青霉菌柚苷酶的分离纯化及酶学性质

对来源于Penicillium sp.1523的柚苷酶分离纯化工艺进行了系统分析,依次采用超滤、硫酸铵盐析和Sephadex G-200凝胶过滤层析操作对柚苷酶进行逐级纯化,通过SDS-PAGE电泳对各步骤的纯化结果进行分析鉴定,并考察了温度、pH及不同金属离子对酶活性的影响。结果显示纯化后的柚苷酶比活力达到4478.76U/mg,纯化倍数为11.99倍,活力回收率为38.10%。纯化后的柚苷酶经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定显示两条清晰的条带,说明该酶由两个亚基组成,其分子量分别为89ku和72ku;同时酶学性质研究发现最适温度为50℃,热稳定性不理想,最适pH为4.0,Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、EDTA、Cu2+对该酶酶活有促进作用,而Fe2+、SDS在低浓度时便对柚苷酶酶活表现出抑制作用。本研究为青霉菌柚苷酶的大规模生物转化及分子改性提供了实验基础。     

大孔树脂纯化宽叶缬草中缬草素工艺优化

以宽叶缬草中的缬草素提取物为原料,对选取的 5 种大孔吸附树脂进行静态吸附试验,确定 D101 树脂为最优吸附树脂。通过 D101 树脂吸附缬草素的上样量试验与动态洗脱试验,确定上样溶液中缬草素质量浓度为10.0mg/mL,上样体积为 20.0mL,洗脱体积为 4BV。采用三元二次通用组合试验,考察上样流速、洗脱流速和洗脱液甲醇体积分数对柱层析纯化缬草素效果的影响,建立大孔树脂柱层析纯化缬草素的数学模型,经回归与方差分析,对模型进行局部寻优得出最佳工艺条件为：上样流速 2.5BV/h、洗脱流速 1.7BV/h,甲醇体积分数 75%,纯化后缬草素理论得率为72.40%,验证值为(72.12 ± 0.1)%。     

缬草精油提取工艺及成分分析

采用索氏提取法并通过正交试验对缬草精油的提取工艺进行优化,用气相色谱-质谱定性定量分析检测缬草精油成分。结果表明,影响缬草精油提取的主要因素顺序为温度、提取时间、料液比;优化工艺为:溶剂石油醚、温度80℃、提取时间为2 h、料液比为1∶9(g/mL),此工艺条件下提取率为0.75%。缬草精油中共鉴定出42种化学成分,以萜烯类化合物为主,分别含有烯、醇、酮、酯、醚类化合物,其中乙酸龙脑酯、莰烯和β-蒎烯占主导地位,其相对质量分数分别为36.02%、10.15%和9.85%。     

生物工程专业实验教学体系的改革与实践

为提高生物工程专业实验教学质量,促进学生专业知识体系的构建和实践技能的提升,本文以湖南中医药大学生物工程专业实验教学改革为例,从课程体系、教学内容、实验项目、教学条件、教学方法、考核方式等六个方面讨论了基于课程体系整合和实验项目设计的专业实验教学体系改革。通过实验课程体系的调整优化,学生的学习积极性显著提高,综合素质和水平也明显上升,取得了良好的教学效果。     

柚苷酶产生菌Penicillium sp.1523分批发酵动力学研究

分析柚苷酶产生菌青霉(Penicillium sp.)1523在5 L自控发酵罐中的分批发酵动力学。探讨了青霉1523在5 L罐分批发酵过程中菌体生长、柚苷酶合成及基质消耗的变化规律,结果表明:菌体生长呈典型S型曲线,酶的合成与菌体生长趋势呈现部分相关性,属于部分偶联型。基于这些过程曲线的变化规律,结合Logistic方程和Luedeking-Piret方程,建立了柚苷酶产生菌青霉1523分批发酵过程的动力学模型,并通过数学推导和非线性拟合获得了模型中各参数的最佳取值,最终确定了能够较好表征青霉1523分批发酵过程中菌体生长、产物柚苷酶合成以及基质消耗的动力学方程。     

白地霉脂肪酶固定化及其催化光皮树油合成生物柴油的研究

本文采用响应面分析法对树脂NKA-Ⅱ固定脂肪酶的条件进行优化,并对其酶学性质和在催化光皮树油合成生物柴油中的操作稳定性进行了简单的探讨。首先通过单因素试验研究酶液/载体比、温度、缓冲液pH值等条件对固定化脂肪酶酶活力的影响,在此基础上,利用响应面试验设计对树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶的条件进行优化,用制备的固定脂肪酶催化光皮树油和甲醇反应合成生物柴油。结果表明：酶液/载体比、温度和缓冲液pH值对固定化酶的活力都有影响,树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶的最佳固定条件是：酶液/载体比为4∶1、温度为39℃、缓冲液pH值为7.5,固定化脂肪酶湿重活力高达216.2±4.5U/g,生物柴油转化率达90%以上。将响应面法应用于树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶条件的优化是可行的,制备的固定脂肪酶具有工业化生产的潜力。     

以工程素质培养为导向的《发酵工程》课程教学改革与实践

《发酵工程》为生物工程专业的特色骨干课程,其教学效果对于学生专业素质和综合能力的培养具有重要影响,因此以工程素质培养为导向,探讨本课程的教学改革非常必要。本研究从教学内容调整、教学手段设计和考核方式优化三个角度对本课程的教学改革过程进行了探讨,为加强生物工程专业学生工程素质的培养效果提供了参考。     

基于专题式教学的《酶工程》教学改革研究

《酶工程》为生物工程专业的特色骨干课程,其教学效果对于学生专业水平和综合素质培养具有重要影响,结合本课程特色,本团队探讨以专题式教学的模式进行教学改革。本文从课程教学内容的专题式划分、专题式教学方式的探讨和专题式教学效果的反馈三个角度对教学改革过程进行了探讨,相关内容为生物工程专业课程的教学改革提供了参考。     

金橘提取物对油脂抗氧化作用研究

通过碘量法检测金橘黄酮类及柠檬苦素类提取物的抗氧化活性.结果表明:金柑黄酮类及柠檬苦素类提取物均有一定的抗油脂氧化作用;黄酮类提取物添加量为0.02%时,有显著的抗油脂氧化活性,与VC及VE有协同增效作用;柠檬苦素类提取物添加量为0.08%时,有微弱的抗油脂氧化活性,与VC及VE无显著的协同增效作用,且抗氧化作用稳定性不好.