丝瓜提取物对 Aβ25-35诱导的 PC12 细胞损伤的保护性研究

观察丝瓜提取物(Luffa extract,LE)对β-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用。应用Aβ_(25-35)造成神经细胞损伤模型,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应(MTT)比色法检测各剂量组丝瓜提取物对PC12细胞活力的变化,检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)活性水平,通过蛋白印迹试验(Western Blotting)来检测B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。丝瓜提取物剂量组PC12细胞存活率高于模型组,GSHPx活性显著增强,CAT含量显著增加(P0.01或P0.05),Bax表达水平降低,Bcl-2表达增高,与模型组比较,差异显著(P0.05~P0.01)。丝瓜提取物对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用。     

蔷薇红景天总黄酮对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤的保护作用

目的 探讨蔷薇红景天总黄酮提取物（Rhodiola rosea L. total flavonoids extract, TFE）、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对Aβ25-35诱导损伤的小鼠海马神经元（HT22）细胞的保护作用。方法 采用Aβ25-35诱导HT22细胞损伤建立阿尔茨海默病 (alzheimer disease, AD)炎症细胞模型,将HT22细胞分为空白组、炎症模型组（加15 μmol/L Aβ25-35）、阳性对照盐酸多奈哌齐组（12.5 μmoL/L）、不同浓度TFE（12.5、25、50 μg/mL）和TFP（6.25、12.5、25 μg/mL）干预组、活性成分草质素（5、10、20 μmoL/L）干预组,倒置显微镜下观察细胞形态;MTT法测定HT22细胞中乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、超氧化物歧化酶（SOD）活力;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和环氧合酶-2（COX-2）的水平。结果 与空白组比较,模型组神经元细胞形态显著变化,存活率显著下降（P<0.05）,细胞凋亡率显著提高（P<0.05）;与模型组比较,蔷薇红景天TFE 、TFP和草质素组的高、中、低剂量组均能改善细胞形态,提高受损细胞的存活率,显著降低细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2的水平（P<0.05）,且成剂量相关性。结论 蔷薇红景天TFE和TFP及其活性成分草质素对Aβ25-35诱导损伤的小鼠海马神经元HT22细胞具有较好保护作用,其机制可能与抑制细胞炎症发生有关。     

人参总蛋白对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制研究

对人参水溶性总蛋白对β-淀粉样蛋白所致人神经母细胞瘤SH-SY5Y损伤的影响及其作用机制进行研究。使用25μmol/L老化后Aβ_(25-35)处理SH-SY5Y细胞建立阿尔兹海默病体外模型;用人参水溶性总蛋白(6.25、12.5、25μg/mL)预保护SH-SY5Y细胞12 h,随后加入25μmol/L的Aβ_(25-35)共同孵育24 h;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡、抑制活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体膜电位变化;紫外分光光度法检测三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C释放以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达。结果显示SH-SY5Y细胞经Aβ_(25-35)诱导后,细胞活力显著降低,凋亡程度严重增加(P0.000 1);不同浓度的人参总蛋白可以挽救Aβ_(25-35)诱导所致细胞活力降低和凋亡程度增加,并呈现浓度依赖性;人参总蛋白预处理可以降低Aβ_(25-35)诱导的线粒体超氧化物升高,ROS产生,显著抑制Aβ_(25-35)损伤导致的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)降低和三磷酸腺苷水平的下降;人参总蛋白可抑制Aβ_(25-35)所致的细胞色素C向胞质的释放,下调Bax表达、上调Bcl-2表达。     

玉竹多糖对D-半乳糖诱导A7r5细胞衰老的保护作用

目的:研究玉竹多糖（Polygonatum odoratum polysaccharides,POP）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导大鼠胸大动脉平滑肌细胞（A7r5）衰老的保护作用。方法:采用水提醇沉法提取POP,并通过苯酚-硫酸法测得POP中总糖含量。应用D-gal建立A7r5细胞衰老模型,采用MTT法、β-gal染色、活性氧（ROS）、JC-1染色法检测POP对D-gal诱导A7r5细胞衰老的保护作用。结果:POP多糖得率为8.23%,总糖含量为76.48%±0.036%。MTT结果显示POP在400 μg/mL处理A7r5细胞24 h可促进细胞增殖,细胞存活率为174.89%±3.30%。40 mg/mL D-gal处理A7r5细胞48 h可降低细胞存活率至65.93%±1.63%。POP浓度为100 μg/mL时对D-gal诱导A7r5细胞存活率下降的保护作用最为显著,与对照组相比细胞存活率可达到226.87%±12.58%（P<0.001）。POP可减少D-gal诱导A7r5细胞产生的β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）含量,抑制衰老细胞中ROS水平,增加JC-1荧光染色阳性细胞数,保护线粒体膜电位稳定。结论:POP可以抑制氧化应激,抑制D-gal诱导A7r5细胞衰老,具有良好的体外抗衰老作用。     

