一种新型乳糖酶在制备低乳糖牛奶中的应用研究

目的通过检测一种新型乳糖酶在不同条件下对牛乳中乳糖的水解率,研究其在制备低乳糖牛奶的最适条件。方法产乳糖酶基因工程菌株发酵并提取乳糖酶,分别在10,25和37℃条件下按不同比例添加该新型乳糖酶液,使用HPLC检测其乳糖水解率。结果该酶在10℃（0．9％）水解率可达83％以上,25℃（0．9％）水解率93％以上,37℃（0.3％）水解率94％以上。结论该酶在低温下具有良好的乳糖水解率,在工业上具有广阔的应用前景。     

产普鲁兰糖出芽短梗霉菌株的初步筛选

目的从3株产普鲁兰糖出芽短梗霉As3.3984,As3.837,As3.933中筛选1株产量及糖转化率高、分泌色素低的菌株作为出发菌株。方法相同条件下摇瓶分别培养菌株As3.3984,As3.837,As3.933,测定发酵液黏度并纯化制备普鲁兰糖,比较糖转化率及普鲁兰糖产量;654nm处测定制备的普鲁兰糖溶液的吸光度值,比较色素的分泌量。结果菌株As3.3984普鲁兰糖产量、糖转化率最高,色素含量最低。结论确定菌株As3.3984作为普鲁兰糖生产研究的出发菌株。     

低聚木糖功能与应用研究进展

低聚木糖是以富含木聚糖的植物为原料,通过酶法生产的一类重要的低聚糖,具有增殖益生菌的功能,作为肠动力源广泛用于功能性食品。本文对其功能及应用研究进展作一综述。     

黄原胶发酵工艺条件的优化研究

目的优化黄原胶的发酵工艺以提高黄原胶的产量及黏度。方法采用摇瓶发酵,改变实验条件,包括培养基中碳源、氮源的种类和浓度,复合氮源的组成及含量,无机盐的组成及含量,柠檬酸和碳酸钙的含量等。通过测定发酵液黏度、粗胶含量来确定较为适合的发酵工艺。结果通过实验得到最佳培养基组成为:蔗糖4%,硫酸铵0.1%,豆饼粉0.3%,柠檬酸0.1%,硫酸镁0.01%,碳酸钙0.02%;培养条件为:500 mL摇瓶发酵装液量100 mL,转速220 r/min,发酵温度28.5℃,培养72h。进行了发酵罐发酵实验,黄原胶的发酵产量可以达到25.02g/L,发酵液的终黏度5847cP。结论通过工艺优化,黄原胶产量及黏度均得到提高。     

重组人EC-SOD包涵体的稀释复性及重折叠后蛋白的纯化

目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparinsepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异。结果最佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5molL,精氨酸浓度大于0.3molL,GSH∶GSSG=4∶1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低。IMAC和Heparinsepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparinsepharose纯化效率较高。结论确定了重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的最佳条件及复性后蛋白纯化的方法。     

冠突散囊菌发酵产物的抑菌作用及特性研究

目的测定冠突散囊菌发酵液不同溶剂提取物的抑菌作用、抑菌物质的温度及其p H稳定性。方法依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取冠突散囊菌发酵液,采用打孔法测定冠突散囊菌发酵液不同溶剂提取物对细菌、真菌及放线菌的抑菌作用及在不同温度及p H值下的稳定性。结果发酵液乙酸乙酯提取相的抑菌作用较其他提取相强。其中,对枯草芽孢杆菌与白色链霉菌的抑制作用最显著,且该抑菌物质在25～121℃,p H 4～8范围内均能保持稳定的抑菌活性。结论乙酸乙酯能有效提取冠突散囊菌发酵液中的抑菌物质,抑菌物质在一定的温度及p H范围内具有良好的稳定性。     

耐热耐碱木聚糖酶在大肠杆菌中的高效分泌表达及酶学性质研究

目的研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL2l中的高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析。方法全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优化,经大肠杆菌BL2l表达后获得基因工程菌株,通过SDS-PAGE电泳检测、硫酸铵分级沉淀和AKTA系统分离纯化,分析表达产物的酶学性质。结果重组木聚糖酶为胞外分泌性表达,相对分子质量约43×103;酶促反应最适温度为65℃,最适p H为10.0,最适条件下酶活最高可达1201.5 IU/ml。结论成功获得高效分泌表达重组木聚糖酶的基因工程菌株,该木聚糖酶具较好的耐热性和耐碱性。     

黑茶益生菌种“金花”菌基因组测序及分析

目的提取"金花"菌基因组并测序分析。方法从黑茶中分离得到一株冠突散囊菌,命名为YKY807,提取其基因组,利用三代测序技术和Pacbio RSⅡ测序平台进行测序和序列分析。结果序列全长为27 701 366 kb,其GC含量为49.87%。总基因数量为8405,总基因序列长度为12 750 105 kb,编码基因占基因组的41.5%,编码基因总长度为11 398 657 kb,编码基因平均长度为1356.1 kb。结论已获得冠突散囊菌基因组序列信息,序列已提交至GenBank数据库,登录号为MAQV00000000。     

产高黏性黄原胶基因工程菌株的构建

目的获得产高黏度黄原胶基因工程菌株。方法利用PCR技术,以野油菜黄单胞菌X58基因组为模板扩增得到产胶基因gumBC,通过纯化、内切酶酶切、连接和接合,构建了含gumBC基因表达载体(pBBR-gumBC)的重组菌株X58-BC。结果经10 L发酵罐实验证实,gumBC过量表达,黄原胶黏度值(Brookfield s05,60 r/min)提高了62%,剪切性能值提高了57%。结论成功构建了产高黏度黄原胶基因工程菌株。     

三孢布拉霉菌菌丝体中番茄红素超声提取工艺研究

目的研究超声波法提取三孢布拉霉菌（Blakeslea trispora）菌丝体中番茄红素的工艺条件。方法研究提取溶剂、料液比及超声波输出功率、间歇工作时间、超声时间对提取效果的影响,通过正交试验,确定最佳工艺条件。结果通过实验得到最佳超声提取工艺条件为：以乙酸乙酯为溶剂,料液比1：100,超声波输出功率400W,间歇工作时间5s／5s,超声提取时间20min,二级提取。在此条件下番茄红素的提取率为89．0％。结论优化了番茄红素的超声提取工艺。