基于乙酰胆碱酯酶和氧化应激研究海胆酮对阿尔茨海默症的作用机制

海胆酮是一种酮式类胡萝卜素，主要从海胆及藻类等海洋生物中提取。本文研究海胆酮对乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）的抑制作用，应用酶动力学、荧光光谱、圆二色光谱和分子对接技术研究海胆酮对AChE的抑制机理，并用淀粉样β蛋白片段25～35（amyloid beta-peptide 25-35，Aβ25-35）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）建立阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease，AD）模型，研究海胆酮对AD细胞模型氧化应激损伤的作用。结果表明，海胆酮有很强的AChE抑制活性，其半抑制质量浓度为（16.29±0.97）μg/mL，抑制常数Ki为3.82 μg/mL，表现为竞争性抑制；海胆酮可诱导AChE二级结构改变，更容易与AChE活性中心氨基酸Ser200、His440、Trp84和Tyr121结合，阻碍底物碘代硫代乙酰胆碱（acetylthiocholine iodide，ATCI）与酶结合，从而引起酶活力降低。海胆酮能有效抑制Aβ25-35诱导PC12细胞的AChE活力，降低丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力，减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化应激损伤。本研究基于AChE和氧化应激阐明了海胆酮对AD的潜在作用机制，为海胆酮在功能食品、生物医药等领域的应用提供了数据支持和理论根据。     

辣木叶多酚提取条件的优化及其抑菌性能研究

研究辣木叶多酚乙醇浸提的最优条件及其辣木叶多酚的抑菌性能,为辣木叶多酚在抑菌方面的应用提供一定理论依据。采用有机溶剂浸提法提取辣木叶多酚,并通过牛津杯法,研究了其对曲霉菌、毕赤酵母菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑制性能。结果表明:当提取温度为20℃、辣木叶粉与有机溶剂的质量体积比为1︰40 g/m L、浸泡时长30 min、有机溶剂浓度为60%时,辣木叶多酚有最好的浸提效果。辣木叶多酚对曲霉菌、毕赤酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用,对两种霉菌的抑制效果比对两种杆菌的抑制效果好。     

组合添加代谢调控剂对肌苷发酵及其代谢流分布的影响

根据肌苷合成的代谢调控机理,选择五种对肌苷合成有促进作用的代谢调控剂—氟化钠、次黄嘌呤、葡萄糖酸钙、氯化钙和柠檬酸钠,并确定了其最适添加量。进而组合添加这些代谢调控剂,对肌苷生物合成过程的多个关键代谢调控节点进行调控,增大流向肌苷合成的代谢流,使肌苷产量得到提高。研究发现,在培养基中组合添加这些代谢调控剂,所得肌苷产量比单一添加代谢调控剂时的肌苷产量有显著提升。其中当组合添加2 mg·L-1 NaF、0.15%次黄嘌呤、15 g·L-1葡萄糖酸钙及10 mg·L-1 CaCl2时,肌苷产量达到了14.01 g·L-1,相比对照组的肌苷产量提高了3.39倍,协同效应显著。继而,对肌苷合成的代谢网络各分支途径的代谢通量进行了测定,证实了组合添加代谢调控剂有利于葡萄糖代谢流由EMP途径向HMP途径发生迁移,实现对葡萄糖主体代谢流分布的调整,促使肌苷合成代谢流增加,从而有利于肌苷产量的进一步提升。     

现代食品工业设计理念

在经济高速发展的今天,人们对食品品质要求越来越高,不同于以往满足基本营养要求,现如今,消费者选购食品时对外观和口感的要求也越来越高,产品的个性化和趣味性极大的影响消费者的购买决定。在此基础上我们提出现代食品工业设计理念,主要是在了解消费者喜好和购买心理的基础上,对产品的色香味形及外在包装形象进行整体的设计,符合市场需求,进而促进产品的销售,并达到宣扬企业文化等的目的。     

鲍内脏酶解工艺条件的优化

目的建立鲍内脏酶解工艺条件,为鲍内脏多糖、多肽的工业化生产提供参考。方法以多糖提取率和蛋白质水解度为指标,研究p H值、提取温度、料液比、加酶量和酶解时间等因素对鲍内脏酶解效果的影响,运用响应面设计优化酶解工艺参数。结果选用木瓜蛋白酶与胰蛋白酶对鲍内脏进行复合酶解,适宜的酶解条件为p H 8.0、酶解温度40℃、料液比1:40,加酶量3000 U/g,在此条件下,比较不同酶解时间对酶解产物的影响,发现多糖提取率在酶解6 h时达到最大,为16.58%,而酶解液的水溶性蛋白含量、蛋白质水解度和对DPPH清除率均随酶解时间的延长而增加。结论木瓜蛋白酶与胰蛋白酶复合酶解鲍内脏效果良好,能够获得较高的多糖提取率,酶解液具有良好的清除DPPH活性。     

