霍乱毒素B亚单位植物细胞表达载体的构建及其在人参细胞中的表达

目的构建霍乱毒素B亚单位(CTB)植物细胞表达载体,并在人参细胞中进行表达。方法根据人参偏爱密码子,采用引物延伸PCR法合成CTB基因,连入pBI121质粒,构建植物细胞表达载体,转化人参细胞后,采用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定。结果测序结果表明,PCR法合成的目的基因序列与设计完全一致,构建的植物细胞表达载体经双酶切鉴定显示,所含基因片段大小与预期相符。提取转基因人参细胞基因组DNA和mRNA,分别进行PCR和RT-PCR鉴定,均可见约400 bp的特异性片段。Western blot分析可见相对分子质量约12 000的特异性条带。结论已成功构建了含霍乱毒素B亚单位的植物细胞表达载体,并在人参细胞中获得表达。     

苏州河河口水闸大跨度薄壁空箱式底板结构设计

对苏州河河口水闸工程大跨度底板结构的设计过程进行论述和分析。通过方案比选确定底板采用钢壳混凝土薄壁空箱结构形式,运用空间线弹性有限元模型和非线性固结有限元模型对拟定的底板结构布置进行优化和计算分析,并与常规设计方法进行对比,提高了设计的可靠度。对设计中的技术关键点提出了相应的处理措施。对水闸调试运行期间的底板监测数据进行分析,验证了底板结构设计的正确性和合理性。     

苏州河河口水闸底板结构设计

通过对苏州河河口水闸底板结构的方案比选，确定底板采用钢壳混凝土薄壁空箱结构型式．运用三维线弹性有限元模型和Biot非线性固结有限元模型，对拟定的底板结构布置进行了优化计算和分析．同时，对闸底板设计中的技术关键提出了相应的处理措施．水闸调试运行期的底板原型观测数据表明，水闸底板结构设计正确、合理．     

核桃植脂末加工工艺研究及其在咖啡中的应用

以核桃油制备核桃植脂末。以植脂末包埋率为指标，在单因素试验的基础上通过正交试验优化工艺条件，并将制备的核桃植脂末应用在咖啡中。结果表明：最优工艺条件为芯壁材质量比1∶4、固形物(芯材和壁材)含量20%(以乳化液总质量为基准)、复合壁材质量比(大豆分离蛋白∶麦芽糊精)1∶2、乳化温度35℃、乳化剂添加量3%(以固形物质量为基准),在此工艺下制得的核桃植脂末包埋率为97.13%。当植脂末∶咖啡∶白砂糖质量比为1∶2∶0.5时，咖啡液风味最佳，感官评分最高。     

微波合成信号源的工作原理及故障分析

阐述了合成信号源的工作原理，以GT9000信号源为例着重对锁相环电路进行了分析，并对其常见故障及原因做了叙述。     

熨平板碟簧拉杆失效分析与设计改进探讨

随着时代的发展,沥青摊铺机越来越广泛的用于高速工路、市政道路、铁路路基、机场跑道等沥青结构层和面层的摊铺施工,是修筑公路和城市道路的主要设备,更是高等级公路施工不可缺少的关键施工机械。     

Survivin与肿瘤研究进展

Survivin是最新发现的、最强的凋亡抑制因子 ,属于IAP家族 ,但结构独特 ,组织分布具有明显的细胞选择性 肿瘤特异性。其特异性及抗凋亡作用使其在对肿瘤发生发展的研究中作用日益凸现 ,使其在探讨肿瘤诊治领域成为一个新热点。     

用乳糖作为诱导剂进行重组蛋白的表达

目的研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组蛋白的表达。方法以表达SARS刺突蛋白片段的工程菌BL21(DE3)/S为模型菌株,采用葡萄糖、甘油作为碳源,不同浓度的乳糖和异乳糖作为诱导剂,在摇瓶中进行表达实验。在40L发酵罐中进行验证。结果在摇瓶实验中,乳糖浓度大于0.5mmol/L即可以很好地诱导目的蛋白的表达,表达量与IPTG诱导时相当;葡萄糖的存在可以抑制乳糖,但不能抑制异乳糖的诱导作用;使用甘油作为碳源,既不抑制乳糖,也不抑制异乳糖的诱导作用。在发酵罐实验中,诱导初始阶段葡糖糖的存在抑制乳糖的诱导作用。结论在以乳糖操纵子为调控手段的工程菌表达系统中,可以使用乳糖作为诱导剂,诱导阶段应采用非葡萄糖碳源。     

在无血清无蛋白培养基中培养Vero细胞

目的开发在无血清无蛋白培养基(PF)中培养Vero细胞的技术。方法在DMEM/F12培养基中添加酵母提取物和大豆水解物,配制成无血清无蛋白培养基。使用配制好的无血清无蛋白培养基,分别在玻璃、聚乙烯醇缩丁醛(PVB)和聚苯乙烯(PS-TC)培养面上培养Vero细胞,观察细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线,以含血清培养基BM为对照。结果与BM培养基比较,在玻璃培养面上,PF培养基不支持Vero细胞生长和分裂;在PVB培养面上,PF培养基支持Vero细胞生长,但不支持分裂;在PS-TC培养面上,PF培养基支持Vero细胞的生长和分裂。结论在PS-TC培养面上,PF培养基适合培养Vero细胞。     

混凝土靶养护时间与抗压强度和聚能射孔器穿孔深度的关系初探

混凝土靶是检验聚能射孔器穿孔性能的标准物质,其性能波动影响试验结果.通过对2组聚能射孔器混凝土靶试验结果的分析,认为随养护时间的增加混凝土靶抗压强度逐渐增加,同时聚能射孔器穿孔深度相应降低.抗压强度每增加10 MPa,平均穿孔深度降低约为6%～12%.为消除混凝土靶抗压强度变化对试验结果的影响,应尽可能在混凝土靶养护28 d、抗压强度不小于34.5 MPa后,在最短时间内完成试验.