分泌表达苹果酸乳酸酶的大肠杆菌系统的构建

苹果酸乳酸酶(简称苹乳酶)是果酒生产过程中苹果酸乳酸发酵(简称苹乳发酵)的关键酶。为了构建分泌表达苹乳酶的大肠杆菌表达系统,作者通过融合PCR将信号肽基因(487bp)和苹乳酶基因(1 623bp)的编码序列连接在一起,将融合片段(2110 bp)克隆到表达质粒pET28a(+)上并转化大肠杆菌,得到阳性克隆子。IPTG诱导阳性克隆子后可得到相对分子质量约为60 000左右的蛋白质,利用HPLC可在其发酵上清液中检测到240.7 mg/L的L-乳酸。这说明成功构建了分泌表达苹乳酶的大肠杆菌系统,该菌株的获得将为苹乳酶的研究和应用提供了技术平台。     

橘园分离的非酿酒酵母的耐受性分析

为了更好地利用从橘园分离到的10株非酿酒酵母酿造果酒,对这10株非酿酒酵母的发酵力,糖、酒精和SO2的耐受性进行分析。结果显示,不同种的酵母菌发酵力不同,对酒精、糖和SO2耐受性有很大差异,其中酒精对酵母菌的抑制作用最大。2株酿酒酵母在这些耐受条件下表现良好,虽然有抑制作用,但依然能够正常生长。自分离的10株非酿酒酵母中,Candida tropicalis 和C. humilis 发酵力最高,Issatchenkia orientalis 和Torulaspora delbrueckii 能够耐受8%vol的酒精,C. tropicalis,C. humilis 和T. delbrueckii 能够耐受260 g/L的葡萄糖,180 mg/L的SO2。     

高产β-葡萄糖苷酶野生酵母的筛选及产酶能力差异性分析

为了比较分析野生酵母菌产β-葡萄糖苷酶的情况,筛选高产β-葡萄糖苷酶的酵母菌株,该研究采用七叶灵显色法和4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-NPG）显色法对从宁夏贺兰山东麓分离的941株野生酵母的产β-葡萄糖苷酶能力进行筛选,通过WL培养基上的酵母菌落形态和26S rDNA D1/D2区的序列分析对所有酵母菌株进行分类鉴定,并且对酵母产β-葡萄糖苷酶能力进行差异性分析。 结果表明,941株酵母被鉴定为14个种,且筛选出了4株酵母菌高产β-葡萄糖苷酶：菌株SLY-4（98.51 U/L）、F2-24（76.93 U/L）、 F2-16（62.72 U/L）和HX-13（47.95 U/L）。 产酶能力差异性分析表明β-葡萄糖苷酶广泛分布于14种酵母,但是产酶能力表现出明显的种间和种内差异性。     

超高效液相色谱仪器检出限计算方法的比较分析

检出限是指产生一个能可靠地被检出的分析信号所需要的某物质的最小浓度或含量,包括方法检出限和仪器检出限,其中仪器检出限是仪器的检出能力,而方法检出限是前处理方法和检测方法检出能力的集合。检出限是评价检测方法检出能力的重要指标,目前有多种检出限分析方法,包括三倍噪音值法、IUPAC法、色谱计量检定法、EPA法、Hubaux-Vos法以及数学模型法等,但对于上述方法的差异,以及实际应用并不明确。本研究以超高效液相色谱-荧光检测器对桔霉素的检出限为研究对象,分析比较了上述6种仪器检出限的计算方法。结果表明,桔霉素的仪器检出限在0.009~0.344 ng/mL之间,其中,因数学模型法考虑到了标准偏差的变化,其可信度相对较高。该文通过比较分析6种常见仪器检出限的计算方法,为检出限在检测过程中的实际应用提供参考。     

含水层下条带式开采参数的计算

坪湖矿东翼B4煤层上有含水层,采用条带开采上覆岩体变形较小,可解决顶板突水问题。介绍了条带开采参数的计算。     

10种非酿酒酵母硫化氢产生能力及动态分析

为了分析10种非酿酒酵母产H2S动态以及与发酵速度的相关性,该研究利用亚硫酸铋琼脂平板法和醋酸铅试纸法分别分析了10种酵母在固态和液态条件下产H2S的情况,并对其H2S产生动态以及与发酵速度的相关性进行分析。结果表明,在亚硫酸铋琼脂固态平板上,7种非酿酒酵母产生H2S,而在YPD液体培养基中,10种非酿酒酵母均产生H2S,产H2S的能力差异明显,热带假丝酵母产H2S最多,且产气速度与发酵速度呈正相关。该研究结果将为非酿酒酵母的应用提供了参考依据,并为其他非酿酒酵母以及其他发酵微生物的筛选提供借鉴意义。     

莲藕多酚萃取工艺的响应面法优化研究

用乙酸乙酯作为萃取剂,从莲藕多酚提取液中萃取多酚、儿茶素,将响应面分析用于莲藕多酚萃取工艺条件的优化,建立了试验因素为pH(X1),相比(X2)和逆流萃取次数(X3)与萃取得率(Y1)和儿茶素百分含量(Y2)的动力模型。对萃取动力学进行了研究,莲藕多酚萃取最佳工艺条件pH为3.2,相比为1:1.5,逆流萃取次数为3。在最佳工艺条件下,多酚萃取物的含量是283.5mg/kg;而儿茶素萃取回归方程的各项回归均显著,说明还存在影响儿茶素萃取百分含量的其他因素,其最佳萃取条件有待于进一步研究。     

红曲产品中桔霉素含量的ELISA测定

制备了牛血清白蛋白--桔霉素包被抗原和卵蛋白--桔霉素免疫抗原,用卵蛋白--桔霉素连接物免疫小白鼠,间接ELISA测小鼠抗血清效价,待血清效价达到要求后,腹腔注射骨髓瘤细胞,10～15d后抽取腹水离心得抗体。建立竞争ELISA检测红曲样品桔霉素含量的方法,研究了该法的特异性和桔霉素的加标回收,结果表明,此法具有较高的特异性和加标回收能力,桔霉素的测定浓度范围为5.0～200ng/ml,回收率97%～104%。     

基于粗糙集和模糊集的属性约简算法

粗糙集理论和模糊集理论都是用来处理不完整和不确定信息的理论,两者都可用来观察、测试数据并进行推理。虽然它们之间有一些重叠,但两者的着眼点和计算方法是不一样的,因此不能相互替代,而是必须结合起来使用。本文在研究粗糙集和模糊集理论的基础上将两者相结合,提出了一个新的属性约简算法,并给出了一个应用实例。     

基于数据集市的DDSS的开发方法

本文在分析基于数据仓库的DSS不足的基础上,研究并提出了基于数据集市的、构建多层分布式DSS的方法,以便实现企业和部门不同级别上的决策支持,为企业提供更多、更有效和更有用的决策信息,使决策更加有利于企业和部门的发展。