西青果多酚对甲基苯丙胺诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的:研究西青果多酚对甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用及机制。方法:实验分为对照组、模型组(3 mmol/L METH)和不同浓度西青果多酚组(25、50、100、200 μg/mL西青果多酚+3 mmol/L METH),给药处理24 h后检测细胞存活率、细胞凋亡、细胞DNA损伤、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活力以及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量等。结果:与对照组相比,3 mmol/L METH能极显著降低PC12细胞存活率(P<0.01),显著降低SOD和GSH-Px活力(P<0.05),显著增加胞内MDA含量(P<0.05),极显著增加细胞凋亡率、ROS含量和DNA损伤(P<0.01);与模型组相比,50~200 μg/mL西青果多酚能极显著抑制METH诱导的PC12细胞存活率和SOD活力的降低(P<0.01),显著抑制GSH-Px活力下降(P<0.05),极显著抑制METH导致的细胞凋亡、DNA损伤、胞内MDA和ROS含量增加(P<0.01)。结论:西青果多酚对METH诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与西青果多酚抑制METH诱导的氧化应激,缓解DNA损伤相关。     

染料木黄酮对β淀粉样肽25-35介导的PC12细胞凋亡过程相关基因表达的影响

目的 研究不同剂量的染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨了可能的分子调控机制.方法 PC12细胞传代培养48 h后,选取生长良好的同批次细胞,随机分为5组,即对照组、Aβ模型组(20 μmol/L),Gen干预组(25,50和100 μmol/L),Gen预处理2h后,经Aβ25-35染毒,建立细胞损伤模型;24 h后,收集细胞,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PC12细胞caspase-3,caspase-9,bcl-xl,bad和LRP5基因的表达.结果 与对照组相比,Aβ组细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达上调,其差异具有统计学意义(P <0.05),bcl-xl,LRP5 mRNA表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与Aβ组相比,Gen高剂量组可显著下调PC12细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达(P <0.05);Gen高剂量组可显著上调bcl-xl,LRP5 mRNA,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Gen可能是通过下调细胞凋亡促进基因caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达,上调细胞凋亡抑制基因bcl-xl,LRP5 mRNA表达,拮抗Aβ诱导的神经细胞凋亡,从而发挥神经细胞保护作用.     

阿里红多糖对Aβ25-35诱导的小胶质细胞炎症 反应的影响

目的 探讨阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide, FOPS)及多糖组分(FOP-a)对Aβ25-35诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应的抑制作用。方法 采用Aβ25-35诱导BV-2小胶质细胞活化建立阿尔茨海默病(alzheimer disease, AD)炎症细胞模型, 将BV-2细胞分为空白组、炎症模型组(加40 μg/mLAβ25-35)、不同浓度的FOPS及FOP-a干预组(6.25、12.5、25 μg/mL)。在倒置显微镜下观察细胞形态, 酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞上清中IL-6及单核细胞趋化因子(MCP-1)分泌量; Western blotting法测定NF-κB及IκBα蛋白表达量。结果 Aβ25-35诱导后小胶质细胞出现阿米巴样状态, 通过不同剂量FOPS及FOP-a干预, 能明显改善Aβ25-35对BV-2细胞造成的损伤, 与模型组比较, FOPS及FOP-a可提高细胞存活率。ELISA实验结果显示与空白组比较, 模型组IL-6及MCP-1的分泌量增加, 与模型组比较, FOPS及FOP-a均能减少IL-6及MCP-1的分泌量, 差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示, 与空白组比较, 模型组细胞上调NF-κB-p65蛋白表达、减少IκBα的蛋白表达, 与模型组比较FOPS及FOP-a均能减少NF-κB-p65和上调IκBα的蛋白表达。结论 阿里红粗多糖及多糖组分均能减轻Aβ25-35诱导的BV-2细胞的炎症作用, 其中FOPS浓度为12.5 μg/mL、FOP-a浓度为25 μg/mL时效果最佳。     

