具协同催化效应的毕赤酵母全细胞催化生物柴油制备

以表面共展示具协同催化效应的南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)与嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)重组毕赤酵母全细胞作为催化剂催化生物柴油制备,考察了生物柴油制备条件,并进行了初步优化。结果表明,共展示CALB与TLL脂肪酶毕赤酵母全细胞在叔丁醇介质体系中可有效催化生物柴油制备。冻干酵母细胞量0.31 g/g油,醇油摩尔比4∶1,温度35℃,反应36 h,生物柴油得率达86.25%。     

固定化脂肪酶催化棉籽油酯交换制备生物柴油新工艺

探索了以乙酸甲酯作为酰基受体,固定化脂肪酶催化棉籽油酯交换制备生物柴油的新工艺。研究结果表明,最佳酯交换条件为：脂肪酶Novozym 435加入量为棉籽油质量的30％,乙酸甲酯和棉籽油的摩尔比14：1,反应温度40℃,反应时间14h。在此条件下,精制棉籽油和粗制棉籽油的最高甲酯得率均可达到97％,且反应物乙酸甲酯和副产物三乙酸甘油酯均对脂肪酶无失活作用。该工艺有利于连续操作,脂肪酶反应40批次后的酶活没有显著变化,保持了良好的稳定性。     

微生物酶分离纯化研究进展

在对常规的微生物酶分离纯化方法如沉淀法、疏水层析、凝胶过滤、离子交换层析及亲和层析等的特点、原理及应用进行介绍的基础上,概述了膜处理技术、免疫纯化技术、双水相体系萃取等新颖微生物酶分离纯化技术。指出常规方法和新颖方法的结合为微生物酶带来了高效的分离纯化效果,开发先进、灵活的蛋白质化学技术分离纯化天然酶、重组酶、人工模拟酶及杂合酶势在必行。     

神农香菊全草精油的化学成分及抑菌机理研究

采用气相色谱-质谱联用法分析神农香菊全草精油的化学成分,并采用滤纸片琼脂扩散法和常量稀释法对其抑菌活性进行探讨;同时,运用透射电子显微镜及SDS-PAGE对其抑菌机理进行研究。结果表明：神农香菊精油含有149种组分,鉴定出63种成分,主要成分为萜烯类(13.99%)、醇类(25.82%)和醛酮类(3.69%);神农香菊精油对4种供试细菌均有抑菌作用,在实验质量浓度下,精油抑抑菌圈直径8.15～10.90mm,对革兰氏阳性菌的抑菌效果明显优于革兰氏阴性菌;透射电子显微镜和SDS-PAGE分析表明,神农香菊全草精油抑菌机制可能在于破坏细菌细胞壁,导致细菌细胞变形和菌体蛋白质减少,直至菌体分解为碎片。     

生物酶法拆分手性药物的研究进展

在现有手性药物的制备过程中, 通常使用化学催化、气相或液相色谱分离纯化的方法,而耗能大、花费高、副产物多等是其主要缺点. 近年来,生物酶法拆分手性药物的研究逐渐增多,多类生物酶已被报道具有催化手性拆分的能力,其对不同类底物的应用是目前研究的重点之一.在生物酶法拆分手性药物的过程中,反应溶剂与酰基供体是影响对映选择拆分效率的主要因素;另外,合理应用酶的固定化技术能有效的提高拆分效率,使其具有工业应用的可能. 生物酶法拆分手性药物因具有副产物少、操作简便、环境友好等优点而备受关注,有望补充或替换化学法在手性药物制备中的作用. 随着结构生物学、现代分子生物学的发展与酶法拆分手性药物研究的不断深入,通过对酶分子空间结构与催化机理的分析研究,人工合成具有特定催化功能的酶成为可能,生物酶法拆分手性药物技术的应用有望得到较大的突破.     

响应面法优化乌桕梓油多元醇合成工艺

以环氧乌桕梓油、甲醇、水为原料,以氟硼酸为催化剂,对环氧乌桕梓油进行醇解开环合成乌桕梓油多元醇工艺进行了研究。结果表明,最佳工艺参数为:催化剂用量0.3%,甲醇环氧基摩尔比12.9∶1,醇水摩尔比4.3∶1,转速200 r/min,反应时间73 min,反应温度73℃。在此条件下,乌桕梓油多元醇羟值为212.67 mgKOH/g,转化率达96.5%。     

甘油二酯的酶法合成工艺研究

以固定化脂肪酶为催化剂,研究无溶剂体系下甘油和辛酸直接酯化合成甘油二酯工艺。在选用的3种脂肪酶中,发现Novozym e 435催化效果最好。以Novozym e 435为催化剂,考察了底物摩尔比、温度、反应加酶量以及脱水方式等因素对辛酸转化率和甘油二酯含量的影响,并通过响应面法优化了工艺参数,获得酶法合成甘油二酯的最优工艺条件:酸油比1.99∶1,反应温度51.5℃,加酶量3.05%,反应时间6.29 h。在最优条件下,甘油二酯的含量达到71.9%。     

膨润土催化脂肪酸甲酯合成二聚酸甲酯的工艺优化

利用响应面方法优化膨润土催化脂肪酸甲酯合成二聚酸甲酯的工艺参数,得到最优参数为:催化剂加入量10%,催化助剂LiCl 0.8%,反应温度220℃,反应时间6 h。在最优条件下,二聚体收率为64.8%,产物的理化特性分析显示各项性能指标优良。     

有机硅介质中脂肪酶印迹体系的优化及印迹机制的初步研究

采用溶胶-凝胶固定化工艺,以C6~C14之间的5种饱和脂肪酸和月桂醇为印迹分子,考察了碳链长度、印迹分子浓度对洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶PS酯化活性的影响。研究表明,印迹分子的疏水性与底物分子的相似性对印迹效果影响较大,疏水性越强,与底物分子相似性越大,印迹效果越好;异辛烷洗脱印迹分子,对酶活的保持最好;随着碳链长度的增加,印迹酶对甲醇的耐受性逐渐降低;反应体系中加入微量水(10μL),对酯化酶活具有激活作用;经印迹的固定化酶使用5个批次后,相对酶活为0.65。对印迹机理的初步探讨表明,印迹分子对脂肪酶酯化活力的提高主要通过影响聚合物的结构来改变固定化酶的酶活,即分子印迹作用。     

基于响应面的酶法酯交换制备乌桕脂油类可可脂

在无溶剂状态下,研究Lipozyme TLIM催化乌桕脂油酯交换反应制取类可可脂.采用三因素五水平响应面法优化工艺参数,获得最优工艺条件为:酶用量9 wt.%,反应温度52.5℃,反应时间3 h.在最优条件下,类可可脂得率为(85.111±0.475)%.高温气相色谱和红外光谱分析表明类可可脂中甘油三酯组成和结构与天然可可脂类似.