豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定方法的改进

在ISO 14902:2001《动物饲料-大豆制品胰蛋白酶抑制剂活性的测定》方法的基础上,对影响豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定的一些关键因素进行改进与补充,为豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定提供新方法。采用分光光度法,对样品提取方法、样品脂肪含量、提取液过滤与否影响、结果计算公式等进行相应改进研究,使改进后的测定方法操作简便快速、变异系数小,适用性强、计算方式简单、计算结果准确、检测速度提高并具有足够高的重复性等优点,适宜日常豆制食品检验工作的开展。     

DNA聚合酶中宿主细胞核酸残留的分析

目的分析市售不同厂家DNA聚合酶中的宿主细胞核酸残留。方法根据E.coli 16S rRNA基因序列设计特异引物及探针,建立基于Taqman探针技术的Real-time PCR检测方法,检测基因工程制品中E.coli的核酸残留。结果建立的Real-time PCR法检测市售不同厂家的DNA聚合酶中均有宿主细胞E.coli核酸残留,但不同来源的DNA聚合酶其宿主细胞核酸残留量不同。结论应用PCR方法检测基因工程产品,尤其是E.coli制备的生物制品时,应注意DNA聚合酶中核酸残留对检测结果的影响;应用Real time PCR法定量检测时,建议将Ct值控制在30以内,以减小DNA聚合酶背景残留物的影响。