酶免分析仪孵育过程的分段温控方法研究

针对酶免分析仪孵育过程耗时过长、温度稳定性差导致试剂反应差异性较大的问题,提出了一种基于改进型数字PID的分段温度控制方法。首先对孵育过程中试剂温度及孵育位温度变化曲线特性进行分析,确定预升温段及恒温段的分段控制温度参数;然后根据温度参数及各段控制指标,分别对孵育过程的各温度变化段采用不同算法分阶段进行控制;最后基于酶免分析仪框架搭建了温控实验系统,对反应液温度上升时间及温度稳定性进行验证。实验结果表明,试剂由21℃升至37.5℃的温度上升时间为239±5 s,恒温阶段的温度偏差小于±0.2℃。该方法可实现反应液迅速升温并且稳定恒温,保证了孵育过程中生物酶反应的快速及稳定。     

D-A~2O反应器处理生活污水的污泥性状及生物相

研究了D-A2O反应器处理污水过程中活性污泥表观性状、微生物活性及后续生态沟渠的生物相等。结果表明,D-A2O反应器内形成了结构稳定的菌胶团,活性污泥外观呈棕黄色,土壤味浓厚,表观性状较为理想;D-A2O反应器内微生物活性较高,其TTC-脱氢酶活性平均可达(83±2)μg TF/(mg MLSS·h);后续生态沟渠中形成了只有水质较好时方可出现的轮虫、纤毛虫、大型水蚤、绿藻等微生物群落,这与D-A2O反应器出水水质处于一级A标准到Ⅴ类地表水水质之间相一致。     

嗜热β-葡萄糖苷酶的原核表达、纯化及其活性

目的原核表达、纯化嗜热β-葡萄糖苷酶,并检测其活性。方法从嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans基因组DNA中PCR扩增β-葡萄糖苷酶基因,插入原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)Codon Plus,筛选阳性重组菌,IPTG诱导表达。采用镍柱亲和层析法纯化重组酶;紫外吸收法检测酶活力和底物选择性。结果 PCR退火温度为67℃时,可扩增得到单一的目的基因条带;测序结果显示,重组表达质粒中目的基因的核苷酸序列与细菌基因组中该基因序列同源性为100%,未发现终止密码子及氨基酸的改变;表达的重组酶相对分子质量约为54 000;纯化的目的蛋白纯度达95%,浓度为10 mg/L;该重组酶能够高效催化对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p NPG)的水解,60℃条件下的比活力达124 293.5 U/mg。结论成功在E.coli中表达了嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans来源的具有较高催化活力和底物专一性的β-葡萄糖苷酶。     

在酵母中乙酰辅酶A产生酶

正本发明涉及到鉴别具有酶活性的杂多肽的方法,杂多肽用于转化酵母细胞中的丙酮酸酯,乙醛或醋酸酯成乙酰辅酶A,方法包括:1)提供包含缺失(PDH)旁-路的至少一个基因,基因从编码酶丙酮酸酯脱羧酶(PDC),乙醛脱氢酶(ALD)和乙酰辅酶A合成酶(ACS)中选择;2)转化所说具有表达载体的突变细胞,其包括杂核苷酸序列,核苷酸序列编码候选多肽,其具有转化丙酮酸酯,乙醛或醋酸酯为乙酰辅酶A的潜在的酶活性;     

中国高潜水位沉陷区采煤废弃物复垦农田的土壤特征(英文)

为了研究充填介质对中国东部高潜水位采煤塌陷区复垦土壤特征的影响,对采用煤矸石或粉煤灰作为充填介质形成的复垦土壤化学和微生物指标进行分析。结果表明,充填介质粉煤灰的存在能显著提高复垦土壤中pH值和含水率;在0~10 cm、10~20 cm、20~50 cm土壤层,采用粉煤灰形成的复垦土壤MBC、MBN、MBC/TOC的比率高于采用煤矸石形成的复垦土壤;采用煤矸石作为充填介质形成的复垦土壤中,重金属As和Cr含量、土壤微生物碳氮比、呼吸熵等高于对照土壤和粉煤灰充填形成的复垦土壤;主成分分析表明,充填土壤中重金属含量、土壤微生物量和土壤酶活性能代表大部分复垦土壤特征。     

芸薹属绿肥对烤烟根系及土壤酶活性的影响

为了调查芸薹属绿肥在豫西旱区烤烟生产中的效应,采用田间试验,研究了3种芸薹属绿肥翻压对烤烟根系生长及土壤酶活性的影响。研究结果表明:与对照组相比,田闲期不同芸薹属绿肥翻压,均显著增加了不同生育时期烤烟的根系活力、根长、根体积和根干质量,也显著提高了土壤脲酶、蔗糖酶、蛋白酶和过氧化氢酶活性。就3种芸薹属绿肥的效应而言,油菜作为绿肥翻压更有利于提高烤烟的根系生长和土壤酶活性。建议芸薹属植物油菜可作为豫西烟区烤烟生产田闲期的绿肥资源。