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51.
顺式-3-羟基-L-脯氨酸(顺式-3-羟脯氨酸)可用于合成多种抗癌药物,具有重要的商业价值,目前大多通过添加IPTG来诱导表达脯氨酸-3-羟化酶,采用两步法生物合成顺式-3-羟脯氨酸。作者通过目的基因优化设计,引入强启动子色氨酸串联启动子(Ptrp2)来避免异源表达时的诱导剂使用,构建重组质粒p ES-Ptrp2-P3H,成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET21a-Ptrp2-P3H,优化后的脯氨酸-3-羟化酶基因(P3H)改变了168个碱基,GC含量由原来的64.83%降低到49.31%。该菌在初步优化培养基(葡萄糖1 g/d L,甘油0.125 g/d L,胰蛋白胨1.6 g/d L,(NH_4)_2SO_40.5 g/d L,K_2HPO_40.1 g/d L,NaCl 0.2 g/d L,FeSO_41 mmol/L,MgSO_40.5 g/d L,CaCl_20.015 g/d L,脯氨酸10 g/L,pH 7.5)上能一步法原位合成顺式-3-羟脯氨酸,摇瓶发酵24 h,产量0.8 g/L,比优化前提高一倍以上,为进一步开展顺-3-羟脯氨酸产业化提供了依据。 相似文献
52.
SAET基因编码的α-氨基酸酯酰基转移酶能够以丙氨酸甲酯盐酸盐和谷氨酰胺为底物缩合生成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺.为了使α-氨基酸酯酰基转移酶能够在大肠杆菌中过量表达,在保证氨基酸序列不变的前提下,优化密码子和m RNA二级结构,共改变了396个碱基,GC含量由原来的42.15%升高到48.22%;将优化后的基因分别与phoC启动子和色氨酸串联启动子相连并插入到不同质粒中,将重组质粒转入大肠杆菌,DH5α/p ET21a-phoC-SAET产量最高。通过对重组大肠杆菌生产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的条件研究发现,最佳培养基是:葡萄糖15 g/L,酵母提取物10 g/L,胰蛋白胨10 g/L,NH_4AC 5 g/L,KH_2PO_46.75 g/L,K_2HPO_42.25 g/L,MgSO_4·7H_2O0.5 g/L。最适转化条件是:将发酵液加入到含Ala-OMe·HCl 100 mmol/L,Gln 50 mmol/L的pH 9的溶液中,25℃反应1.5 h。优化后产量达到383 mg/L,是优化前的3.9倍。 相似文献
53.
构建基于虚拟机的可信云计算平台 总被引:1,自引:0,他引:1
云计算结构能极大地降低计算成本,但数据和计算的保密性和完整性目前还无法保证.设计了一种可信赖云计算平台(trust cloud computing platform,TCCP),可以为客户虚拟机安全执行提供封闭环境,允许用户在执行虚拟机前先检验服务商,能够确保服务安全. 相似文献
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56.
57.
随着自动测试技术与物联网系统的飞速发展,前端测量仪器的智慧化能力显得越来越重要。本文主要从功能需求的
角度分析现代智慧测量仪器的软件体系,分析了嵌入端、桌面端、云端3大平台的软件功能需求,研究了内部测量计算软件、
交互协同和同步软件、分析评估与决策软件3大方面的内容;最后以北京东方振动和噪声技术研究所(COINV)的INV3062C
动态信号测量和动力学评估仪器以及在高铁动力学性能监测中的应用,通过实例展现了各软件之间的联系和作用。 相似文献
58.
为实现工程动态测试中的精密计算,首先,讨论了频率、幅值、相位和阻尼等基本参量的校正计算方法;其次,研究了动态范围、频响特性和微积分转换等动态系统特性的扩展;最后,举例介绍了基于综合系统建模的高精度动态信号测试方法。对测量后的信号使用人工智能方法进行识别和评估,讨论了将机理特征提取与深度学习相结合的方法,介绍了样本增强、迁移学习和自编码学习等方法,用于解决工程中少样本或无负样本的问题。 相似文献