米黑根毛霉脂肪酶基因的酵母重组表达和Kex2位点改造

米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。     

深黄被孢霉高产菌株差异表达未知基因UG1 RNAi表达质粒的构建

目的构建深黄被孢霉高产菌株差异表达未知基因UG1 RNAi表达质粒。方法以红色荧光蛋白DsReD作为报告基因,构建DsReD RNAi表达质粒pREDi;制备原生质体,通过PEG/CaCl2原生质体转化法将质粒pREDi转化至稳定表达DsReD基因的深黄被孢霉高产菌株中进行表达;在此基础上构建深黄被孢霉高产菌株差异表达未知基因UG1 RNAi表达质粒pUG1i,并对转染了质粒pREDi、pUG1i的受体菌进行Northern blot分析。结果质粒pREDi和pUG1i经酶切和测序鉴定表明构建正确;转化了表达质粒pREDi的菌株呈无色;转染质粒pUG1i的受体菌UG1和DsReD在基因表达水平上受到了抑制。结论成功构建了深黄被孢霉高产菌株差异表达未知基因UG1 RNAi表达质粒,为下一步通过RNAi共沉默DsReD和目的基因,以及进一步深入研究深黄被孢霉未知基因UG1对菌株合成ARA是否有影响和基因功能的分析奠定了基础。     

大豆疫霉根腐病防治措施

近年来,农业种植过程中病虫害的发生严重,给种植户带来了非常大的经济损失。本文中主要介绍了大豆的种植过程中,大豆疫霉根腐病防治措施。     

酶法制备不同品种大米淀粉的性质研究

以3个不同品种的大米为原料,采用链霉蛋白酶酶法提取高纯度大米淀粉,并对大米淀粉的主要成分、酶解力、破损率、黏滞特性和质构特性进行分析。结果表明,采用链霉蛋白酶酶法制备,可使不同品种大米淀粉的总淀粉含量均达到94%以上。不同品种大米淀粉的酶解力:吉粳88鄂糯9号金优207;颗粒破损率:鄂糯9号金优207吉粳88;凝胶硬度:金优207吉粳88鄂糯9号;凝胶黏度:鄂糯9号吉粳88金优207。     

棘孢木霉几丁质酶tachi2基因的原核表达及酶学性质研究

目的:实现棘孢木霉(Trichoderma asperellum)几丁质酶基因tachi2的原核高效表达,研究几丁质酶Tachi2的酶学性质。方法:利用PCR技术扩增得到几丁质酶基因tachi2,将其克隆到原核表达载体pEHISTEV中,测序后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后进行Tachi2蛋白的纯化和复性。用纯化的目的蛋白Tachi2进行几丁质酶酶学性质的研究。结果:tachi2基因在重组大肠杆菌中正确表达,其主要以包涵体形式存在;重组蛋白Tachi2分子量约为44kDa,经过纯化和复性后得到的Tachi2有较高的几丁质酶活性。该酶的最适温度为40℃,最适pH值为7.0,几丁质酶在40℃以下比较稳定、pH 6～9时酶有较高活性,受Cu2+和Zn2+的强烈抑制。结论:成功实现了棘孢木霉几丁质酶基因tachi2的原核高效表达,表达纯化了重组蛋白,明确了几丁质酶Tachi2的酶学性质,为该几丁质酶的进一步开发利用和深入研究奠定了基础。     

一例鹅饲喂霉饲料引起中毒的诊治

黄曲霉在自然界分布很广,特别是玉米、稻谷等饲料因受湿、受热或含水量过高在堆积时间过长,通风不良等条件下易生多种霉菌,并产生代谢产物霉菌毒素,畜禽在采食含有霉菌毒素的饲料后,即可引起中毒。现将诊治情况报告如下,并希望得到种禽饲养户的高度重视。     

玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治

玉米赤霉烯酮作为一种真菌次级代谢产物广泛存在于谷物和饲料中,严重影响人和动物的健康,文章就玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治进行综述。     

新生仔猪黄曲霉毒素与玉米赤霉烯酮中毒的处理

霉菌毒素中毒在目前养猪生产中较为常见,通过临床调查和实验室分析,确认华南地区某猪场出现的新生仔猪头骨发育不全和阴户红肿是由黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮中毒引起,并针对此问题提出换料、解毒等处理措施,这是近20年来我国首次报道在同一猪场同时出现黄曲霉毒素与玉米赤霉烯酮导致新生仔猪中毒且引起发育畸形的情况。