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根据基因组序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)得到了红色红曲菌中组蛋白去乙酰化酶mrsir2基因的完整cDNA序列,其编码序列(coding sequence,CDS)为1539 bp,编码512个氨基酸,含有一个SIR2蛋白保守结构域。根据大肠杆菌的密码子的偏好性对mrsir2序列进行优化,优化后的序列与p ET-28b载体连接后转入宿主菌E.coli BL21中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。实验结果表明:在16℃条件下用终浓度为0.25 mM的IPTG诱导培养16 h后,目的蛋白Mr Sir2可溶性表达效果良好。Ni2+柱亲和层析纯化后的Mr Sir2重组蛋白在SDS-PAGE上显示为一条约75 ku大小的条带,蛋白定量浓度达1.97 mg/mL,经Western blot鉴定为目的蛋白,测定酶活为78.5(OD/min/mg),780μM的二氢香豆素(dihydrocoumarin,DHC)对Mr Sir2蛋白的酶活抑制率为47%。Mr Sir2蛋白的可溶性表达为全面了解其酶学特征提供了材料,也为体外分析蛋白相互作用奠定了基础。 相似文献
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针对电力工程车牵引变流器在工作过程中产生的直流侧振荡现象,提出一种直流侧电压稳定控制的方法,提取多重可能影响直流侧电压的振荡因素,通过前馈补偿到转矩来抑制振荡。文章通过仿真模型及实际系统运行,对上述方法进行验证,结果显示该方法能够有效抑制系统振荡。 相似文献
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许多工程问题的数学模型常常归结为二维优化问题,寻求高效率和高精度的优化方法一直是人们研究的热点问题之一。利用调和函数的性质和格林定理研究了调和函数的内点取值与其边界值的关系,说明了其极值的非局域性特点。当二维优化问题的目标函数是调和函数时,其二维寻优将简化为在其有限可行域边界上的一维搜索问题。最后通过四个算例说明了方法的可行性。研究思路和结论可有效推广到三维优化问题的求解。 相似文献
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水电工程地下洞室断面尺寸通常较大,过水隧洞混凝土衬砌体形平整度要求较高,隧洞边顶拱通常采用钢模台车进行混凝土衬砌。但在某些工程中,受台车支撑系统影响,台车中间部位模板无法采用全站仪测量模板定位偏差。以白鹤滩水电站地下洞室为例,对混凝土衬砌钢模台车模板测量方法进行研究,提出了一种有效的辅助测量方法,即改进常规做法,改在钢模台车上牵引钢丝线。实践表明,改进后的测量方法对提高混凝土体形质量能提供有效的保障措施,可在类似工程中推广使用。 相似文献
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