苯乳酸与食品防腐剂联合抑菌效果

以食源性病原菌Escherichia coli和Listeria monocytogenes为指示菌,研究了苯乳酸与常用食品防腐剂的联合抑菌作用。采用微量二倍稀释法和棋盘法分别测定苯乳酸与6种防腐剂的最小抑菌浓度及联合抑菌指数,并通过时间—杀菌曲线进一步考察复配较优组合的协同抑菌效果。结果显示:苯乳酸与乳酸链球菌素联用对E.coli和L.monocytogenes分别表现为无关和相加作用;苯乳酸与对羟基苯甲酸乙酯联用对2株指示菌均为相加作用;与EDTA-Na2和ε-聚赖氨酸联用对2株指示菌均为无关作用;苯乳酸分别与苯甲酸钠和山梨酸钾联用对E.coli均表现为协同作用,对L.monocytogenes均表现为相加作用。苯乳酸分别与苯甲酸钠和山梨酸钾联合使用后,苯乳酸使用剂量降低75%,苯甲酸钠和山梨酸钾的使用剂量均可以降低50%。     

琼脂扩散法定量测定多黏菌素对霉菌的抑菌活力

本文研究抗菌肽抑制霉菌的活力定量测定方法,选用多黏菌素B和产黄青霉作为研究对象,采用琼脂扩散法优化指示菌浓度、抗菌肽添加量、培养时间等影响活力定量测定的条件,进一步以黑曲霉为指示菌进行方法验证;通过建立抗菌肽浓度对数值与抑菌圈直径之间的线性方程进行抗菌肽抑菌活力的计算。研究结果显示,琼脂扩散法测定多黏菌素B抑制霉菌活力的最佳条件:90 mm平板添加PDA培养基15 mL,指示菌孢子浓度(1～5)×106个/m L,多黏菌素B添加量100μL,4℃预扩散时间6～10 h,28℃培养时间24h。以黑曲霉为指示菌进行方法验证时发现方法重复性好、精密度高。在此条件下,多黏菌素B对产黄青霉和黑曲霉的抑菌活性分别为524.81 U/mg和605.76 U/mg。该研究为抗菌肽在试验和生产过程中的活力测定提供参考和依据。     

侧孢短芽孢杆菌抗菌肽的结构与性质

为了研究侧孢短芽孢杆菌S62-9所产抗菌肽的结构与性质,采用MALDI-TOF/TOF、FT-IR对抗菌肽的相对分子质量、氨基酸序列及二级结构进行解析。结果显示,该抗菌肽的相对分子质量为1 602.004 4 Da,由11个氨基酸组成:L-Y-K-L-V-K-V-V-L-N-M,其N端有一分子胆碱修饰,C端有细交链孢菌酮酸衍生物修饰,二级结构主要由β-转角和无规卷曲构成。抑菌试验结果显示:抗菌肽对所选4株革兰氏阳性菌的MIC为7.81μg/m L,对4株革兰氏阴性菌的MIC为7.81~62.5μg/m L,对青霉、黑曲霉的MIC分别为31.25、62.5μg/m L。溶血试验结果显示:抗菌肽质量浓度≤62.5μg/m L时,其溶血率不超过10%;但抗菌肽质量浓度≥125μg/m L时,其溶血率超过80%。稳定性实验结果显示:该抗菌肽具有很强的热稳定性和p H稳定性,对蛋白酶有很好的耐受性。     

产抗真菌肽的爱媛类芽孢杆菌HD的筛选、鉴定及发酵条件优化

目的:从土壤中筛选产抗真菌肽的菌株,并通过优化其发酵条件提高产量.方法:用琼脂扩散法筛选菌株;通过形态观察、理化测定和16S rDNA序列分析鉴定菌株;采用蛋白酶处理、硫酸铵沉淀、膜透析、热稳定性研究确定抑菌物质;采用单因素和正交试验优化其发酵条件,并在发酵罐中放大验证.结果:获得1株产抗真菌物质的菌株,鉴定为爱媛类芽...     

