HPLC测定养肝片中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量

目的采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定养肝片中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量。方法采用反相C18色谱柱,以甲醇-水(72:28)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长254 nm。结果五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素均在0.02~1 mg/m L范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%,97.8%,98.2%,RSD分别为1.1%,0.9%,1.3%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于测定养肝片中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量。     

HPLC法测定北五味子果实中五味子甲素含量

采用高效液相色谱法,测定了五味子果实中五味子甲素的含量,检测波长为254nm,标准曲线线性关系R2为0．9992,相对标准偏差为0．59％,平均加样回收率为99．16％。结果表明,此方法准确度较高,为五味子生药及成品药中五味子甲素含量测定提供了一种切实可行的方法。     

北五味子乙素体外抗氧化及抑菌作用的研究

对北五味子乙素进行抗氧化及体外抑菌实验。结果表明:北五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对.OH清除作用大于相同浓度的VC,其半数清除浓度为0.2mg.mL-1;对O2-.清除作用小于VC,其半数清除浓度为0.24mg.mL-1。北五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg.mL-1,对根霉、黑曲霉、南阳酵母无明显抑菌活性。     

北五味子乙素清除自由基及体外抑菌作用的研究

对五味子乙素进行清除自由基及体外抑菌实验。结果表明：五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的VC,其半数清除质量浓度为0.2mg/mL;对超氧阴离子自由基清除作用小于VC,其半数清除质量浓度为0.24mg/mL。五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg/mL,对根霉、黑曲霉、南洋酵母无明显抑菌活性。     

北五味子乙素对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用及分子机制

目的：观察北五味子乙素（schisandrin B,SchB）对缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）大鼠离体心脏功能、梗死面积、乳酸脱氢酶及相关蛋白表达的影响,探讨其对I/R损伤的保护作用及分子机制。方法：Wistar大鼠50 只,随机分为5 组：空白对照组（CON）、缺血再灌注组（I/R）、SchB预保护组（SchB）、PI3K抑制剂组（I/R＋SchB＋LY）、腺苷酸活化的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）抑制剂组（I/R＋SchB＋CC）。采用Langendorff法建立离体大鼠心脏I/R模型,心肌缺血2 h,再灌注5、15、30、60 min。观察I/R期间室内压最大上升速率（＋dp/dtmax）、室内压最大下降速率（－dp/dtmax）、左心室舒张末压、冠脉流量和心率;测定心脏灌流液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）含量,2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltertrazoliumchloride,TTC）染色测定各组心肌梗死面积;免疫印迹检测心肌中总蛋白激酶B（protein kinase B,PKB）、磷酸化Akt（p-Akt）、总糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthease kinase-3β,GSK-3β）、磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）蛋白表达。结果：SchB可显著改善I/R所致的心肌功能损伤,减少梗死面积,提高心肌中p-Akt和p-GSK-3β蛋白表达。结论：SchB对大鼠离体心脏I/R损伤具有一定保护作用,其机制可能与激活AMPK和PI3K/Akt信号通路有关。     

北五味子乙素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察北五味子乙素（schisandrin B,Sch B）对大鼠心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury,MI/RI）的保护作用及其作用机制,为研发疗效确切、抗心肌缺血作用的保健成分提供理论依据。方法：60 只雄性Wistar大鼠随机分为6 组：假手术组,MI/RI组,Sch B 20、40、80 mg/（kg•d）剂量组,阳性对照（美托洛尔（metoprol,MET）,2.5 mg/（kg•d））组。各组灌胃给药3 周后建立大鼠缺血再灌注损伤模型,肉眼观察大鼠心脏组织变化,采用四氮唑硝基蓝（nitro blue tetrazolium,NBT）染色法测定大鼠心肌梗死面积,利用全自动生化分析仪测定大鼠血清中杂化型肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）、乳酸脱氢酶（lacticdehydrogenase,LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力以及丙二醛（malonaldehyde,MDA）、一氧化氮（nitric oxide,NO）水平,使用生物信号采集处理系统测定大鼠心脏功能指标变化,显微镜下观察大鼠心肌病理学改变状况。结果：Sch B能够明显减轻MI/RI造成的大鼠心脏损伤,减小心肌梗死面积,提高大鼠血清中SOD活力和NO水平,降低MDA含量和CK-MB、LDH活力,改善大鼠心肌功能。结论：Sch B对大鼠MI/RI有一定的保护作用,其机制可能与减少氧自由基释放、保护缺血心肌免受MI/RI有关。     

