除草剂在植物体内的代谢与选择性及使用

简要论述了除草剂在植物体内的代谢反应及其调控。     

强肝抗纤汤防治大鼠肝纤维化的实验研究

目的研究强肝抗纤汤对大鼠肝纤维化的防治作用,为强肝抗纤汤的临床应用提供实验依据。方法将62只SPF级大鼠随机分为空白组,模型组,秋水仙碱组,中药低、高剂量组5组。采用复合因素法复制肝纤维化模型,造模前1 d,各组分别灌胃生理盐水或相应药物。造模及灌胃给药共进行6周,6周后对各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量进行检测,并进行大鼠肝脏病理形态学观察。结果与空白组比较,模型组大鼠ALT,AST含量显著升高,差异有高度统计意义(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠ALT,AST含量显著降低,差异有统计意义(P<0.05或P<0.01);与秋水仙碱组比较,强肝抗纤汤高、低剂量组ALT,AST含量降低更为显著,差异有高度统计意义(P<0.01)。结论强肝抗纤汤可有效预防实验大鼠肝纤维化形成,降低肝纤维化大鼠肝组织损伤程度,有效降低肝纤维化模型大鼠血清ALT,AST含量。     

大鼠心脏能量代谢底物随年龄增长的变化及调节

目的:研究大鼠心肌能量代谢的底物随年龄的变化及调节机制。方法:选用2个月和14个月的雄性SD大鼠,分别为青年对照(young&control,YC)组和老龄对照(aging&control,AC)组。实验末期利用超声心动图测量左心室收缩功能及舒张功能;利用高压液相波谱分析(HPLC)测定心脏ATP的含量;应用Western blot方法检测心肌GLUT-4及CPT-1的表达;用临床生化法检测血Glu、TG、TC、LDL-C、HDL-C、AST、ALT、ALP、BUN、Cr、LDH等指标。结果:实验末期,两组大鼠LVEF比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AC组的大鼠心尖ATP含量明显低于YC组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示,AC组大鼠GLUT-4与CPT-1表达量较YC组均下降,GLUT-4/CPT-1比值增大(P<0.05)。YC组大鼠血清ALP水平显著高于AC组,差异有统计学意义(P<0.05);两组大鼠的血清TG、Glu、TC、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、Cr、BUN以及LD比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:大鼠随年龄增长出现的心肌能量代谢改变,能量产生的减少早于心脏功能的改变。     

双波长微板赖氏法检测丙氨酸氨基转移酶方法的优化

目的对检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)的双波长微板赖氏法进行优化。方法采用正交试验优化双波长微板赖氏法的空白试剂(磷酸缓冲液或纯化水)和Na OH浓度(0.5、1.0、1.5、2.0 mol/L),考察方法的稳定性、线性拟合度、精密性和准确性。结果以纯化水作空白,1.0 mol/L Na OH作终止溶液时,该方法具有很好的稳定性;线性拟合度好,R2=0.998 3>0.990 0;检测38和57卡门单位的丙酮酸标准溶液的板内A492/630值的变异系数均<10%,100%的样本检测结果在可接受范围内。结论优化的检测ALT的双波长微板赖氏法具有很好的稳定性、线性、精密性和准确性,且通量高,适用于大规模检测。     

谷氨酸依赖型氨基转移酶的高通量筛选方法及其应用

目的:建立谷氨酸依赖型氨基转移酶-谷氨酸脱氢酶偶联反应的96孔板高通量筛选方法,并用于大肠杆菌氨基转移酶Wec E突变库的筛选。方法:通过优化偶联指示酶-谷氨酸脱氢酶、信号分子NADH浓度及双酶偶联反应时间,建立了光学法测定氨基转移酶活性的氨基转移酶-谷氨酸脱氢酶偶联反应方法;通过定点饱和突变技术构建了大肠杆菌氨基转移酶WecE的突变库;采用96孔板高通量初筛、摇瓶复筛获得了高活性的转氨酶突变体,并对纯化的突变体进行催化活力分析。结果:建立了谷氨酸依赖型氨基转移酶目标反应与0.5 U/ml L-谷氨酸脱氢酶和0.4 mmol/L NADH信号指示反应相偶联的筛选方法;构建了氨基转移酶WecE Tyr 321饱和突变库,通过96孔板高通量筛选,获得了催化活性比野生型提高3.4倍的突变体Y321F。结论:所建立高通量筛选方法背景干扰小,准确性高,为谷氨酸依赖型氨基转移酶分子进化提供了可行性方案。     

