可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在E.coil中的表达、纯化及其生物学活性

目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。     

涂料消费税征收解读

2015年1月26日,国家财政部与国家税务总局联合发布了"关于对涂料征收消费税的通知"(以下简称"通知"),引起行业广泛关注。"通知"要求自2015年2月1日起对涂料征收消费税,在生产、委托加工和进口环节征收,适用税率均为4%。"通知"还特别指出,对施工状态下挥发性有机物(VOC)含量低于420 g/L(含)的涂料免征消费税。为帮助涂料企业更好地理解"通知"内容,《现代涂料与涂装》联合全国涂装信     

中医学视角下城市物质空间的生命要素探析

通过借鉴中医学整体观和生命观的相关理论,从认识城市有机体的生命属性入手,发现并提炼能够产生和传递城市运营所需各种能量的生命要素:廊道和功能体。阐释了其多层级、多性质和多形态的特点,提出了功能体有动力、廊道成系统、敏感点有活力的疏通策略,旨在促进城市各种能量的有机循环,从而维护城市的健康与安全,提高城市生活的效率与质量。     

APEC·自然颂

2014年11月10日的APEC(亚太经合组织领导人非正式会议)开幕焰火晚会《自然颂》,围绕"上善若水,同舟共济"的主题,焰火分为六个篇章:序幕——《摇篮曲》春生夏长秋收冬藏尾声——《永恒大道》焰火展示了大自然四季花草万物的鲜明性格、生长更迭。传递中国文化人与自然和谐共生的哲理,强调人类对大自然的尊崇和热爱。焰火燃放时间仅有七分半钟,用高空焰火、低空焰火、装置焰火及特效造型焰火四种形式来完成。所有烟花没有使用任何重金属物质、重金属化合物、或带副作用的物质与违禁药物。核心药剂有65%完全没有添加硫磺。     

跟郭素勤学印染花布

授课门类:印染艺术追溯平阳印染工艺已有百年历史,比蜡染工艺制版复杂,与木版年画比较接近。木版年画是在木头上以阳刻刀法制版,而套色印染工艺则是在适合的纸板上,把事先设计好的图样采用阴刻的形式授课大师:郭素勤山西省临汾市剪纸艺术家协会会长,省级非物质文化遗产项目"平阳印染布艺"传承人。致力于古     

功能性包装薄膜论略(一)

概述了各种功能性薄膜及其生产方法,在此基础上,详细地介绍了含蒸镀氧化物涂层的透明阻隔性包装薄膜与吸氧型阻隔性包装薄膜。     

与咖啡师黄俊豪的对话

Q如何选择一家专业的咖啡馆?A去咖啡馆的人,基本有两类,一类是为了享受环境,另一类则在寻求好的咖啡。如果趋于后者,我的建议是尽量和咖啡师多一些互动、交流,在聊天的过程中,评判他身为咖啡师的自信。这种信心的表现来自于他本身的专业程度,以及整个咖啡馆所经营的产品水准,甚至是背后的品牌文化。如果这家咖啡馆并非虚有其表,那么身为咖啡师,一定很乐于聊起本馆的话题。另外,我们到一家新店,不妨先尝试一下它们的基本款,如美式咖啡或手     

奉节(古缶皿)子鸡

<正>位于瞿唐峡口的奉节,美食云集,其中最特别的就是竹园镇的(古缶皿)子鸡。因奉节白帝城又名子阳城,(古缶皿)子鸡也被称为子阳鸡和紫阳鸡。这道菜的炊具与食材都与众不同,充斥着浓烈的下川东气息,历史悠久,被列入重庆市第三批非物质文化遗产名录。烹饪(古缶皿)子鸡的炊具叫气(古缶皿)子,2012年出版的第6版《现代汉语词典》中对"(古缶皿)"字的解释是"周围陡直的深锅"。事实上,由土陶烧制而成的子比字面解释要复杂得多,将(古缶皿)子从底部翻转,可以看到(古缶皿)壁为夹层,上部有很多通往(古缶皿)内的气孔。在奉     

讲诚信 重品质 保安全——记盘锦鼎翔米业有限公司

盘锦鼎翔米业有限公司成立于1953年,是一家拥有60多年历史的科技型稻米种植、生产和加工企业。多年来,公司始终坚持以生产口感好、健康安全的粳冠牌系列主食大米为己任,通过建立从土地到餐桌的全程质量管理体系,努力向国内一流大米品牌的目标不断前进。种植环境优越粳冠大米种植基地位于东经121。55′、北纬41°9′的北方生态名城、东北优质水稻主产区——辽宁盘锦西郊。作为占地72平方公里的鼎翔生态     

UPLC法同时测定阿托伐他汀钙中15个杂质含量

目的建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定阿托伐他汀钙原料药中15个杂质含量的方法。方法采用岛津Shim-pack Velox PFPP(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以3.9 g/L醋酸铵缓冲液(pH 5.0):乙腈:甲醇:四氢呋喃(无稳定剂)=67:21:6:6为流动相A,3.9 g/L醋酸铵缓冲液(pH 5.0):乙腈:甲醇:四氢呋喃(无稳定剂)=27:61:6:6为流动相B;梯度洗脱,流速0.43 ml/min,检测波长244 nm,柱温35℃,样品室温度10℃;进样量1.8μl。结果阿托伐他汀钙及各杂质峰间分离良好,在0.3~3μg/ml范围内15个杂质均呈良好的线性关系(r均>0.999,n=6),各杂质平均回收率分别为96.3%,99.1%,99.9%,102.4%,96.4%,99.8%,99.4%,104.9%,106.4%,105.4%,100.1%,98.9%,94.7%,94.4%,101.4%,且不同浓度间平行性良好。15个杂质重复性、进样精密度、中间精密度均良好,48 h内均较稳定。此法除对色谱柱要求较高外,耐用性良好。结论本方法简便、快速、分离度好、专属性强,经方法学验证可用于阿托伐他汀钙原料药杂质质量控制。