酵母细胞的大小及代谢对啤酒风味及风味稳定性的影响

本文研究了几种大小酵母用于发酵的一些特性,包括产生的乙酸酯类、酯酶的活性、乙醇乙酰转酯酶(AATF)的活性,总酸以及吸收的氨基酸。较大的酵母会产生较多的乙酸酯类化合物(乙酸乙酯,醋酸异戊酯,2-乙酸苯乙酯)。当酯酶与 AATF 酶活性相反时,AATF 酶活性也与酵母细胞大小相关。较小的酵母细胞从麦汁中摄取较多的赖氨酸。用大酵母比用小酵母生产啤酒易获得高 pH 值和高浓度乙酸酯类物质。很明显影响酵母代谢的一个重要因素是细胞倍体的差异,酵母细胞的大小可作为预测啤酒风味及风味稳定性的标志。     

谷氨酰胺转移酶处理对大豆分离蛋白、酪蛋白酸钠和明胶可食膜特性的影响

研究了谷氨酰胺转移酶(TGase)对大豆分离蛋白(SPI1和SPI2)、酪蛋白酸钠(NaCN1和NaCN2)及明胶(G1和G2)3类蛋白质成膜特性的影响。研究表明在成膜溶液中加入TGase(8U/g蛋白),可以使SPI、NaCN和明胶等3类蛋白质膜的抗拉强度和表面疏水性有不同程度的改善,其中抗拉强度增加的辐度为13.1%(P≤0.05),而表面疏水性增加的辐度为2%～216%(P≤0.05);明显降低了膜的水分含量、总可溶性物量及透光率。对于断裂伸长率,TGase的处理使G1膜、NaCN2膜、G2膜、NaCN1膜和SPI2膜分别增加16.3%、16.8%、43.0%、72.6%和440.5%,而使SPI1膜降低7.5%。SDS-PAGE电泳分析表明TGase使这3类蛋白质均产生了共价交联。     

生物絮凝剂产生菌节杆菌LF-Tou 2葡萄糖基转移酶的性质与化学修饰

节杆菌LF-Tou2葡萄糖基转移酶是控制絮凝剂聚糖合成的酶。通过对细胞超声破碎使酶释放,经Sephadex G200凝胶色谱和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱对酶进行了纯化。对酶学特性进行了分析,并用5种化学修饰剂对酶分子中5种不同氨基酸残基与催化活性之间的关系进行了研究。结果表明:该酶的分子质量为14315Da;样品中w(α-螺旋)=31.7%,w(β-转角)=34.1%,w(无规卷曲)=34.2%。Km为2.752μmol,Vmax为58.056μmol/min;Mn2 是酶活性强有力的激活剂,Fe2 次之。酪氨酸和二硫键是酶分子的结构基团,色氨酸、巯基和组氨酸是酶活力的必需基团,在必需基团中色氨酸最关键。     

GST酶活的简易生化测定方法及其在田间杀虫剂抗性检测方面的应用

目前,关于农业及卫生害虫杀虫剂抗性的确切机制报道较少。其抗性的有效治理依靠抗性的早期监测及其种群信息的快速获得,这些信息包括抗性机制的确定和抗性基因频率的准确监测,以供选择合理的杀虫剂。     

克氏锥虫唾液酸转移酶催化机理的理论研究

克氏锥虫唾液酸转移酶（TcTs）是恰加斯病的致病原,它具有由6个β片构成的桶状催化结构域。该催化结构域集中在酶N端的边缘。本文利用量子力学/分子力学（QM/MM）联用的模型研究了克氏锥虫唾液酸转移酶的催化机理。初始酶和底物复合物模型由蛋白质晶体数据库得到（PDB ID:lSOI）。其中QM部分在半经验模型中由AM1描述,在从头算模型中由B3LYP/6-3lG^*描述。MM部分只取酶的N端结构域,并始终由AMBER力场来描述。QM部分与MM部分成键相互作用边界用pseudo-bond方法处理,将3个重要的氨基酸残基（Glu230,Asp59,Tyr342）的C_β-C_β键作为OM/MM模型中的pseudo-bond。由Nudged Elastic Band（NEB）路径优化方法得到的TcTs半经验的最低能量反应路径中,关键原子间距离沿最低能量路径的变化表明:反应开始后Glu230开始靠近Tyr342,当它们之间的氢键距离由2.9 A缩短为2.4 A时,Tyr342将质子转移给Glu230,增强了Tyr342酚氧负离子的碱性,更有利于Tyr342亲核进攻糖苷键。同时,Asp59作为酸,提供质子给糖苷键断裂后的离去基团。过程中,伴随着唾液酸的单糖糖环从扭曲的船式构象向松弛的椅式构象的转变,从而更有利于稳定生成的共价唾液酸-酶中间产物。对得到的半经验的最低能量反应路径再做B3LYP/6-31G^*/MM模型下的优化,得到反应的能垒约为13.53 kcal/mol,说明该反应路径是合理的。研究结果与实验上通过突变的TcTs_D59A推测的乒乓双置换酸碱催化的机理一致,是对实验结论的有力支持,为TcTs抑制剂的设计和结构修饰提供了理论参考,有助于预防和抗恰加斯病的新药物研发。     

