白鲢鱼鳞胶原蛋白提取工艺条件优化研究

利用白鲢鱼鳞为原料,采用酶法提取胶原蛋白,并利用响应面分析法对影响鱼鳞胶原蛋白提取率的关键因素的分析,得到酶法提取白鲢鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为底物浓度2.89％、加酶量0.26％、酶解温度58℃、酶解时间54min,在此条件下提取,提取液中胶原蛋白提取率可达57.84％以上.     

碱性蛋白酶限制性酶解乳清浓缩蛋白成胶特性的研究

研究了利用碱性蛋白酶限制性酶解乳清蛋白对其凝胶特性、成胶温度、凝胶粒径和蛋白组分水解情况的影响,结果表明,酶解可以提高乳清蛋白的凝胶特性,在酶解70min时达到最大值,此时乳清蛋白的水解度为7．22％,当酶解时间超过70min后随着水解时间的延长凝胶特性略有下降;各水解时间点乳清蛋白成胶温度均为80℃;酶解后乳清蛋白凝胶的粒径值下降了90％以上,且酶解30min后形成的凝胶粒径值都在50um以内;在碱性蛋白酶的限制性酶解作用下,仅部分β-乳球蛋白和很少部分牛血清白蛋白被酶解,而大部分α-乳白蛋白被酶解。     

碱性蛋白酶控制酶解诱导大豆分离蛋白纳米颗粒的形成机制

以大豆分离蛋白（soy protein isolate,SPI）为原料,利用碱性蛋白酶对其进行酶解处理（0～24 h）,探究SPI的结构变化规律,发现碱性蛋白酶控制酶解可诱导SPI自组装形成系列分布均匀（多相分散系数＜0.3）、粒径可控（90～200 nm）且具有不同表面特性的大豆蛋白纳米颗粒（soy protein nanoparticles,SPNs）,其中水解度（degree of hydrolysis,DH）及亚基解离/降解是影响SPNs形成的关键性因素。酶解初期（10～30 min,DH约3%）,SPI中β-伴大豆球蛋白（7S）组分α与α’亚基的部分降解有利于两亲性结构的释放,提高蛋白表面疏水性,降低临界聚集浓度,形成包含相对完整的7S及大豆球蛋白（11S）亚基的I类纳米颗粒（SPNs-DH 3%）。随着酶解时间的延长（1～2 h）,α与α’亚基的进一步降解促进了疏水性β亚基与B亚基的暴露,增强的疏水相互作用导致体系浊度增加,其中可溶性聚集体向不溶性疏水聚集的转化使得蛋白表面疏水性急剧下降,形成以A亚基及部分β亚基为主导的II类亲水型纳米颗粒（SPNs-DH 5%）。酶解后期（4～24 h）,A亚基的进一步降解则产生更多亲水性多肽,不利于纳米颗粒的形成。进而探究SPNs的形成机制,圆二色光谱结构表明,SPNs的形成与蛋白α-螺旋和无规卷曲结构向β-折叠转化有关。两类SPNs的整体结构均由疏水相互作用维持,而氢键和二硫键分别参与颗粒表面与内部结构的形成。与SPNs-DH 3%相比,SPNs-DH 5%中形成了更多由二硫键与氢键稳定的折叠结构。此外,由于酶解过程中不断释放抗氧化肽段,其所形成SPNs的抗氧化性较原始SPI均有所提升。     

复合酶法水解蟹肉的研究

研究碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶水解螃蟹肉的工艺条件。探讨了时间、酶用量、初始pH值、固液比浓度和温度对螃蟹肉水解效果的影响。在单因素试验的基础上,通过多因素响应面设计实验,获得最适水解工艺条件为时间4h、碱性蛋白酶先水解1h后再加入复合风味蛋白酶共同作用、初始pH值为8.3,固液比浓度为1∶2.5,温度60℃,碱性蛋白酶用量为1.2×10-3AU/g(蛋白质)、复合风味蛋白酶用量1.5LAPU/g,此时蛋白质的水解率为22.8%,TCA可溶性氮增长率含量为40.47%。     

碱性蛋白酶水解豌豆蛋白及其产物抗氧化活性研究

采用碱性蛋白酶(Alcalase)水解豌豆蛋白,对不同条件下制备的豌豆蛋白酶水解产物DPPH·清除率进行了研究,在单因素试验基础上采用响应面分析方法优化酶水解条件,得到最佳酶解工艺条件为:酶解温度56.5℃,酶解时间3.2 h,pH6.1,加酶量3.0％,底物浓度3.0％,在此条件下,碱性蛋白酶水解产物对DPPH·的清除率为47.83％.     

罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

酪蛋白类蛋白物的溶剂分级和酶水解对ACE抑制活性的影响

利用响应面法优化类蛋白反应条件修饰酪蛋白水解物制备酪蛋白类蛋白物.酪蛋白类蛋白物的ACE抑制活性高于酪蛋白水解物,IC50值从52.6 mg/L降低到14.9 mg/L.利用乙醇-水混合溶剂对酪蛋白水解物和类蛋白物进行分级,结果表明,极性最低的溶剂得到的上清液部分活性较高,而沉淀部分活性较低.4种蛋白酶水解酪蛋白类蛋白物的分级产物,导致活性下降,除碱性蛋白酶外,木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的水解产物ACE抑制活性为31.5％～46.8％,但是仍然高于酪蛋白水解物的ACE抑制活性(27.8％),表明类蛋白反应提高了酪蛋白水解物对一些蛋白酶的体外抵抗能力.     

地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶酶解改性玉米蛋白的研究

地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶有限水解可改变玉米蛋白的结构和乳化性能,考察了pH值,温度,底物浓度等因素对水解反应的影响.结果表明:在pH值9,水解温度65℃,水解时间90 min,玉米蛋白质量分数5%以及[E]∶[S]比0.06 AU/g条件下水解度能达到34.05%;随水解程度的增大,玉米蛋白的水溶性和乳化活性呈线性相关性增加,水解度达到34.05%时,对应改性蛋白的乳化活性从原蛋白的8.2 m2/g提高到最大值37.8 m2/g.玉米蛋白的表面疏水性先增加后降低,分子柔性却随着水解度的增大而增加,但在整个水解过程中,玉米蛋白分子主要被降解为两个大的相似片段.