重组谷氨酸脱羧酶大肠杆菌合成γ-氨基丁酸条件的优化

研究重组谷氨酸脱羧酶大肠杆菌合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的适宜条件。检测温度、p H值、表面活性剂、金属离子、底物与菌体质量比以及反应体系体积对GABA转化效率的影响。结果表明:最优转化条件为:转化体系5 m L、底物L-谷氨酸钠浓度0.1 mol/L、重组大肠杆菌细胞6.4 mg(干质量)、Triton-100体积分数0.06%、Ca2+浓度0.6 mmol/L,转化温度45℃、反应体系p H 4.5。在该体系下反应7 h,GABA合成量达到26.1 g/L,GABA转化效率在1 h时达到最高,为13.8 g/(g h),较优化前提高1.5 倍。     

β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达

为获得β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌株,以高地芽孢杆菌YC-9为出发菌株,通过亚硝基胍(nitrosoguanidine,NTG)和低能N+束诱变育种,筛选和选育得到两株突变株N-2-2和10-30s-3,发酵培养60 h,酶活力分别达到28.6 U/m L和36.1 U/m L,分别是出发菌株的2.36倍和2.98倍,与YC-9菌株相比,突变菌株菌体生长下降但发酵产酶量增加。进一步将β-1,3-1,4-葡聚糖酶克隆并在大肠杆菌中成功表达,经过30℃诱导6 h后,胞内酶活力达79.2 U/m L,为出发菌株的6.5倍。     

应用三分量地震数据提高Langmuir法计算煤层气含量的精度——以淮南顾桥煤矿为例

在实验室解析得出吸附参数的基础上,使用Langmuir方程计算煤层气含量是目前预测煤层中煤层气含量的主要方法之一。此方法需已知地应力和地层容重数据,在钻孔数量有限时,其预测精度有限。在已有钻孔测试数据和测井数据的基础上,通过三分量地震数据与测井资料联合反演获得地层密度和纵、横波速度,直接计算精确的泊松比参数,进一步得到精确的地应力和地层容重,从而提高Langmuir法预测煤层气含量的精度。结合淮南顾桥煤矿三维三分量地震数据和综合地球物理测井资料,计算了该区不同深度煤层的密度、泊松比和金尼克静水压力,提高了煤层气含量的计算精度。     

重组脂肪氧合酶基因工程菌破碎条件优化及其酶活力测定方法研究

建立适用于从重组E.coli中提取重组脂肪氧合酶非机械法的破碎条件。采用化学渗透法、冻融法和酶解法破碎重组E.coli细胞,并采用单因素试验和L25(56)正交试验对细胞破碎条件进行优化。结果表明:溶菌酶添加量为1.5mg/mL、溶菌酶处理时间40min、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)添加量为2.0mmol/L、吐温-60添加量为2%、冻融温度(-70℃冷冻37℃融解)、冻融次数3次,效果最佳,获得粗酶液的脂肪氧合酶(LOX)酶活力为6840U/mL,比优化前(4750U/mL)提高了0.44倍;并在此条件下,比较分光光度法、碘化钾-淀粉法和二甲苯酚橙法测定LOX酶活力,其中碘化钾-淀粉法简单、灵敏、快速,且测定体系具备肉眼可辨的特征颜色,可用于LOX酶活性高通量筛选。     

夹层融资在我国房地产融资中的应用

目前,我国诸多房地产公司资产负债率居高不下,如何解决资金问题成为房地产公司的头等大事。总结我国房地产企业的融资现状并结合夹层融资的特点和运作模式,探讨夹层融资在我国房地产融资中的可行性,以期解决我国房地产企业的融资问题,建立健全我国房地产市场的金融体制,促进我国房地产市场健康稳定发展。     

几项实用技术在数据库开发中的应用

本文根据几个数据库系统开发的实践经验,针对无DSN连接,数据的安全、适时传送,数据库的一致状态,客户机与服务器的时间同步和数据库的限时操作,跨平台数据导入,软盘、硬盘备份恢复提出了几项简洁有效的实用技术。     

计算机地图制图软件中图形控制措施的探讨

对于人脑无法处理的浩瀚如海的各种科学数据,计算机地图制图软件提供了一种直观、实时、可控制的有效处理手段。而制图软件中涉及的图形的无级缩放,图形的平移,图形被破坏后的快速恢复技术在很大程度上决定了该软件的效率与性能。基于此,该文逐一给出了实现这几项技术的比较有效的措施。     

论高校图书馆服务创新的重点

在现代技术条件下,高校图书馆的服务方式与传统相比发生了很大变化,服务的提升需要不断创新.但创新不仅是技术上的,关键在于高校图书馆服务人员思想意识上的创新,着力培养馆员与读者的感情,提高馆员文化素质和业务素质.     

醒酒口服液的研制

前言 为了清除或减轻酢酒后的不良反应,我们采用民间食疗醒酒验方,研制出醒酒口服液,并进行了临床观察及药效学动物实验,证实了该产品的醒酒功效。 1.主要原料及配方原则 根据醉酒者的临床症状及口服液饮料的特点,我们选用果蔬及可食用中药为原料,     

ARTP诱变联合抗生素抗性选育纳豆激酶高产菌株

为获得产纳豆激酶(nattokinase,NK)活力增强的菌株,以纤维蛋白平板法测得酶活力值为判定指标,采用常压室温等离子体诱变系统(ARTP)对枯草芽孢杆菌XZI125进行诱变,通过酪蛋白平板法和利福平、卡那霉素、链霉素、氯霉素四种抗生素抗性筛选法获得高产NK突变菌株。结果表明,经6轮摇瓶发酵验证,获得了3株遗传稳定的高产突变菌株A27,Ar41和Ac35,摇瓶发酵5 d的产酶活力分别比原始菌株(2490 IU/mL)提高了23.0%、25.1%、26.5%。比较酪蛋白平板筛选方法和0.7 μg/mL利福平、50 μg/mL卡那霉素、60 μg/mL链霉素、300 μg/mL氯霉素四种抗性筛选方法,抗生素抗性筛选方法更有利于NK高产菌株的筛选。