鲤鱼小清蛋白过敏原的分离纯化

以普通鲤鱼为材料,采用磷酸盐粗提、及离子交换层析的方法,纯化出鲤鱼中主要过敏原——鲤鱼小清蛋白。结果显示,采用阴离子交换层析方法制取的鲤鱼小清蛋白纯度达90%以上,该方法为过敏原鲤鱼小清蛋白的分离研究提供了可行的实验参数。     

产毒红曲菌中生物合成桔霉素基因——pksCT基因的保守性分析

选用7种14株产桔霉素红曲菌,运用基因组PCR分析方法,从它们的基因组中分别扩增到两条大小分别为669bp和591bp的pksCT基因翻译起始区部分序列和终止密码子区部分序列片段.扩增产物的测序结果通过NCBI进行BLAST同源性分析.结果显示扩增产物序列之间具有高度同源性,且分别与Genbank中公布的紫色红曲菌中pksCT基因翻译起始区部分序列和终止密码子区部分序列一致.pksCT基因是红曲菌中普遍存在的生物合成桔霉素基因.运用基因组PCR分析pksCT基因,是鉴别红曲菌产毒株的有效方法之一.     

白燕2号燕麦的双螺杆挤出物的理化特性分析

为探究双螺杆挤压处理对白燕2号燕麦理化特性的影响,以白燕2号裸燕麦全颗粒为原料进行挤压处理,并对燕麦挤出物的品质进行检测与表征。结果表明,在喂料水分22%、螺杆转速42 Hz、喂料速率26 Hz、终端温度160 ℃等典型挤压条件下,燕麦挤出物的膨化率为1.16;挤压过程中发生了美拉德反应,L*降低,a*降低,b*增加,ΔE降低;总氨基酸含量减少了5.44%,各种氨基酸含量呈整体下降趋势;挤压后物料微观结构表面粗糙、富有层次感。燕麦挤出物吸水性指数上升378.4%,水溶性指数下降1.08%,可溶性β-葡聚糖含量提高了62.0%,模拟体内消化后,燕麦挤出物提取液表观黏度增大;挤压过程中同时发生了分子的解聚反应和聚合反应。由此可见,双螺杆挤压是一种有潜力提高全燕麦品质的加工技术。     

超声处理对大豆7S蛋白潜在致敏性的影响

利用超声波改性处理大豆7S蛋白,并评估超声处理产物体外消化性及消化产物抗原性和潜在致敏性的变化。结果表明,7S蛋白耐唾液、胃液消化,但其在300 W超声处理80 min后易被十二指肠消化;进一步利用体外免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G结合能力评估消化产物抗原性的强弱,超声处理7S蛋白后,随着超声处理时间(0~120 min)的延长,其消化产物的抗原性总体上呈现先升高后降低的趋势,在超声100 min时,消化产物的抗原性最低;利用体外Ig E结合能力评估其潜在致敏性,随超声处理时间(0~120 min)的延长,大豆7S蛋白消化产物的Ig E结合能力呈现先升高后降低的趋势,超声80 min时,其消化产物Ig E结合能力最低。研究结果表明超声80 min具有降低大豆7S蛋白潜在致敏性的作用。     

W/O/W型薏苡仁油复乳的体外释放及模型拟合

研究W/O/W型薏苡仁油复乳在不同释放介质的体外释放行为。方法:采用正相透析扩散法、紫外分光光度法测量甘油三油酸酯的含量,用零级动力学方程、一级动力学方程、Higuchi平面扩散方程、Hixcon-Crowell溶蚀方程和Retger-peppas方程拟合其在体外的释放行为,根据拟合优度判定曲线拟合情况,讨论方程所反应的释放机理。结果:在人工胃液中,W/O/W型薏苡仁油复乳释放行为与Retger-peppas方程Q=0.2359t0.2248拟合度最好,其拟合优度R2为0.9717;在人工肠液和人工结肠液中的释放曲线与Retger-peppas方程拟合较好,在人工肠液中的释放方程为:Q=0.2568t0.4038,R2=0.7733,人工结肠液中的释放方程为:Q=0.4502t0.0567,R2=0.8784。     

Plackett-Burman设计和响应面法优化荷叶总黄酮的提取工艺

在单因素试验基础上,首先用Plackett-Burman 设计对影响荷叶总黄酮得率的因素进行了评价,筛选出具有显著效应的三个因素--乙醇浓度、液固比和提取次数;然后用响应面分析法确定了主要影响因素的最佳提取条件为乙醇浓度67%、液固比34:1(V/m)、提取3 次,在此条件下荷叶总黄酮得率的预测值可达3.19%,实测值为3.17%,两者较接近。表明Plackett-Burman 设计结合响应面分析法可以很好地对荷叶总黄酮提取工艺进行优化。     

国内外食品召回制度的比较研究

食品召回制度在维护公众安全和健康的过程中发挥着重要的作用。本文从监管部门、法律支撑、召回实施程序等方面比较研究了我国和部分发达国家的食品召回制度,分析美国、加拿大和澳大利亚较为完善的食品召回制度的一些相似特征,认为我国食品召回制度与这些国家相比仍存在一定差距。     

花生过敏原Ara h 6的分离纯化及鉴定

为高效分离纯化花生过敏原Ara h 6,通过脱脂、蛋白浸提、阴离子交换层析分离得到目的蛋白,并用十二烷基磺酸钠- 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、基质辅助激光解吸/ 电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)及免疫印迹技术(Western blotting)对其进行鉴定。结果表明,该蛋白为花生过敏原Ara h 6,其分子质量约为15kD,纯度大于95%,得率为22.5%。该方法简单、高效,可为花生过敏的进一步研究提供实验材料。     

重组花生过敏原Ara h 2生物合成

为获得重组花生过敏原Ara h 2。通过RT-PCR 合成cDNA,并以此为模板进行PCR 扩增目的基因Ara h 2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-T Simple 载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h 2。上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1 表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h 2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL 中,经IPTG 诱导表达。SDS-PAGE 电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符。通过Glutathione Sepharose 4B 凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h 2,获得融合蛋白纯度约为90%。Western blotting 分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h 2 兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。     

热加工及超高压处理对卵白蛋白抗原性的影响

以蛋清为原料,采用加热加工、动态超高压加工及两种方法结合处理,研究不同加工方式对蛋清中卵白蛋白抗原性的影响。结果表明：卵白蛋白抗原性随着加热温度的升高而降低,最高降低68%,且抗原性急剧降低的临界温度是80℃;经超高压均质处理后,其抗原性随着压力的升高先降低后回升;经二者结合处理后,卵白蛋白抗原性与单独加热处理变化趋势相似,但无单独热处理变化幅度大,最高降低52.5%;表明了热处理对卵白蛋白抗原性的影响比超高压大,结果为研发低致敏性或无致敏性蛋制品提供参考。