羊栖菜多酚提取工艺优化

目的对羊栖菜多酚提取工艺进行优化研究。方法通过乙醇溶剂提取羊栖菜中多酚,探讨乙醇浓度、提取时间、料液比以及提取温度等因素对羊栖菜多酚提取的影响,在单因素的基础上,选取乙醇浓度、提取时间和液料比为影响因子,应用Box-Benhnken中心组和设计原理进行3因素3水平实验设计,以羊栖菜多酚的提取量为响应值,运用响应面(response surface methodology,RSM)法对羊栖菜多酚提取工艺进行优化。结果回归模型具有高度显著性,方程对试验拟合较好,可以对羊栖菜多酚提取量进行很好的分析和预测;各因子对提取量的影响大小依次是乙醇浓度料液比提取时间,羊栖菜多酚最佳提取条件为乙醇浓度25%、提取时间3 h、液料比30:1(V:m)、提取温度40℃。结论在此条件下羊栖菜多酚的提取率达7.91 mg/g,与预测值8.02 mg/g基本一致。     

PVDF超滤膜的制备及其分离大豆蛋白的条件优化

以聚偏氟乙烯(PVDF)为材料,利用浸没沉淀相转化法制备超滤膜,以水通量、孔隙率、截留率等对膜进行表征。结果表明,所制备的膜孔径较均一,在0.7MPa操作压力下,其水通量可达350L/m2·h以上,其孔隙率维持在80%左右,对牛血清白蛋白(BSA)的截留率在90%以上,而对聚乙二醇20000的截留率仅为5%左右。单因素与正交实验结果表明,当温度为50℃、pH=9、操作压力为0.5MPa及料液浓度为240μg/mL,膜的通量最大,对大豆蛋白的截留率可达96.25%。     

柚苷酶处理对琯溪蜜柚果汁澄清度和营养品质的影响

目的:以琯溪蜜柚果汁为对象,研究柚苷酶处理对柑橘果汁澄清度和营养品质的影响。方法:利用反向高效液相色谱法测定柚苷酶对琯溪蜜柚果汁中柚皮苷的水解作用,考察柚苷酶去除琯溪蜜柚果汁中柚皮苷的动态规律;通过检测柚苷酶处理前、后琯溪蜜柚果汁的澄清度、pH值、总酸、抗坏血酸、游离氨基酸、可溶性固形物、总糖及总酚含量,评价柚苷酶处理对琯溪蜜柚果汁品质的影响。结果:柚苷酶能有效去除琯溪蜜柚果汁中的柚皮苷,该动态过程符合经典米氏方程的双曲线特征,柚皮苷分解的Vmax为56.2 U/mL,Km为1.78 mmol/L,柚皮素生成符合酶促反应的1级反应特征;在柚苷酶处理过程中加热导致果汁总酸、总糖、可溶性固形物和抗坏血酸含量降低及游离氨基酸含量和pH值上升;柚苷酶作用也引起总糖、可溶性固形物、抗坏血酸含量降低,同时增加酸和酚类物质的释放,减少游离氨基酸的产生,并可显著提高果汁的澄清度;在柚皮苷去除率为98.5%的条件下,琯溪蜜柚果汁澄清度上升了44.9%,总酸、游离氨基酸含量无明显变化,而总糖、抗坏血酸、总酚含量分别下降10%,14.6%和12.2%,其损失量远远小于树脂吸附法和超滤法。结论:用柚苷酶处理柑橘果汁,能够高效去除柚皮苷的苦味且可提高果汁澄清度并较好保持果汁的营养品质,该过程可通过米氏方程进行有效控制。     

海洋中上层鱼类产品中生物胺的调查与控制

我国海洋中上层鱼类种类丰富,加工企业众多。海洋中上层鱼类是一种高蛋白、高脂肪、高热量的食用鱼类,在其运输、贮藏和加工过程中易受产胺菌的脱羧作用产生大量生物胺,食用后易引发食物中毒,可将生物胺含量作为鱼类产品的一项重要的品质指标。如何对鱼类产品中生物胺进行有效控制,是鱼类产业发展的关键问题。本文通过走访调研周边海洋中上层鱼类加工企业,收集有关生物胺的监控情况,对存在的问题进行分析,并结合文献报道提出海洋中上层鱼类产品生物胺的控制策略,以期指导相关企业的生产加工,为相关部门的政策和科学决策提供可靠依据。