抗龋齿口腔益生乳酸菌的筛选

本研究旨在筛选出抑制口腔致病菌能力强、安全性高、口腔定植能力强的乳酸菌。首先,采用牛津杯琼脂扩散法从实验室乳酸菌菌种资源库中筛选抑制变异链球菌和戈氏链球菌的菌株,对抑菌性较高的28株乳酸菌菌株进行了溶血性评价,结果显示7株菌株呈现α-溶血,21株菌株无溶血性。通过中和处理、过氧化氢酶以及蛋白酶敏感性研究,探究无溶血性且对变异链球菌和戈氏链球菌抑菌圈直径≥10 mm的16株乳酸菌的抑菌代谢产物,筛选出7株抑菌能力强并有可能产生非有机酸类抑菌代谢产物的乳酸菌。安全性评价结果显示：7株乳酸菌产酸性以及对牙齿腐蚀性均较低,除菌株JZ14-1对溶菌酶最高耐受质量浓度为1.6 mg/mL,其他6株乳酸菌对溶菌酶最高耐受质量浓度为1.2 mg/mL,均可耐受溶菌酶。菌株HB13-2敏感的抗生素数量最多。口腔定植能力评价显示：菌株HB13-2具有最高的表面疏水性为44.00%,表面酸电荷为20.16%,表面碱电荷为49.44%,胞外多糖质量浓度为0.283 mg/mL;菌株HB13-2具有较低的自身生物膜形成能力和良好的自聚能力,易定植于口腔。菌株HB13-2对变异链球菌生物膜最高抑制率为59.72%...     

天然食品防腐剂的协同抗菌作用

具有协同抑菌作用的防腐剂联合使用,可降低单一防腐剂的使用剂量,扩大抑菌谱,提高食品安全性,由此引起了广泛关注。本文介绍了食品防腐剂协同抑菌作用的概念及其评价方法,综述天然食品防腐剂——乳酸链球菌素、纳他霉素和聚赖氨酸等的协同抗菌研究现状。     

植物乳杆菌的筛选、鉴定及其抑菌物质研究

采用溶钙圈法和琼脂扩散法从传统发酵食品中筛选具有抑菌作用的菌株,通过形态学观察、生理生化反应和16S rDNA分析进行菌株鉴定,经过酶敏感性反应、排酸实验和HPLC检测对所产抑菌物质进行初步分析,采用琼脂扩散法对抑菌物质进行抑菌谱研究。结果显示,从东北酸菜中筛选到一株具有较强抑菌作用的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CNQ3,该菌株在MRS培养基中发酵24 h,活菌数为6.5×10~(11) CFU/mL,抑菌圈直径为19.50 mm。L.plantarum CNQ3所产抑菌物质表现为有机酸,HPLC检测其主要为乳酸和醋酸,二者含量分别为11.23和5.58 mg/mL,同时含有0.083 mg/mL的苯乳酸。该抑菌物质的抑菌谱广,对受试的8株食源性致病菌和腐败菌具有抑菌作用,其中对单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的抑菌效果最好,抑菌圈直径23.30 mm,对藤黄微球菌(Micrococcus luteus)的抑菌圈直径最小,为18.96 mm。本研究为筛选具有抑菌活性的乳酸菌提供参考价值。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测食品中鸡蛋过敏原卵白蛋白

建立超高效液相色谱-串联质谱（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）检测食品中鸡蛋过敏原卵白蛋白的方法。蛋清经胰蛋白酶酶解、超滤净化,经Easy-nLC 1000纳升液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱以乙腈-0.1%甲酸溶液作为流动相进行分离,结合Uniprot数据库筛选出特异性好且灵敏度高的特征肽段GGLEPINFQTAADQAR（GR-16）作为外标,采用UPLC-MS/MS正离子源多反应监测模式对实际样品进行检测。结果表明,该方法在5～5?000?ng/mL范围内线性良好,定量限为0.1?μg/g,平均回收率在77.22%～98.55%之间,相对标准偏差不大于9.97%。此方法特异性高、灵敏度好、分析速度快,可为食品中鸡蛋过敏原的检测提供技术支持。     

戊糖片球菌SBC5的功能特性研究及在发酵乳中的应用

采用形态观察和16S rDNA序列分析对实验室保存的一株乳酸菌进行鉴定，通过体外模拟实验测定其对胃酸和胆盐的耐受性以及耐热性和疏水性；采用体外特征分析，研究菌株及其代谢物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制特性、抗氧化性以及抑菌性；最后通过在脱脂乳中的发酵实验，探究菌株发酵过程中的变化和发酵乳储存期的性能变化。结果显示，该菌株为戊糖片球菌，命名为Pediococcus pentosaceus SBC5。P.pentosaceus SBC5在pH 2.0的胃酸条件下孵育2 h的存活率为49.42%,在0.3%胆盐浓度下2 h的存活率为65.38%。P.pentosaceus SBC5疏水性为21.58%,40℃和50℃处理后的存活率分别为98.61%和74.15%。P.pentosaceus SBC5代谢物具有良好的α-淀粉酶抑制特性、抗氧化和抑菌特性，其发酵上清液对α-淀粉酶的抑制作用为46.93%,对DPPH自由基的清除率为18.98%,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌2种指示菌的抑菌圈直径均在20 mm以上。P.pentosaceus SBC5的凝乳时间较短，为12 h;发酵过程中酸度为9...