根霉LN-1生物合成天麻素条件研究

以对羟基苯甲醛为底物,探索根霉LN-1生物合成天麻素的最适条件。采用静息细胞转化法,通过分析转化时间、温度、pH值、底物质量浓度等不同因素对转化率的影响,获得了根霉LN-1的最适转化条件为:12 g(湿质量)静息细胞/120 mL转化液,底物质量浓度2.3 mg/mL,pH=5.5,28℃转化24 h。在此基础上,转化液经萃取、硅胶柱色谱分离得到转化产物,通过理化性质和波谱分析鉴定其结构。经HPLC、NMR、EI-MS等测定,证明所得转化产物为天麻素。利用微生物的还原和糖基化作用一步转化合成天麻素,该方法的建立为天麻素的合成开辟了一条新的途径。     

法舒地尔合天麻素治疗椎基底动脉供血不足性眩晕73例临床观察

目的:探讨法舒地尔合天麻素治疗椎基底动脉供血不足性眩晕的临床效果。方法:选取我院收治的因椎基底动脉供血不足引起眩晕患者143例作为研究对象,随机分为观察组与对照组,观察组73例使用法舒地尔联合天麻素治疗,对照组70例使用天麻素治疗,对两组临床疗效进行比较。结果:观察组总有效率为97.26%,明显优于对照组的82.86%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为1.37%,对照组为4.29%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:法舒地尔合天麻素治疗椎基底动脉供血不足性眩晕疗效较好,值得临床推广应用。     

天麻素联合地塞米松保护缺糖缺氧诱导的H9C2细胞损伤

目的：探讨天麻素（gastrodin, GAS）联合地塞米松（dexamethasone, DEX）在缺糖缺氧诱导心肌细胞损伤中的作用及可能机制。方法：建立缺糖缺氧细胞（oxygen-glucose deprivation, OGD）模型,细胞分为5组,即正常对照组（normal group）,缺糖缺氧组（OGD group）,DEX组,GAS组,DEX+GAS组。利用CCK-8实验检测各组心肌细胞活性,利用比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）的活性;利用TUNEL法检测各组心肌细胞的凋亡情况;利用ELISA实验检测各组心肌细胞培养液中炎性因子;利用Western blot检测各组心肌细胞中Notch1、Bax、Bcl-2及Beclin1的表达情况。结果：结果显示GAS与DEX联合使用可显著提高损伤心肌细胞的活性,减少心肌细胞的凋亡;降低促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β的产生及促进抑炎因子IL-10的产生,降低LDH的释放;Western blot结果显示GAS与DEX联合使用可促进Notch信号通路中Notch1的表达,显著降低受损心肌细胞中促凋亡蛋白Bax的表达,促进抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进自噬相关基因Beclin1的表达。 结论：GAS与DEX联合使用,可能通过促进Notch信号通路的激活,促进其自噬,提高细胞的活性,抑制心肌细胞的凋亡,减轻炎症反应,从而减轻OGD诱导的心肌细胞损伤。     

HPLC测定静痛灵胶囊中天麻素的含量

目的测定医院制剂静痛灵胶囊中的天麻素含量。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil C18柱（250 mm&#215;4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（3：97）;检测波长220 nm;流速1.0 mL/min。结果天麻素进样量线性范围0.005 5～0.027 5 mg/mL（r=0.999 9）,平均回收率102.0%,RSD 2.3%。结论本法操作简便,结果准确,可以作为控制静痛灵胶囊质量的方法。     

香豆素衍生物联合天麻素在抑制谷氨酸诱导神经细胞损伤中的作用

以谷氨酸诱导PC12细胞为研究对象,分为对照组、模型组(谷氨酸处理)、天麻素组(天麻素、谷氨酸处理)、CD(香豆素衍生物)组(CD、谷氨酸处理)和联合组(CD、天麻素、谷氨酸处理),采用噻唑蓝法测定细胞存活率,由酶标仪检测细胞培养液中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶的活性和丙二醛的含量;Annexin V/PI染色经...     

高效液相色谱法研究不同版中国药典中不同产地天麻质量的对比

2010版与2015版中国药典对天麻质量研究方法不同。采用高效液相色谱法研究两版药典中不同产地天麻质量的对比。两版药典进行天麻醇浸出物的提取所用溶剂乙醇浓度不同,不同产地的天麻药材浸出物含量结果也有一定差异。采用2015版中国药典规定的含量测定,天麻素含量从0. 0082%到1. 075%,对羟基苯甲醇含量从0. 012%到0. 118%不等。2015版中国药典对天麻的质量研究专属性更强,可以供其药材质量控制。     

网络药理学筛选天麻素防治糖尿病的分子机制

目的:基于网络药理明确天麻素发挥药理作用的分子机制。方法:天麻素化学结构基于中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)下载,靶标蛋白筛选基于SwissTargetPrediction(http://www.swisstargetprediction.ch/)数据库,基于DAVID数据库对靶点进行生物过程(biological process,BP)、细胞成分(cellular component,CC)以及分子功能(molecular function,MF)进行分析,100个靶标通过STRING进行相互作用分析,基于Cytoscape 3.5.1中的Cytohubba模块筛选出关键基因。结果:天麻素筛选出100个靶点,共参与102条通路(P<0.05);主要参与one-carbon metabolic process(碳代谢过程)、response to drug(药物反应)、proteolysis(蛋白水解)等生物过程;主要存在plasma membrane(质膜)、melanosome(黑素体)、dendrite cytoplasm(树突细胞质)等细胞成分;分子功能上,100个靶点主要有insulin receptor substrate binding(胰岛素受体底物结合)、phosphatidylinositol 3-kinase binding(磷脂酰肌醇3-激酶结合)等,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)为关键靶点。通过分子对接明确天麻素与GAPDH有较强的结合活性(Total-Score=7.5)。结论:初步明确天麻素调节的靶点,为动物、细胞实验提供理论依据。     

昭通天麻主要活性成分提取方法比较

以昭通天麻中天麻素和浸出物含量为指标,考察了不同提取方法、溶剂、天麻粒径、料液比、提取次数对天麻中天麻素和浸出物含量的影响,经过实验得出50%乙醇、1:25料液比、50目粒径、沸水浴回流提取2次为最佳提取条件,测定出昭通天麻干燥块茎中天麻素含量为0.43%,浸出物为18.18%。     

天麻素通过抑制细胞凋亡保护谷氨酸诱导的PC12细胞损伤

目的: 研究天麻素(Gastrodin)对谷氨酸诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的影响及可能机制。方法: 以谷氨酸建立体外培养PC12细胞损伤模型并采用MTT比色法测定细胞存活率;AO/EB双染法经荧光显微镜观察细胞凋亡形态;采用流式细胞术检测细胞内活性氧含量以及Annexin V/PI染色后的细胞凋亡率;Western blot法检测细胞内Caspase-3蛋白表达。结果: 天麻素可明显抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,在 0.1~10 μmol/L 剂量呈一定的量效关系;同时,天麻素可明显抑制谷氨酸引起的活性氧(ROS)的累积,降低谷氨酸诱导的活性Caspase-3蛋白的表达,降低PC12细胞的凋亡率,在 0.1~10 μmol/L 剂量呈量效相关性。结论: 在一定剂量范围内,天麻素对谷氨酸损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能与减少ROS的生成,阻止氧化损伤的发生,抑制Caspase-3途径依赖的细胞凋亡相关。