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46.
《中国生物制品学杂志》2015,(10)
目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。 相似文献
47.
作者在对纯碱生产碳酸化过程的研究及丰富实践的基础上,提出新设计单塔能力450t纯碱的大型碳化塔。介绍用于氨碱法生产的大型碳化塔设计方案,包括塔体的结构材料、塔直径和塔高、塔板形式、冷却结构等方面,并对大型碳化塔的优点、可靠性进行分析。 相似文献
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49.
目的使用改良半固体四硫磺酸钠煌绿(MSTT)培养基对鸡肉样品中的沙门菌进行初筛,作为附加步骤对ISO 6579.2002方法进行改良,以节约人力物力和时间。方法将MSTT培养基经虹吸法装入玻璃毛细管,插入预增菌液或增菌液类液体培养基,使半固体培养基和液体培养基相结合,预增菌或增菌过程同动力增菌过程同步进行。此外对使用MSTT培养基改良ISO 6579.2002方法分为纯菌种组和自然鸡肉样品组分别试验,并对结果进行评估。结果应用改良ISO 6579.2002方法,沙门菌株检出率纯菌种组为98%(126/129),自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为92%(35/38),而原ISO 6579.2002方法对自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为87%(33/38),低于改良法;与原方法相比,72%(264/367)的阴性样品不需要进一步分离和鉴定试验。结论应用MSTT培养基改良后的ISO 6579.2002方法能够应用于鸡肉中沙门菌的检测,且优势明显。 相似文献