海参乙酰胆碱酯酶的酶学特性研究

对海参乙酰胆碱酯酶(AChE)粗酶的酶学性质进行研究.采用含0.1% Triton X-100 的PBS缓冲液(0.1 M,PH7.4)分别从海参肠和海参体壁中提取 AChE,配合Ellman法测定AChE酶活力.结果表明,海参肠与体壁 AChE 具有相似的酶学性质,其最适反应 pH 值为8.0,pH在6～8时稳定;最适反应温度为35℃左右,在25～45℃内热稳定性较好.海参乙酰胆碱酯酶粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱(AcSChI),但对碘化硫代丁酰胆碱(BuSChI)的作用较弱.当底物AcSChI浓度大于50 mM时产生明显的底物过量抑制效应.金属离子 Sn<'2+>、Zn<'2+>、Hg<'2+>、Ag<'+>、Cr<'6+>、Cu<'2+>及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁乙酰胆碱酯酶有不同程度的抑制作用.     

姜黄素提高PC12细胞的抗氧化能力

目的：以低分化和高分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma,PC12）细胞为研究对象,探究姜黄素抗氧化能力及其可能的作用机理。方法：通过噻唑蓝法测定PC12细胞的相对增殖率,然后确定姜黄素的作用浓度及作用时间;采用2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐法及铁离子还原/抗氧化能力法测定细胞的总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）;使用DCFH-DA荧光探针标记法测定活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;分别测定细胞超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定抗氧化酶基因的表达水平。结果：10 μmol/L姜黄素作用24 h后,低分化PC12细胞相对增殖率没有显著变化,但高分化细胞增殖受到显著抑制（P＜0.05）;经不同浓度姜黄素处理后,两种细胞的T-AOC均极显著提高（P＜0.01）,ROS水平极显著降低（P＜0.01）;进一步研究发现姜黄素对SOD、CAT和GSH-Px活力和基因表达均有一定的促进作用。结论：姜黄素可能通过提高SOD、CAT和GSH-Px的活力和其基因表达水平增强PC12细胞T-AOC、降低ROS水平,从而缓解氧化应激,维持细胞稳态。     

红毛藻多糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP）对H2O2诱导的人结肠腺癌（Caco-2）细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢（H2O2）诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：BFP可明显提高H2O2诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。     

石榴籽油自由基清除能力及对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

以吩嗪硫酸甲酯-还原型辅酶I-氮蓝四唑(PMS-NADH-NBT)系统产生超氧阴离子自由基和羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤为模型,考察石榴籽油对超氧阴离子自由基的清除能力以及对DNA和蛋白质氧化损伤的保护作用。通过建立H2O2诱导PC12细胞损伤氧化应激损伤模型,采用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率和细胞损伤程度,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)试剂盒测定细胞的氧化应激变化,研究不同浓度石榴籽油对H2O2刺激的PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:石榴籽油清除自由基的能力以及对DNA和蛋白质损伤的保护作用随着石榴籽油浓度的升高而增强。石榴籽油在0.5~4 mg/m L质量浓度范围能显著提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,显著减少H2O2刺激的PC12细胞中MDA的生成,提高SOD活力及CAT活性。石榴籽油在体外具有清除自由基,减轻羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤以及保护PC12细胞对抗氧化损伤的作用。     

6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞保护作用研究

目的:探讨酸枣仁黄酮类成分6′′′-阿魏酰斯皮诺素预处理对Aβ_1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法:利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素（1、5、10、20和40 μmol/L）预处理SH-SY5Y细胞2 h,随后加入5 μmol/L的Aβ_1-42共同孵育24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;Calcein-AM/PI双染法观察细胞形态;试剂盒检测细胞内活性氧、丙二醛、线粒体膜电位水平及谷胱甘肽过氧化物酶活力;蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白:Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达。结果:6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以抑制Aβ_1-42诱导的细胞凋亡,提高细胞活力(P<0.001);改善Aβ_1-42诱导损伤细胞的氧化应激情况,降低细胞内活性氧(P<0.001)、丙二醛水平(P<0.01),提高谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.001);改善Aβ_1-42诱导损伤的细胞线粒体功能,上调细胞线粒体膜电位水平(P<0.001);增加抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达(P<0.01),并降低促凋亡蛋白Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白的表达(P<0.01)。结论:6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ_1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制与6′′′-阿魏酰斯皮诺素抗氧化活性及调节凋亡相关蛋白表达有关。     

