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本文旨在研究黑曲霉诱导子(Aspergillus niger elicitor,ANE)促进青钱柳细胞合成三萜类化合物的氧化应激机制。通过研究抗氧化应激相关酶活性的变化和相关基因的表达量,从氧化应激层面诠释ANE的诱导作用机制。结果表明,在ANE诱导后10 h时,青钱柳细胞的三萜合成量开始升高,至60 h时达到最高值,三萜含量达36.46 mg/g,为对照组的3.36倍。在ANE刺激之下,超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanin ammo-nialyase,PAL)、磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)五类酶的活性均显著升高(p<0.05),且先后出现了数个酶活力峰值。转录组测序结果表明,3个SOD、20个POD、1个CAT、3个PAL、3个PLC相关基因的表达量升高,其中3个POD、1个CAT、3个PAL相关基因的表达量显著上升,此外,细胞中三萜合成酶相关基因表达亦发生上调。由此可以推断,在ANE刺激下青钱柳细胞出现氧化应激,导致抗氧化酶相关基因表达量的升高,相应酶的活性因此上升,进而引起细胞发生防御性反应,最终促进了细胞内三萜的合成。本文从氧化应激层面探索ANE促进细胞合成三萜的作用机制,为植物细胞培养生产活性次级代谢产物提供了理论依据。 相似文献
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为研究和调控青钱柳三萜代谢,克隆了青钱柳鲨烯合成酶(CpSS)全长基因,研究该基因的特征和蛋白结构,以及青钱柳悬浮培养细胞在黑曲霉诱导子作用下该基因的表达变化情况。本文以青钱柳悬浮细胞RNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆出全长为1 667 bp的CpSS基因cDNA序列,该序列包含一个1 245 bp的完整ORF,编码414个氨基酸;CpSS序列与胡桃鲨烯合成酶基因的相似度最高,相似度达到97%,与白桦、葡萄、大豆、甘草、可可5个物种的相似度都在85%以上。序列分析表明,CpSS蛋白属于不稳定亲水蛋白,具有典型的鲨烯合成酶保守区和结构域,存在于内质网膜中,由多个α螺旋组成空穴状结构,该结构与大多数植物鲨烯合成酶蛋白的空间结构相似。实时荧光半定量RT-PCR检测结果表明,在黑曲霉诱导子作用下,悬浮培养细胞CpSS基因表达量显著增加,在诱导后60 h时的表达量最高。本文可为深入研究青钱柳三萜代谢途径及真菌诱导子的诱导作用机制提供参考。 相似文献
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针对化肥厂现有三套硝酸装置5台氨氧化炉的不同工艺特点,提出优化氨氧化工艺的具体措施,来提高氨氧化炉使用周期,降低氨气消耗。 相似文献
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随着我国经济水平不断提高,人们对通信的要求也随之增高.光纤通信工程通过利用光数据传输与电数据传输之间的转换为人们实现便利的通讯.而光缆施工则是实现通讯的前提保障,由于受到众多因素的影响,光缆施工的方式也需要根据现实条件加以调整改变,本文主要就光缆通信线路架空施工的技术要点加以阐述,以供参考. 相似文献
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高纯度青钱柳叶总三萜化合物精制研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:对青钱柳叶粗提总三萜化合物进行了纯化,以获得高纯度总三萜化合物,为分离三萜单体奠定基础。方法:大孔树脂动态吸附纯化;超声辅助固液萃取;活性炭脱色;高效预制薄板层析;L-B特征显色鉴定。结果:所选的4种供试大孔树脂中,AB-8对青钱柳三萜化合物具有较好的动态吸附、解吸性能,回收率可达70.89%,纯化后总三萜的纯度可达44.30%,适合于富集和纯化青钱柳叶粗提总三萜;以AB-8树脂动态吸附纯化总三萜,2.75 mg/mL的上样浓度、2 BV/h的上样流速、95%的乙醇洗脱剂、1.0 BV/h的洗脱流速为合适条件;经大孔树脂纯化的总三萜,采用乙酸乙酯进行固液萃取可获得较高的回收率和较好的纯化效果;以活性碳为脱色剂、乙酸乙酯为脱色溶剂微沸处理5 min,可获得较好的脱色效果;精制后的总三萜化合物为淡黄色粉末或片状物,有光泽,纯度可达94.61%。结论:采用AB-8树脂吸附、乙酸乙酯超声辅助固液萃取、活性炭脱色对青钱柳叶粗提总三萜进行纯化,可获得高纯度总三萜化合物。 相似文献
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以冬瓜籽为原料,采用超声波辅助法对冬瓜籽油脂的提取工艺进行研究。影响冬瓜籽油脂提取的单因素有超声时间、超声温度、料液比、超声功率,并对这4种因素采用L9(34)进行正交试验,由正交试验极差分析得出最佳提取工艺条件:溶剂石油醚,提取时间40 min,温度60℃,料液比1:12,超声功率120 W,提取率为88.55%。GC-MS分析表明,冬瓜籽油主要脂肪酸组成为亚油酸(45.17%)、棕榈酸(32.09%)、硬脂酸(16.45%)、油酸(4.99%)和花生酸(0.36%)组成,其中亚油酸含量最高达45.17%。 相似文献