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鲤鱼来源乙酰胆碱酯酶的高效表达及分子对接模拟 总被引:1,自引:0,他引:1
乙酰胆碱酯酶介导的农药残留检测方法在食品安全中发挥着越来越重要的作用。本研究以鲤鱼来源的乙酰胆碱酯酶基因(Cp ACh E)为试验材料,通过基因密码子优化来提高酶的表达量;通过表征鲤鱼乙酰胆碱酯酶的酶学性质探究其在农药残留检测中的应用潜力。采用计算机模拟技术寻找有机磷农药克百威与酶结合的氨基酸残基位点。结果表明:经密码子优化的重组酶乙酰胆碱酯酶的酶活力为7.4 U/m L,表达量提高约40倍,最适反应温度25℃,最适p H 8.0。动力学参数K_m和V_(max)分别是1.639 mg/m L和8.071μmol/min/mg。不同有机溶剂和金属离子对酶活力的影响存在差异,大多数有机试剂对乙酰胆碱酯酶活性有抑制作用,而Mg~(2+)、K~+、Ca~(2+)和Li~+离子对该酶活性有促进作用,其中Mg~(2+)(5 mmol/L)的促进最为明显,使该酶活力提高约1.7倍。重组酶对8种有机磷和8种氨基甲酸酯类农药都表现出较强的敏感性,其中,克百威抑制作用最强,最低检测限为0.044μg/m L。此外,分子对接发现,克百威与重组酶中的19个氨基酸之间形成氢键和疏水作用,其中氨基酸Tyr146、Ser147和Tyr355很可能是与克百威结合的靶位点。本研究成功实现了乙酰胆碱酯酶的高效表达,探究了乙酰胆碱酯酶与克百威的结合位点,为该酶在食品中有机磷和氨基甲酸类农药残留检测的应用及理性改造提供了一定的理论指导。 相似文献
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为了解苹果自然发酵酵素中的微生物组成,探究其不同发酵阶段的优势菌群,采用宏基因组技术分析苹果自然发酵酵素发酵前(10 d)、中(20 d)、后(35 d)3个时期的真菌和细菌的群落组成和变化。结果表明:通过多样性分析,细菌的多样性高于真菌;细菌多样性前期最高,呈先降低后升高的趋势;真菌多样性略有增加。从属的水平上分析,细菌主要有乳杆菌属、葡萄糖酸杆菌属、乳酸乳球菌属、魏斯氏属、明串珠菌属和醋酸菌属,其中乳杆菌属(58.73%,49.08%,56.34%)和葡萄糖酸杆菌属(20.42%,34.72%,24.64%)为细菌中的优势菌属;真菌主要有酵母属、汉逊酵母属和接合酵母属,其中接合酵母属(89.5%,18.2%,80.3%)和汉逊酵母属(9.7%,60.6%,8.7%)为真菌中的优势菌属。结论:阐明了苹果酵素在自然发酵过程中微生物的动态变化及其多样性机制,为后续开发新型人工可控苹果酵素提供试验依据。 相似文献
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对SDH业务路径选择等关键技术进行深入分析,总结出一种基于最短路由的环网业务配置算法。该算法在最短路由相同的情况下考虑分节点奇偶数讨论的优化方案。再通过枚举的方式进一步验证了此按节点奇偶数讨论的最短路由算法的可靠性和稳定性。 相似文献
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刘树琪是中国葡萄酒界的一个传奇,他的出现,不仅是业界的一件幸事,更是一件大事。他的出现,使中国葡萄酒界有了专家型领导干部;他的出现,是对中国葡萄酒管理的补位;他倡导的种种行业管理模式,使中国葡萄与葡萄酒产业为之一亮。 相似文献
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通过对光谱仪的控制,对各项发光强度参数的计算与校准,在传统的探针设备基础上增加发光强度的测试过程,从而丰富探针设备的功能。目前设备已经达到红、黄、蓝光芯片的测试的要求,并在客户现场投入使用。主要总结归纳发光强度测量计算方法与实验结论。 相似文献
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干酪乳杆菌发酵大豆乳产品的质量分析及稳定性的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
从乳制品中选育出生长繁殖力强、发酵活力高强的干酪乳杆菌05-20为试验菌株,制备了干酪乳杆菌纯种发酵大豆乳,分析了发酵产品的质量,考察了发酵产品在冷藏(4 ℃)和室温(20~25℃)条件下的贮藏稳定性.试验结果表明:发酵产品的活菌数为2.3×109 cfu/mL,pH值4.6,滴定酸度为80.3°T,产品品质良好;发酵产品0~4℃冷藏21 d,活菌含量仍可达1.57×109 cfu/mL,pH值降至4.2左右,酸甜适宜,确定发酵产品4 ℃下贮藏期为21 d;室温(20~25℃)储存14d,活菌数达1.50×109 cfu/mL,pH值降至4.2左右,确定发酵产品室温条件下贮藏期为14d.本研究为大豆酸乳产品质量分析规范提供了科学依据,同时也为研制和开发多功能益生菌豆乳制品提供了新的思路. 相似文献
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本文以分离自益生菌乳制品、微生态制剂、保健品的13株国际公认的益生乳酸菌为试验菌株,接种于纯绿豆乳培养基中进行发酵。通过检测其凝乳与否、凝乳时间、以及凝乳时pH、活菌数、感官评价等指标,筛选适宜发酵绿豆乳的繁殖力强、发酵活性高的益生菌菌株。结果表明:经过层层筛选得到的干酪乳杆菌07-211、植物乳杆菌08.193、瑞士乳杆菌05-29等三株益生菌发酵6h均可均-凝乳,有绿豆香,且凝乳时,其活菌数分别可达到3.9×10^8、1.6×10^8、1.4×10^8cfu/mL凝乳时pH分别为4.16、4.30、4.32,滴定酸度分别为83.5、81.0、75.2oT,可作为新型绿豆乳制品的发酵菌株。 相似文献