鳜鱼致敏蛋白的识别及酶法水解的脱敏分析

试验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对鳜鱼蛋白提取液中不同分子质量的蛋白组分进行分离,在阳性血清池建立的基础上,运用转移电泳、免疫印迹以及免疫印迹抑制试验识别特异性吸附蛋白条带。进而采取不同来源的6种食品级蛋白酶对鳜鱼蛋白水解脱敏,将中性甲醛电位滴定法和间接酶联免疫吸附法测定的水解度和抗原降低率作为评判指标优选出最佳水解酶。最终得到分子质量为60、50、34 ku和17 ku的4条蛋白条带可以与IgE阳性结合,最佳水解酶为木瓜蛋白酶。     

四种淡水鱼致敏蛋白免疫原性研究

对常见的食物过敏原,草鱼（Ctenopharyngodon idellus）、乌鳢（Ophicephalus argus）、鲇鱼（Silurus asotus）、花鲈（Lateolabrax japonicus）四种淡水鱼进行了特异性抗原的识别,通过coca’s缓冲液分别于四类鱼肌肉组织中提取蛋白粗提液,经SDS-PAGE分离出多种分子量不同的蛋白组分并对其进行分析,再通过Western-blotting识别四种淡水鱼过敏原研究其免疫原性。由SDS-PAGE电泳分别得到四种淡水鱼全蛋白电泳图,通过免疫印迹等方法发现草鱼与IgE结合的阳性带主要有4条（107、62、50、27ku）,乌鳢与IgE结合的阳性带主要有6条（62、50、34、32、28、17ku）,鲇鱼与IgE结合的阳性带主要有4条（62、50、39、37ku）,花鲈与IgE结合的阳性带主要有6条（62、50、37、34、32、18ku）。     

牦牛乳中主要过敏原研究

为分析牦牛乳中主要的过敏原,腹腔注射牦牛乳蛋白质免疫Balb／C小鼠．未次免疫后,小鼠摘眼球取血,测定特异性抗体和组胺质量浓度．在无菌条件下收集并培养脾淋巴细胞．Western-Blotting方法分析牦牛脱脂乳中主要过敏原组分．结果显示,牦牛脱脂乳中主要的过敏原组分为β-乳球蛋白、α-酪蛋白和β-酪蛋白,这3种过敏原蛋白质致敏强度的大小为β-乳球蛋白>α-酪蛋白>β-酪蛋白．因为脾淋巴细胞产生的细胞素IL-4、IL-5质量浓度较高而IFN-γ较低,所以牦牛乳蛋白质为Th2应答．     

妊娠期高血压疾病患者胎盘中血管紧张素Ⅱ1型受体的表达及其意义

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R）在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织局部的表达及其意义。方法采用蛋白免疫印迹检测32例妊娠期高血压疾病患者（其中10例妊娠期高血压、10例轻度子前期、12例重度子前期）和20例正常妊娠妇女（对照组）胎盘组织AT1R的水平表达。结果妊娠期高血压疾病组AT1R蛋白的表达高于对照组（P〈0.05）;妊娠期高血压组及轻、重度子前期AT1R蛋白的表达逐渐增强,但妊娠期高血压组与轻度子前期组差异无统计学意义（P〉0.05）,其余组间差异均有统计学意义（均P〈0.05）;轻、重度子前期组胎盘AT1R的表达高于对照组（P〈0.05）。AT1R的表达水平与新生儿体质量呈负相关（r=-0.48,P〈0.05）。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘组织局部的AT1R的表达上升可能与该病的发病及病情发展有关。