多重PCR检测4种常见食源性致病菌

目的 建立一种多重聚合酶链式反应法(multiplex polymerase chain reaction, MPCR)快速检测肉制品中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌和单增李斯特氏菌的分析方法。方法 选取金黄色葡萄球菌nuc基因、沙门氏菌SipB基因、志贺氏菌ipaH基因、单增李斯特菌inlA基因作为目标基因, 设计4对PCR引物, 建立并优化多重PCR反应体系, 评价该体系的特异性和灵敏度, 并对人工污染的熟肉样品进行检测。结果 构建的多重PCR方法特异性强、灵敏度高, 人工污染熟肉匀浆中4种致病菌的检出限为103 CFU/mL。结论 构建的多重PCR检测方法能够快速、准确、高效地检测肉制品中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌和单增李斯特氏菌, 为食源性疾病菌的快速检测提供参考依据。     

火腿肠加工过程中微生物风险研究

目的开展火腿肠加工过程中微生物污染风险研究,掌握卫生指示菌、主要食源性致病菌的分布特征和污染途径,为火腿肠加工过程中微生物污染风险控制提供依据。方法 2015—2017年对4家企业的712份产品相关样品(原辅料、中间产品和终产品)和环境样品(包括生产用水、空气沉降菌、人员、工具等)进行监测,选择传统分离培养方法对卫生指示菌和主要食源性致病菌进行检验,并对沙门菌进行血清学鉴定。结果原辅料中菌落总数10~5 CFU/g和大肠菌群10~3 CFU/g的样品比例分别为33.00%(33/100)和29.00%(29/100);中间产品中菌落总数10~5 CFU/g和大肠菌群10~3 CFU/g的样品比例分别为62.86%(66/105)和36.19%(38/105);终产品未检出菌落总数10~4 CFU/g的样品,大肠菌群均10 CFU/g。结论火腿肠加工过程存在微生物污染风险,本研究对掌握火腿肠加工过程的污染分布,确定关键控制点,为制定相关生产质量管理规范、确保终产品的食品安全具有重要意义。     

温州市食品中沙门菌污染状况及特征分析

目的了解温州市食品中沙门菌的污染状况,分析分离的沙门菌血清型分布、耐药性及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特征。方法依据GB 4789.4—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行菌株分离鉴定及血清学分型,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,PFGE法进行分子分型。结果 6类食品2 039份样品中,37份样品检出沙门菌,检出率为1.8%,其中生禽肉和生畜肉检出率较高,分别为6.9%(20/290)和3.4%(10/290)。37株沙门菌分属16种血清型,居前三位分别为鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌和肠炎沙门菌。81.1%(30/37)的菌株对17种抗生素产生不同程度的耐药,呈现24种耐药谱,多重耐药率为56.8%(21/37)。PFGE图谱分为31种PFGE带型,呈多态性。结论沙门菌在温州市食品中存在一定的污染率,耐药情况形式严峻,PFGE图谱的聚集性与沙门菌的血清型有一定的联系,与耐药谱之间的关联性并不明确。     

南京市某食品厂酱卤熟肉制品生产加工过程微生物污染状况分析

目的了解南京市某食品厂酱卤熟肉制品加工过程中微生物污染状况及分布情况。方法 2016—2017年在南京市某食品厂采集生产加工过程中食品样品120份(原辅料60份、中间产品28份、成品24份、终产品8份)、环境样品204份、空气样品58份和生产用水14份,共396份,按照GB 4789食品微生物学检验系列标准和GB/T 16294—2010《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》对卫生指示菌和主要食源性致病菌进行检测,并对沙门菌进行血清型鉴定。结果在食品样品和环境样品中,李斯特菌检出率为7.4%(24/324),金黄色葡萄球菌检出率为2.6%(5/196),沙门菌检出率为1.9%(6/324);其中李斯特菌有2株单核细胞增生李斯特菌,其他以格氏李斯特菌和伊氏李斯特菌为主;沙门菌经血清学分型共4种血清型,分别为肠炎沙门菌(2株)、鼠伤寒沙门菌(2株)、依桑吉沙门菌(1株)和亚利桑那沙门菌(1株)。在原辅料、中间产品以及人员、仪器设备、清洁工具中均有致病菌检出,但成品和终产品中未检出致病菌。结论酱卤熟肉制品生产过程原辅料和环境中均存在多种致病菌污染。     