单唾液酸四己糖神经节苷脂改善脑梗死患者神经功能缺损症状的疗效观察

目的:观察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)改善脑梗死患者神经功能缺损症状的临床疗效。方法:选取76例急性脑梗死患者,随机分为观察组和对照组,每组38例。对照组按照急性脑梗死的常规治疗和康复训练方案进行治疗。观察组在对照组治疗方案的基础上,加用GM1进行治疗。治疗4周后,对比两组患者的临床疗效和NIHSS评分的变化情况。结果:观察组总有效率为89.47%,对照组为68.42%,观察组总有效率显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的NIHSS评分为(12.57±3.91)分,对照组为(18.64±4.37)分,与本组治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组的NIHSS评分显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GM1可显著改善急性脑梗死患者的神经功能缺损症状,提高其临床治疗效果,值得进一步推广应用。     

肝癌TACE术前天冬氨酸氨基转移酶与淋巴细胞比值对患者预后的影响

目的:探讨肝动脉化疗栓塞(TACE)术前天冬氨酸氨基转移酶与淋巴细胞比值(ALRI)对肝癌患者预后的影响。方法:收集78例肝癌患者TACE术前临床相关资料,计算患者术前ALRI,绘制ROC曲线确定临界值,采用Kaplan-Meier和Cox回归模型对肝癌患者行单因素及多因素生存分析,确定无进展生存期(PFS)和总生存期(0S)的独立预测因素。结果:ALRI=22.82时对于预测生存状态具有最大的敏感度和特异度。Kaplan-Meier生存分析表明ALRI>22.82的肝癌患者平均OS、PFS时间均显著短于术前ALRI≤22.82,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox回归模型分析显示ALRI是影响患者PFS和OS的独立预测因素(P<0.05)。结论:术前ALRI可以作为预测TACE术后肝癌患者预后的独立因素,患者TACE术前ALRI较低往往提示该患者的预后较好。     

静注人免疫球蛋白唾液酸含量测定方法的建立及初步应用

目的建立静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulins,IVIG)唾液酸含量的测定方法,并用该方法对国内外IVIG制品唾液酸含量进行检测。方法根据《中国药典》三部(2015版)和《欧洲药典》8.0中的相关内容建立唾液酸含量检测的方法,对方法中的检测波长、反应体系、沸水浴时间及样品检测浓度进行优化,并验证该方法的线性范围、精密性及准确性。采用建立的方法检测国内外7个厂家的21批IVIG制品唾液酸含量,并进行比较。结果最适检测波长为580 nm;最佳N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminicacid,NANA)标准品、间苯二酚反应液、异戊醇的加入量分别为0.2、0.5、0.5 ml;最佳沸水浴时间为30 min;最佳样品检测浓度为2 mg/ml。NANA标准品在5~80μg/ml浓度范围内,与A580值呈良好的线性关系,相关系数(R2)=0.998;5批IVIG制品检测结果的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)平均值为3.72%,同一批IVIG制品于3个不同时间检测结果的RSD值为3.1%;IVIG样品的加标回收率为(98.5±7.9)%。不同厂家的IVIG制品唾液酸含量存在较大差异。结论本研究建立的方法具有良好的精密性及准确性,可用于IVIG唾液酸含量的检测。     

酸枣仁含药血清对大鼠血脑屏障紧密连接蛋白及血清生化指标的影响

目的:观察酸枣仁含药血清对大鼠血脑屏障紧密连结蛋白及血清生化指标的影响。方法:12只雄性大鼠随机平均分为对照组和酸枣仁组。酸枣仁组给予酸枣仁浸膏,3 mg·(kg·d)-1,连续灌胃3 d;对照组给予等量的生理盐水。腹主动脉取血,分离血清;采用MDCK-MDR1细胞模型,培养3 d至融合,体积分数10%含药血清孵育12 h后进行F-actin染色,在倒置荧光显微镜下观察酸枣仁含药血清对MDCK-MDR1细胞紧密连接蛋白的影响;并采用Mindray BS-220全自动生化分析仪对含药血清总蛋白、白蛋白、肌酸激酶、总胆红素、直接胆红素、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和肌酐等生化指标进行分析。结果:F-actin染色结果显示:对照组细胞紧密连接蛋白F-actin形态完整,形成肌动蛋白丝呈环形分布于细胞周围,提示细胞紧密连接完好,酸枣仁含药血清处理后,F-actin荧光无明显变化,细胞周边肌动蛋白丝带无明显异常。血清生化分析结果显示:酸枣仁组与对照组比较,总蛋白、白蛋白、肌酸激酶、总胆红素、直接胆红素等指标差异统计学意义(P>0.05);酸枣仁组天门冬氨酸氨基转移酶含量(162.2±3.04)U·L~(-1),高于正常对照组(146.0±4.9)U·L~(-1)(P<0.05);酸枣仁组碱性磷酸酶和肌酐含量较对照组显著下降(P<0.001)。结论:酸枣仁含药血清对于细胞紧密联接蛋白无显著影响,但可显著提高天门冬氨酸氨基转移酶,提示酸枣仁可能通过影响体内天门冬氨酸氨基转移酶的活性而发挥抗焦虑作用。     

聚唾液酸的摇瓶工艺

研究了突变株JYL－11（Escherichia coli）的摇瓶发酵工艺条件：在山梨醇40g/L,K2HPO4 20g/L，NH4Cl4g/L,MgSO40.9g/L，蛋白胨1.5g/L，起始pH值7.8，装液量35mL(250mL的三角瓶中），转速250r/min，培养温度37℃，接种量为4％（体积分数）的条件下，聚唾液酸产量达到3.5mg/mL，比优化前提高了1.0mg/mL，提高幅度为40％。