阿里红多糖减弱β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致BV-2细胞的神经炎症反应

目的探讨阿里红多糖(Fomes officinals Ames polysaccharide,FOPS)及多糖纯化组分(FOP-a)对小胶质细胞(BV-2)炎症反应的抑制作用。方法采用声淀粉样蛋内毒性片段(amyloid-β_(25-35),Aβ_(25-35))(40μg/mL)诱导小胶质细胞BV-2活化,建立炎症反应模型,利用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率,并用酶联免疫法考察FOPS及FOP-a对Aβ_(25-35)诱导的BV-2细胞产生的IL-1及TNF-α炎症因子的影响;LDH试剂盒检测BV-2细胞中乳酸脱氢酶活性表达变化;采用QPCR方法检测FOPS及FOP-a对BV-2细胞中EL-6、TNF-a、MCP-1、iNOS、COX-2及NF-κB等基因mRNA表达的影响;采用蛋白印迹方法检测FOPS及FOP-a对BV-2细胞中iNOS及COX-2蛋甶表达的影响。结果 FOPS及FOP-a可抑制Aβ_(25-35)诱导的BV-2细胞IL-1及TNF-α炎症因子的释放和LDH活性表达(P0.05)。FOPS及FOP-a显著抑制EL-6、TNF-a、MCP-1、iNOS、COX-2及NF-κB等基因mRNA表达(P0.05)。FOPS及FOP-a抑制促炎因子iNOS、COX-2的蛋白表达(P0.05)。结论阿里红多糖及纯化组分可明显减轻Aβ_(25-35)诱导下产生的小胶质细胞BV-2的神经炎症反应。     

鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶（ACHE）的活性测定及对有机磷农药的敏感性研究

提取不同生长期的鲫鱼脑中乙酰胆碱酶（acetylcholinesterase，AChE）并做比较，以Ellman法测定其酶活。并用正交试验方法确定了最佳测定条件。采用体外实验法研究了在最佳条件下鲫鱼脑AChE对三种有机磷农药的敏感性。研究结果表明，以体长12cm左右的鲫鱼体内AChE活性最高，正交试验得出AChE最佳测定条件组合为：酶的剂量为40μl、底物最终浓度为120mmol／L、pH值7．5、温度35℃；时间15min。鲫鱼脑AChE对农药的敏感性为敌敌畏〉辛硫磷〉乐果。     

小米抗氧化肽的纯化及其抑制H2O2诱导损伤的胰岛素瘤细胞氧化应激作用

本研究利用Sephadex G-25和DEAE-32对小米抗氧化肽进行纯化,利用醋酸纤维素薄膜电泳法测定小米抗氧化肽的纯度,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除实验考察纯化的小米抗氧化肽对自由基的清除能力。在细胞水平研究小米抗氧化肽对胰岛细胞的保护作用,利用H2O2进行大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）氧化应激造模,采用2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法检测细胞内活性氧（reactive oxygenspecies,ROS）水平,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测细胞活力,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测抗氧化酶的表达水平。结果表明：经过Sephadex G-25和DEAE-32两次层析,小米抗氧化肽达到了电泳纯;50 μg/mL小米抗氧化肽对超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为（62.71±3.86）%、（73.56±4.51）%和（82.62±5.25）%;小米抗氧化肽能显著提升H2O2损伤后细胞活力,降低细胞内ROS水平,抑制H2O2诱导损伤的INS-1细胞的凋亡（P＜0.05）,其可能的机制与超氧化物歧化酶1、过氧化氢酶、谷胱甘肽巯基转移酶、醌氧化还原酶1等抗氧化酶系的表达上调有关。结论：小米抗氧化肽对H2O2诱导损伤的INS-1细胞氧化应激具有一定的保护作用。     