石家庄市零售鸡肉样品中弓形杆菌污染调查

目的调查石家庄市零售鸡肉中弓形杆菌的污染情况,为石家庄市弓形杆菌分布特征和防控提供基础数据支持。方法从石家庄市市内四区的菜市场、超市、连锁肉店随机购买零售鸡肉样品90份,应用驱动增强动力双孔滤膜法从样品中分离培养弓形杆菌,利用弓形杆菌多重聚合酶链式反应(PCR)检测及测序的方法对分离菌株进行种属鉴定,利用16S rDNA、rpoB基因测序的方法验证菌种鉴定结果。结果 90份鸡肉样品中,60份样品检出弓形杆菌86株,其中嗜低温弓形杆菌49株、布氏弓形杆菌37株,弓形杆菌检出率为66.67%(60/90)。60份阳性样品中,嗜低温弓形杆菌阳性样品45份(75.00%),布氏弓形杆菌阳性样品35份(58.33%)。嗜低温弓形杆菌和布氏弓形杆菌混合感染阳性样品20份,占比为22.22%(20/90)。不同采样点弓形杆菌检出率有较大差异。结论石家庄市零售鸡肉中弓形杆菌污染较重,嗜低温弓形杆菌污染率高于布氏弓形杆菌,两种弓形杆菌混合污染样品率较高。     

《食品中致病菌限量》标准实施反馈意见分析和探讨

目的对GB 29921—2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》实施过程中的问题和建议进行整理和分析,了解监督管理部门、检验/检测机构、企业、相关科研专家等对标准的理解和执行情况,为标准的修订提供参考。方法通过"食品安全国家标准跟踪评价及意见反馈平台"收集标准反馈意见,采用内容分析法编码数据,对编码数据进行统计分析。结果自2016年1月1日至2017年12月31日,共收集意见和建议967条,其中,有效意见和建议745条,主要涉及标准范围(42%,313/745)、食品分类(34%,252/745)、限量指标(9%,68/745)、采样方案(3%,23/745)、与其他标准的关系(3%,21/745)等。结论需要对《食品安全国家标准食品中致病菌限量》进行修订,同时应继续加强食品安全国家标准的宣贯工作,提高监管人员、检验机构及企业对于食品中微生物危害风险的认识和管理水平。     

近红外光谱建模法快速测定桔子精油中柠檬烯的含量

为了解日常检测分离株产肠毒素和耐药情况,探讨食源性金黄色葡萄球菌产毒素的类型及分布状况,研究其耐药特性,对本实验室2016年～2017年日常食品检测中的分离株,分别用全自动荧光酶联免疫法检测肠毒素总量和酶联免疫吸附法对肠毒素SEA～SEE进行分型,并用全自动微生物鉴定药敏分析系统进行药敏试验。结果表明,370份食品中分离到的29株金黄色葡萄球菌,产肠毒素的有16株,阳性率为55.2%,其中食物中毒分离株5株都为肠毒素阳性。产2种及以上肠毒素的菌株为12株,占41.4%。A型～E型常见肠毒素都有检出,其中产SEE的菌株最多,有12株,占41.4%,产SEA的菌株次之,为11株。29株食源性金黄色葡萄球菌对庆大霉素、妥布霉素、青霉素、安苄西林、苯唑西林、阿莫西林-克拉维酸、复方新诺名、克林霉素、红霉素、利福平、四环素均有不同程度的耐药,并出现多重耐药性,其中对青霉素和安苄西林的耐药率最高,均为82.8%,其次为红霉素44.8%。该研究的食品监测中分离到的金黄色葡萄球菌其产肠毒素率较高,主要的类型为SEE和SEA。而且分离得到的食源性金黄色葡萄球菌存在不同程度的耐药性和多重耐药现象,建议从各个环节加强监测,降低因耐药菌带来的食品安全风险。     

乳酸菌的生物拮抗作用

论述了乳酸菌的生物拮抗作用,包括对致病菌和乳酸菌之间的拮抗。并简要论述了产生拮抗作用的可能因素或机理,为乳酸菌进一步开发提供一种理论依据。     

用Dot—ELISA方法检测生肉中的沙门菌

目的 检测生肉中的沙门菌带菌情况,为预防沙门菌食物中毒提供理论参数.方法 应用Dot-ELISA法对西宁市某屠宰厂85份猪胴体,101份羊胴体和71份牛胴体进行沙门菌的检测,同时用常规分离培养鉴定技术作为对照试验.结果 Dot-ELISA法检出沙门菌阳性率分别为76.47％( 65/85),55.44％ (56/101)和46.48％(33/71);而常规分离培养鉴定技术检出沙门菌阳性率分别为78.82％( 67/85)、47.52％ (48/101)和43.66％(31/71).两种方法的阳性符合率分别为86.57％、85.71％和81.82％,两种方法在检测中的差异无显著性(P＞0.05).结论 Dot-ELISA法检测沙门菌快速、准确,且与分离培养法阳性符合率较高;生肉中沙门菌带菌现象较为严重,存在一定的食品安全隐患.     

生物梅里埃 提供全面食品微生物鉴定解决方案

食品微生物实验室的一项最基本的工作就是进行微生物鉴定。根据食品安全国家标准的规定,对于食源性致病菌,如检测结果为阳性,则需进行微生物鉴定实验,选择通过生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行相关的鉴定实验。作为全球食品微生物鉴定市场的领导者,法国生物梅里埃可以提供从手工鉴定条到全自动化微生物鉴定系统的完整解决方案,本文在此做简单介绍。