高效液相色谱法同时测定保健食品软胶囊剂型中五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲

目的 优化样品前处理条件, 建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)同时测定保健食品软胶囊剂型中五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲3种成分含量的方法。方法 样品经环己烷溶解后, 经过甲醇萃取, 被测成分采用CAPCELL PAK-C18(4.6 mml.D×250 mm, 5 μm)色谱柱分离, 以甲醇-水作为流动相进行梯度洗脱, 流速为1.0 mL/min。结果 保健食品软胶囊剂型中五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲3种成分的线性范围分别为0~295、0~303、0~5022 μg/mL, 相关系数为0.9992~0.9995, 线性良好; 对五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的进行高、中、低3种水平浓度下进行加标回收实验, 回收率为89.1%~97.8%; 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)≤3.9%(n=6)。结论 该方法前处理简单, 灵敏度及加标回收率高, 准确度和稳定性好, 可以满足保健食品软胶囊剂型中五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲的分离和含量测定。     

五味子乙素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用

目的：观察五味子乙素（schisandrin B,SCB）对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用。方法：ICR小鼠随机分为4 组,即正常对照组（灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水）、衰老模型组（灌胃蒸馏水,皮下注射220 mg/kg D-半乳糖）、SCB（M）组（灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射D-半乳糖220 mg/kg）、SCB（C）组（灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射生理盐水）,连续给药7 周。通过避暗实验及Morris水迷宫实验观察SCB对小鼠学习记忆能力的影响;通过WST-1法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;通过硫代巴比妥酸法检测小鼠脑组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;通过实时定量聚合酶链式反应及Western blot法,检测小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达情况。结果：SCB能够明显改善D-半乳糖诱导的脑衰老小鼠的学习记忆能力,提高脑衰老小鼠脑组织中SOD活力,降低MDA水平,明显降低脑组织中的p19、p53、p21基因的表达水平。结论：SCB能够改善D-半乳糖诱导的小鼠脑衰老,该作用可能与其提高小鼠抗氧化能力及下调小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达水平有关。     

五味子乙素通过抑制心肌细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探究五味子乙素（schisandrin B, Sch B）对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）大鼠的保护效果及作用机制。方法：选取40只SD大鼠，大鼠随机分为Control组、MIRI组、MIRI+30 mg/kg Sch B（MIRI+L-Sch B）组和MIRI+60 mg/kg Sch B（MIRI+H-Sch B）组，每组10只，Sch B灌胃处理7 d。随后采用左前降支结扎进行MIRI造模，Control组大鼠仅进行假手术。造模完成后，记录再灌注120 min后的大鼠心脏的射血分数（EF）、缩短分数（FS）、左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室内压最大下降速率（－dp/dtmax）值。采集大鼠血清检测肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）活性。分离大鼠心肌缺血组织，检测组织髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物（GSH-PX）水平，TTC、HE and TUNEL染色实验分别观察心肌梗死面积、心肌组织病理形态学变化和心肌细胞凋亡情况，Western blot检测大鼠心肌组织中cleaved caspase 3、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2关联X（Bax）蛋白表达情况。结果：L-Sch B预处理后，MIRI大鼠的EF、FS、－dp/dtmax以及GSH-PX水平显著上升（P<0.05或P<0.01），CK-MB、LDH、cTnI活性以及MDA水平显著降低（P<0.05或P<0.01），心肌梗死面积显著减少（P<0.01），心肌组织损伤得到改善（P<0.01），心肌细胞凋亡减少（P<0.05、P<0.01），cleaved caspase 3/caspase 3、Bax蛋白表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P<0.05或P<0.01）；且MIRI+H-Sch B组大鼠+dp/dtmax值显著升高（P<0.05）、MPO水平显著降低（P<0.01），该结果具有剂量效应。 结论：Sch B预处理可减轻MIRI引起的大鼠心肌损伤，其作用机制通过抑制氧化应激反应，下调cleaved caspase 3、Bax蛋白表达和上调Bcl-2蛋白表达以抑制心肌细胞凋亡实现。     

大孔树脂分离纯化五味子醇甲的研究

分别用4种不同型号的大孔吸附树脂对五味子醇甲的吸附与解析的性质进行研究.结果表明,AB-8型树脂对五味子醇甲具有很好的吸附和解析能力,确定其工艺参数为上样浓度0.07 mg/mL,上样流速为1.5 mL/min,静态吸附时间为4 h,解析流速为0.75 mL/min,解析用量为80 mL.