利巴韦林发酵过程中腺嘌呤限量供应的初步研究

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TA208-LM是腺嘌呤缺陷型突变株,腺嘌呤浓度过低会影响菌体生长,过高又会反馈阻遏关键酶的合成。首先对腺嘌呤供体的种类和用量进行了研究,摇瓶发酵结果表明Springer 2506是最佳的腺嘌呤供体,用量在15 g/L时最有利于利巴韦林积累,但发酵后期腺嘌呤浓度过高。因此在降低Springer 2506的初始浓度的基础上,额外添加腺嘌呤,结果发现初始腺嘌呤总量为47.95 mg/L时,发酵液中腺嘌呤含量维持在40~50 mg/L,PRPP转酰胺酶活力最高,合成利巴韦林的量最大。实验表明,控制腺嘌呤供体酵母抽提物的初始用量,在发酵过程中流加酵母抽提物可能是维持适宜腺嘌呤浓度的有效手段。在7.5 L发酵罐上对Springer 2506分批补料发酵方式进行研究,结果发现以7.5 g/L Springer 2506为底物,流加7.5 g/L的Springer 2506,比一次性添加15 g/L的Springer 2506,利巴韦林的积累量提高11.29%。     

腺嘌呤合成腺苷甲硫氨酸的工程菌构建及其高产株筛选

为了获得腺嘌呤合成腺苷甲硫氨酸(SAM)的高产菌株,将酿酒酵母的SAM合成酶基因sam 2克隆至整合型质粒pCB1004-Pgpd的多克隆位点,获得重组质粒pCB1004-Pgpd-sam 2。在PEG-CaCl2介导下,重组质粒导入至雅致放射毛霉原生质体内,获得SAM工程菌。以腺嘌呤为合成前提物的条件下,通过菌株筛选获得1株高产的SAM工程菌,其SAM产量相对于出发菌株提高了1.5倍。     

鸟嘌呤和腺嘌呤吸附和电氧化行为的电化学石英晶体微天平研究

基于压电电化学石英晶体微天平(EQCM)技术,研究了腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G)在裸金电极和多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰金电极上的吸附和电氧化行为。结果表明,在金电极上,A的吸附量和氧化电流均比G大,而在MWCNTs/Au电极上,A和G可类似地吸附,但其氧化峰电位负移且氧化峰电流增大,表明MWCNTs对A和G的氧化具有催化作用。实验发现,A和G在裸金电极上氧化的电子转移数分别为5.4(RSD=±2.3%)和1.9(RSD=±1.3%),而在MWCNTs/Au电极上的氧化电子转移数分别为5.1(RSD=±1.8%)和1.5(RSD=±1.6%)。     

N^＋离子束对腺嘌呤核苷的辐照损伤研究

高压液相色谱分析发现，固态腺嘌呤核苷（ＡＲ）在２０ＫｅＶＮ＾＋离子束辐照下所释放的碱基量很少。但紫外光谱测试表明，离子束辐照后的ＡＲ样品在１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ或ｐＨ０．５Ｈ２ＳＯ４的处理下，碱基的产生量将显著增加，且平均约有１５％的受损ＡＲ分子可产生碱基Ａ，而热处理将引起其紫外吸收光谱和碱基释放量的改变，另外，计算了ＡＲ分子损伤和碱基Ａ分子产生的Ｇ值，发现它们有随剂量增大而减小的趋势，最后，分别以     

The Catalysis of NAD^＋ on Methanol Anode Oxidation Electrode for Direct Methanol Fuel Cell

A tentative idea of developing a liquid-catalytic system on methanol anode oxidation was proposed by analyzing the characteristics of methanol anode oxidation in direct methanol fuel cell. The kinetics of methanol oxidation at a glassy carbon electrode in the presence of nicotinamide adenine dinucleotide ( NAD^ ) was investigated. It is found that the current density of methanol oxidation increases greatly and the electrochemical reaction impedance reduces obviously in the presence of NAD^ compared with those in the adsenee of NAD^ . The catalytic activity of NAD^ is sensitive to temperature. When the temperature preponderates over 45℃, NAD^ is out of fuuction of catalysis for methanol oxidation, which is probably due to the denaturation of NAD^ at a relatively high temperature.     

