S"形变化曲线;采用MS基本培养基,添加0.2 mg·L-1 2,4-D、2.0 mg·L-1 6-BA和3%蔗糖,选取1.0 g·L-1的接种量、pH 5.8,并在25℃条件下进行暗培养,最有利于黄芩苷的积累,黄芩苷含量最高可达7.425μg·g-1FW。