膜过滤酒糟滤液回用的研究

运用陶瓷膜过滤酒精浓醪发酵后产生的酒糟，滤液全部回用进行下一批酒精浓醪发酵。结果表明淀粉利用率和发酵醪酒精度在回用5批后达到动态平衡。酒精发酵的主发酵期来得快，36h巳基本结束。运用数学方法地全回用过程固形物含量进行动态分析，其理论值与实验值近似，固形物含量在第5批基本达到动态平衡，整个过程回用次数较高，效果理想。     

蛭弧菌对草鱼生长及免疫力的影响

用添加蛭弧菌的饲料喂养草鱼,能够显著加快草鱼的生长发育,降低饵料系数。同时明显影响各项免疫指标,胸腺的免疫器官指数逐渐升高,头肾的免疫器官指数开始时升高然后下降,血液中的NBT阳性细胞数量逐渐增加, 36d内相对生长率可提高32. 6%。用温和气单胞菌疫苗免疫后,草鱼的免疫应答水平明显提高,免疫力增强。蛭弧菌适宜的添加剂量为0. 5%。     

利用蜜二糖的重组酿酒酵母的构建

选择了粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）作为外源基因供体菌。通过PCR技术扩增得到α-半乳糖苷酶基因，构建了重组质粒pYX-MEL，并在酿酒酵母Saccharomyces．cerevisiae W303-1A中获得表达，得到的转化子能以蜜二糖为唯一碳源生长。     

光合细菌对草鱼生长及免疫相关酶活性的影响

用添加光合细菌的饲料喂养草鱼,能够显著加快草鱼的生长发育,降低饵料系数,42 d内相对生长率可提高61.7%.同时在第42 d测定草鱼肝脏和血清中免疫相关酶的活力.结果表明:用添加光合细菌的饲料喂养草鱼,添加水平在0.0%～2.5%范围时,草鱼肝脏及血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性随着添加水平的增加而上升.当光合细菌添加水平为3.5%时,免疫相关酶活性均出现下降趋势.光合细菌适宜添加水平为2.5%.     

重组大肠杆菌产卤代烷脱卤酶的发酵条件优化

对产卤代烷脱卤酶的重组大肠杆菌BL21（DE3）/pET28a-DhaA进行发酵优化以提高其表达量。该研究从TB培养基出发,通过单因素实验与响应面实验在摇瓶水平上对培养基各成分进行优化;其次,在最优培养基的基础上对发酵的工艺条件进行优化;最后,在5 L发酵罐中进行了初步放大验证。结果表明,最优的培养基组成为：甘油10 g/L,酵母粉23 g/L,蛋白胨14 g/L,MgSO₄·7H₂O 1.3 g/L,ZnSO₄·7H₂O 0.1 g/L,酶活力可达到（1 182.94±10.86） U/L,较初始培养基提高了94%;最优的发酵工艺条件为：接种量5%,装液量40 mL/250 mL,37℃培养至OD₆₀₀为1.8时加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷于20℃诱导22 h,酶活力可达到（3 585.83±15.02） U/L,提高至未进行优化前的5.87倍;5 L发酵罐初步放大验证实验中,酶活力最高达到（9 682.62±191.16） U/L,提高至摇...     

微生物转化法生产d-伪麻黄碱

初步探讨了一种微生物转化生产d 伪麻黄碱的新方法.通过TLC和HPLC分析,对实验室保藏菌株进行筛选,得到可专一性转化前体物质1 苯基 2 甲氨基丙酮(1 phenyl 2 methylamino propanone,简称MAK)生成d 伪麻黄碱的菌株MorganellamorganiiJ 8.通过对转化条件的研究,发现最适起始转化pH为7.5,最适转化温度为40℃.在合适的转化条件下,经过24h能将1000mg/L的MAK转化为852.4mg/L的d 伪麻黄碱,相应的摩尔转化率为84.4%.     

酿酒酵母纤维二糖代谢途径的搭建

酒糟中存在着一些未能被酵母消耗的糖，含量较高的如纤维二糖、蜜二糖等，有效利用酒精发酵过程中产生的纤维二糖，具有一定理论和实际意义。采用异硫氰酸胍一酚一氯仿法提取里氏木霉总RNA，分离poly A^ mRNA，通过RT-PCR方法扩增得到β-葡萄糖苷酶基因。构建了重组质粒pYX-BGL，并在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303-1A中获得表达，得到的转化子能以纤维二糖为唯一碳源生长。     

快速筛选耐酸性α-淀粉酶生产菌株的平板透明圈法

以可溶性淀粉为底物配制固体培养基,然后低温处理(4℃)平板培养物,产淀粉酶的菌株其菌落周围的培养基由白色变成灰色且透明.该方法不具有破坏性,不需要预先接种菌落,能直接发现和分离分解利用淀粉的微生物.利用淀粉琼脂平板还能快速验证淀粉酶的耐酸性,根据在pH4.2和pH6.0的琼脂平板上透明圈的直径d与淀粉酶活力的对数lnA的关系,求出淀粉酶在pH4.2和pH6.0时的淀粉酶活力.pH4.2时比pH6.0时的比值大,说明该淀粉酶产生菌的耐酸性较强.     

云南重楼内生细菌的分离鉴定及系统发育树分析

利用云南文山采集的人工栽培和野生云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch)根茎,对其内生细菌进行了分离、纯化及鉴定。分离得到40和44株云南重楼内生细菌。经16S rDNA测序,在NCBI中比对,MEGA4建系统进化树,所得内生细菌分别鉴定为分属于6和8个属。其中,人工栽培云南重楼内生细菌中,芽孢杆菌属(Bacillus)和肠杆菌属(Enterobacter)分离频率分别为35%、27.5%,是其优势内生细菌群;野生云南重楼内生细菌中,芽孢杆菌属(Bacillus)和克雷伯氏菌属(Klebsiella)分离频率分别为36.4%、20.4%,是其优势内生细菌群。本研究结果体现了人工栽培和野生云南重楼内生细菌分布的差异及云南重楼根中内生细菌的多样性,也为后续重楼内生菌的多样性开发提供了理论和实验基础。     

不同茶类中黄酮醇苷酸水解条件的优化及酸水解前后3种黄酮醇含量的测定

目的 建立高效液相色谱法（High performance liquid chromatography, HPLC）同时测定不同茶类中黄酮醇的含量,并优化茶叶中黄酮醇苷酸水解成黄酮醇（杨梅素、槲皮素、山柰酚）的条件,以此测定不同茶类中三种类型黄酮醇苷元的含量。方法 样品经70%甲醇水（V:V）提取后,用盐酸（16%）-甲醇溶液进行酸水解,再经乙酸乙酯萃取、浓缩、复溶至相同体积;酸水解前后的样品溶液均用HPLC对黄酮醇进行定量分析并用超高效液相色谱-串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)对黄酮醇苷进行定性分析。 结果 3种黄酮醇在3.125~100 μg/mL的浓度范围内具有较好的线性关系（r2≥0.9976）,优化后的方法的重复性、稳定性、精密度较好（相对标准偏差（RSD）≤4%）。六大茶类中黄酮醇苷的最佳酸水解条件：水解时间为1 h,水解温度为80 ℃,盐酸 (16%)-甲醇溶液最佳比例为1:2 (V:V)。 结论 本研究优化了茶叶中黄酮醇苷酸水解的方法,并利用HPLC测定了六大茶类酸水解前后黄酮醇的含量。方法处理简单、结果准确可靠,适用于茶叶中黄酮醇及其苷类物质的分析。