腺嘌呤与一氧化碳复合物的结构与性质的理论研究

在B3LYP/6-311+G(d,p)水平上对腺嘌呤与一氧化碳复合物体系进行了理论计算,发现了六个能量极小的复合物。结合方式是CO的C或O原子与腺嘌呤的N-H键形成氢键,最稳定的复合物的结合能是-7.72kJ/mol,腺嘌呤与CO中的C结合具有优势。对复合物的振动分析发现,在C原子结合的复合物中CO的伸缩振动频率蓝移,而O结合的复合物中CO伸缩振动频率红移。     

细胞分裂素在蔬菜上的应用

植物细胞分裂素是一种植物生长调节剂,它是一类具有腺嘌呤环结构的植物体内激动素。能够刺激植物细胞分裂,诱导芽的生成并促进其生长,促进叶绿素形成,并能增加植物的含糖量及生物碱,增强光合作用,提高植物免疫力,改良农产品质量,提高植物的抗病性及抗寒、抗旱性,防止植物早衰及花果脱落,粮食作物可增产10%~15%,蔬菜、瓜果等经济作物增产15%~20%,并对番茄、黄瓜、烟草病毒病有很好防效。     

板蓝根中腺嘌呤含量测定

目的:建立高效液相色谱-二极管阵列检测器联用仪(HPLC-DAD)测定8个板蓝根样品中的腺嘌呤分析方法,并对腺嘌呤进行了定量分析。方法:色谱柱:Waters Symmetry C18(4.6×150mm,5(m);柱温:25℃;进样量:20ul;流速:0.6ml·min-1;检测波长:270nm。流动相:水,甲醇,采用梯度洗脱:0~2min,1%;2~5min,1~3%;5~10min,3~10%;10~20min,10~15%;20~30min,15~30%。结果:此分析方法的精密度、重现性、稳定性较好,线性回归方程为y=159702x+1703.2,r=0.9996,在浓度为1.0112×10-4-1.580mg/ml范围内线性良好,平均回收率达到94%以上。结论:此方法准确、可靠,可为板蓝根的质量控制提供参考。     

阿地福韦酯的合成工艺改进

阿地福韦酯由Gilead公司研制,2002年9月经美国食品药品管理局批准为处方药,该药抗感染,用于治疗慢性乙型肝炎。对晚期AIDS患者,能延长存活时间。本品无致畸、诱变、致癌及胚胎毒性。1合成路线的选择文献报道,阿地福韦酯的合成路线主要有2条。文献[1]是腺嘌呤与2-(二异丙氧基膦酰甲氧基)乙基甲磺酸缩合,水解后得到PMEA,再与特戊酸氯甲酯反应制得;文献[2]是以腺嘌呤、亚磷酸二乙酯为原料,经取代等反应得PMEA,再与特戊酸氯甲酯反应制得产物。文献[1]中因用碳酸铯作原料,价格昂贵,操作工艺复杂。因此,本工艺参考文献[2]的合成方法,以腺嘌…     

2’-脱氧腺苷的合成

以腺嘌呤(Ⅰ)和1-乙酰氧基-3,5-二(对甲基苯甲酰基)-2-脱氧核糖(Ⅱ)为原料,先将腺嘌呤进行硅醚保护,然后与Ⅱ催化缩合生成带保护基的2’-脱氧腺苷,脱保护基,得到-βD-2’-脱氧腺苷。考察了反应物(Ⅰ)和(Ⅱ)的摩尔比、催化剂的用量及反应温度对2’-脱氧腺苷收率的影响。结果表明,最佳反应条件为:(Ⅰ)∶(Ⅱ)(摩尔比)=1∶1,催化剂用量为0.54%,反应温度为20℃时,2’-脱氧腺苷的总收率可达65%。