端粒酶的研究进展

端粒/端粒酶系统可以调节细胞的增殖。通过抑制端粒酶的活性而抑制细胞的增殖,是一种肿瘤治疗的策略;通过激活端粒酶的表达而促进细胞增殖,可以治疗某些退形性疾病。近年来对此系统的研究成为热点,本文就端粒酶的作用、调节及其与肿瘤、细胞永生化方面进行综述。     

可用于凝固植物油的糖基胶凝剂研发成功

日前，纽约城市大学的研究人员报道了他们利用低热量糖作为一种结构剂成功地将植物油变为了半固化态的研究成果。这一成果预示着人们未来可研发出新的健康的结构油来替代当前以饱和/反式脂肪酸（其与冠心病、肥胖症及糖尿病的发生关联较大）为基础生产的结构油。     

新型含糖氨基1，2，4-噻二唑类化合物的合成

利用糖基异硫氰酸酯与异脲、异硫脲的亲核加成反应,设计合成了含有糖基修饰的硫脲衍生物,再用Br2氧化关环,得到了标题化介物.合成的12个化合物均为新化合物,未见文献报道,结构经IR、1HNMR、MS及元素分析进行确证.     

地杆菌α-L-岩藻糖苷酶的分子改造及其在合成2’-岩藻糖基乳糖中的应用

对地杆菌α-L-岩藻糖苷酶进行分子改造，以提高其酶法合成2’-岩藻糖基乳糖（2’-fucosyllactose，2’-FL）的转化效率。利用易错聚合酶链式反应构建了α-L-岩藻糖苷酶的突变体文库，筛选得到一个合成2’-FL转化率提高的突变酶（mPbFuc29A1）。酶学性质研究结果表明mPbFuc29A1的最适pH值和温度分别为pH 5.0和40 ℃，最适温度较野生型PbFuc29A1提高了5 ℃；突变酶水解2’-FL的比活力提高到3 倍，但是水解4-硝基苯基-α-L-岩藻糖苷（4-nitrophenyl-α-L-fucopyranoside，pNP-FUC）和3’-岩藻糖基乳糖（3’-fucosyllactose，3’-FL）的比活力分别降低了22.8%和52.5%。以pNP-FUC和乳糖为底物，采用mPbFuc29A1酶法催化合成2’-FL和3’-FL，转化率分别为23.6%和56.4%，其中2’-FL的转化率较PbFuc29A1提高了9.1%。通过序列及定点突变分析发现mPbFuc29A1的氨基酸序列中有2 个位点发生突变（Asp21Val和Glu266Lys），其中位于loop区的Glu266Lys可能是mPbFuc29A1底物特异性和转糖苷产物组成发生改变的关键。优良的酶学特性使mPbFuc29A1在2’-FL合成中具有较大的应用潜力。     

谷氨酰胺转移酶改性对花生蛋白膜性能的影响

采用谷氨酰胺转移酶对花生蛋白进行改性制备花生蛋白膜以提高膜的性能,研究了谷氨酰胺转移酶对花生蛋白膜性能、微观结构、差示扫描热量以及红外光谱的影响。与对照相比,改性花生蛋白膜的拉伸强度、断裂伸长率和阻氧性分别提高了91.69%、53.69%和4.97%;水溶性和水蒸气透过率分别降低了15.12%和了32.85%。改性后,花生蛋白膜的内部孔洞变小,结构更加致密,但热稳定性下降。研究同时表明,谷氨酰胺转移酶主要作用于花生蛋白分子中的羟基及胺基,通过交联作用形成了酰胺基团,并改变了花生蛋白分子原有的二级结构。