米曲霉酸性蛋白酶Ap的结构分析

米曲霉(Aspergillus oryzae)酸性蛋白酶与部分商品化的蛋白酶相比,具有对大豆蛋白水解效率高且水解产物苦味弱的特性。作者采用RT-PCR技术克隆获得酸性蛋白酶(Ap)基因,结合生物信息学手段,对Ap进行分析与预测。结果表明:Ap基因对密码子使用频率具有偏好性,特别是第3位密码子对GC碱基的使用频率高,达到74%;编码404个氨基酸残基。Ap属于胞外天冬氨酸蛋白酶。以海枣曲霉(A.phoenicis)的酸性蛋白酶(PDB code:1IBQ)作为模板同源建模结果可知,Ap分子至少能与2个Zn2+结合,内含1个二硫键、163个氢键、35个盐碱。该酶与1IBQ相比空间结构总体相似,部分重要位点(如flap环、转角和ψ-loops)的氨基酸残基较为保守。     

酸奶中保加利亚乳杆菌的抗药性实验研究

测定了10种常用抗菌药物对市售酸奶中分离的57株保加利亚乳杆菌的MIC。结果表明，泰能、克林霉素、林可霉素、头孢唑啉和红霉素对乳杆菌的抗菌或活性最强，MIC90值为0．25～2．0mg／L，敏感率为96．5％～86．0％其次是阿莫西林、复方新诺明、青霉素，其MIC90值为2．0～4．0mg／L，敏感率为84．3％～78、9％。庆大霉素、氯霉素其MIC90值为4．0～16．0mg／L，敏感率为63．2％～59．7％。酸奶中的保加利亚乳标菌存在抗药性，其抗药性基因是否具转移性有待于进一步研究。     

大豆分离蛋白重组蛋白酶水解肽对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响

为了研究重组酱油曲霉碱性蛋白酶(rAp)水解大豆分离蛋白获得的大豆肽对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响,将诱导表达后分离纯化的rAp对大豆分离蛋白进行水解,然后将水解液灌胃小白鼠,测定其水解液对小鼠免疫器官指数、小鼠血清溶菌酶活性和小鼠血清抗菌活力等对小鼠免疫功能的影响;通过测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)的活性以及丙二醛(MDA)浓度等,进一步检测对小鼠血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)浓度的影响。结果表明,大豆肽对小鼠免疫器官指数没有显著影响,但可显著提高小鼠血清溶菌酶活性和小鼠血清抗菌活力;对小鼠血清中的GSH-PX的活力影响不显著,但能显著提高血清中的CAT活力和显著降低MDA浓度。由此可见,rAp水解大豆分离蛋白获得的大豆活性肽在一定程度上能增强小鼠机体的免疫功能和抗氧化活性,在保健品行业为大豆的高值化利用提供了实验依据。     

南方山荷叶内生真菌与根际真菌的多样性及相关性探讨

对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定，得到25株内生真菌和19株根际真菌，其中内生真菌分属于5个科、8个属，根际真菌分属于5个科、6个属。对这两组真菌作比较分析，显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性，并对植物内生真菌的起源作了初步探讨。     

香菇酸乳对小鼠免疫力的影响

为了研究自制的香菇酸乳对小白鼠免疫功能的影响,作者采用小白鼠的体重增长率、脏器指数、血清抗菌活性、溶血素含量、溶菌酶活性和巨噬细胞吞噬功能等检测方法,比较了自制的香菇酸乳与普通酸乳和生理盐水对小白鼠免疫功能的影响.结果表明,与生理盐水相比,香菇酸乳和普通酸乳能显著地提高小白鼠的体重增长率、脏器指数和血清抗菌活性,而两种酸乳之间差异不显著(香菇酸乳比普通酸乳更能显著地提高胸腺指数除外);香菇酸乳显著地提高小白鼠血清的溶血素和巨噬细胞的吞噬能力,但是普通酸乳和生理盐水不具有该功效;香菇酸乳和普通酸乳与生理盐水相比较均能显著地提高小白鼠血清溶菌酶活性,且香菇酸乳比普通酸乳提高溶菌酶活性的作用更显著.     

重组酵母产中性米曲蛋白酶的工艺研究

通过单因素试验探索重组酵母产中性米曲蛋白酶的最佳条件。结果显示,重组酵母菌产蛋白酶的最佳表达条件是:诱导时间132 h,诱导温度26℃,诱导接种量为OD600值6.0,诱导培养振荡速度为240 r/min,诱导剂(甲醇)添加量0.8%(体积比),YNB添加量7 g/L,pH 7.0。在最佳培养条件下,发酵液中的最高酶活达到538 u/mL。与初始的发酵条件相比,中性米曲蛋白酶的产量提高1倍。     

南方山荷叶内生真菌与根际真菌的多样性及相关性探讨

对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定,得到25株内生真菌和19株根际真菌,其中内生真菌分属于5个科、8个属,根际真菌分属于5个科、6个属.对这两组真菌作比较分析,显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性,并对植物内生真菌的起源作了初步探讨.     

粤北地区香菇多糖和可溶性蛋白的研究

分别对7株香菇菌株的子实体和菌丝体的多糖和可溶性蛋白含量进行了测定,并对可溶性蛋白进行了电泳分析.结果表明:野生香菇子实体多糖和可溶性蛋白的含量分别高于和低于栽培香菇子实体的含量,所有香菇菌株的菌丝体多糖和可溶性蛋白含量均高于相应子实体多糖和可溶性蛋白含量.菌丝体可溶性蛋白电泳图谱谱带问差异较小;而子实体可溶性蛋白电泳图谱谱带间差异较大,进一步通过聚类分析发现,当相似系数为0.70时,7个香菇菌株可被分为4类,这表明子实体可溶性蛋白电泳图谱对于香菇的分类具有重要的作用.