蜂王浆肽对阿尔茨海默症模型斑马鱼运动能力与关键基因表达影响

目的：探究蜂王浆酶解产物（蜂王浆肽）对阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）模型斑马鱼的影响。方法：将150尾（4 dpf）的野生型AB品系斑马鱼随机分为正常组、模型组、盐酸多奈哌齐阳性对照组（3.33μg/mL）、蜂王浆酶解液冻干粉-1组（LPR-1,1000μg/mL）和蜂王浆酶解液冻干粉-2组（LPR-2,1000μg/mL），于6孔板中进行实验，每孔容量为3 mL，每组30尾。除正常组外，其它组斑马鱼采用水溶给予六水氯化铝（180μmol/L）方法建立AD斑马鱼模型。各实验组同时给予相应药物处理24 h后，对其运动功能障碍恢复功效、反应能力改善功效、乙酰胆碱酯酶（AchE）抑制功效与脑凋亡抑制功效进行评价，同时计算TNF-α、caspase-3和BDNF基因的相对表达量，分析其对相关基因的影响。结果：LPR-1、LPR-2给药组和模型对照组比较，斑马鱼总运动距离延长（高度显著，P<0.01），每分钟光暗运动速度差值与BDNF基因相对表达量极显著提升（P<0.001）；乙酰胆碱酯酶（AchE）荧光值（极显著，P<0.001）与脑部凋亡细胞荧...     

常见类胡萝卜素对HepG2细胞紫外氧化损伤的影响

该文研究常见类胡萝卜素对HepG2 细胞紫外氧化损伤的影响。通过HepG2 细胞毒性试验、紫外线A（ultraviolet A,UVA）辐照试验、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量测定和总抗氧化能力（total antioxidant capacity,TAOC）分析等,研究常见类胡萝卜素（法夫酵母类胡萝卜素提取物、虾青素、β-胡萝卜素和海胆酮）对HepG2 细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,虾青素、β-胡萝卜素和海胆酮均能提高UVA 辐照损伤的HepG2 细胞的存活率、GSH 含量和T-AOC,其中虾青素对HepG2 细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）损伤保护作用最强。但是,法夫酵母类胡萝卜素提取物对UVA 辐照HepG2 细胞的存活率、GSH 含量和T-AOC 均无促进作用。综上,法夫酵母类胡萝卜素提取物对癌细胞ROS 氧化损伤不具有保护作用,因此可能是更有效的癌症放疗和化疗辅助治疗保护剂。     

兔血清乙酰胆碱酯酶用于农药残留速测的最佳条件研究

研究了磷酸缓冲液pH值、反应时间、反应温度、底物、酶量对兔血清乙酰胆碱酯酶(AChE)活力测定的影响,结果表明,供试AChE活力最佳条件是:磷酸缓冲液(pH8.0)3.0ml,显色剂0.6%二硫双对硝基苯甲酸(DTNB)50μl,0.75%酶液(pH8.0)100μl,反应温度35℃,混匀稳定后加入底物1%碘化硫代乙酰胆碱(BTCI)50μl,反应180s后在412nm处测定光密度。在上述条件下,测定表明有机磷杀虫剂丙硫磷(Prothiofos)浓度在0.0125～0.4μg/ml,保育时间5～30min之间与AChE抑制率之间存在良好的相关性,可根据检测需要调整保育抑制时间。本试验结果将为应用兔血清AChE研制、改进有机磷和氨基甲酸酯类农药残留速测卡,实现农产品、食品农药残留快速检测提供重要参考。     

蔓性千斤拔黄酮类成分对乙酰胆碱酯酶抑制作用

为研究蔓性千斤拔活性成分对乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase, AChE）的抑制作用，本文以蔓性千斤拔的根为研究对象，采用不同溶剂系统针对黄酮成分进行分级萃取，进一步分离纯化出四种黄酮化合物，采用可逆抑制动力学方法研究了不同溶剂提取物和四种黄酮化合物对AChE的抑制作用及相关抑制常数。结果表明，蔓性千斤拔根的不同溶剂提取物及四种黄酮化合物（Genistein、Philippin C、Philippin D和Flemiphilippinone A）对AChE有较强的抑制作用, 抑制类型为混合型抑制（Mix type），半抑制浓度（IC₅₀）在（57.86±0.67）~（127.28±1.22）μmol/L之间，抑制常数K_i为（54.8±0.43）~（120.58±1.35）μmol/L。研究结果可为发现高效乙酰胆碱酯酶抑制剂先导化合物及千斤拔食品的开发和综合利用提供理论基础及试验依据。