牛初乳中提取乳铁蛋白工艺的研究

从牛初乳中分离提取乳铁蛋白,建立快速分离纯化乳铁蛋白的工艺.选择弱酸性阳离子交换剂CM SEPHAROSE FAST FLOW装柱,脱脂牛初乳在4　℃下进行动态吸附上柱后进行阶跃洗脱.通过对洗脱条件的比较优化,确定了分离提取乳铁蛋白的最佳工艺条件为：牛初乳料液pH　6.6,上柱速度300　mL/h,阶跃洗脱剂的体积分数分别为1.5%和5.0%的NaCl,洗脱体积流速200 mL/h.乳铁蛋白洗脱液经过超滤和冷冻干燥,得到冻干粉纯度可达98.98%,得率为29.0%.     

绿色木霉合成几丁质酶条件的研究

绿色木霉ＺＵ０１１在以０．５％几丁质为唯一碳源的培养基中几丁质酶活达到０．１２４ＩＵ／ｍＬ。几丁质酶合成的最佳碳源和诱导物为几丁质。在一定范围内啬２基中几丁质浓度,葡萄糖浓度,微量元素盐浓度和碳氮比都能提高几丁质酶活。胆汁酸和吐温８０作为表面活性剂能显著提高几丁质酶活。     

以甘油为碳源分批补料高密度发酵产环氧化物水解酶

环氧化物水解酶能够立体选择性地催化环氧化合物生成相应的二醇,具有重要的工业应用价值。通过摇瓶实验研究了不同甘油浓度对重组大肠杆菌Rosetta(DE3)/pET28(a)-CESH生长的影响,确定了IPTG最佳诱导时机、诱导浓度和诱导后培养温度。在15 L发酵罐进行放大培养,对比分批补料和批次发酵,前者生产率达6.71×105 U·(L·h)-1,比批次发酵提高了33.3%,酶活达到2.0×107 U·L-1,所用的时间,比批次发酵缩短了10 h,适合于工业应用。     

壳聚糖酶解的随机进攻动力学模型

在假设里氏林霉ATCC56764产生的壳聚糖酶水解壳聚糖是以唯一内切方式随机进攻β-1，4糖苷键的基础上，结合终产物非竞争性抑制的M-M动力学，建立了壳聚糖降解的数学模型，并用四阶Runge-Kutta方法结合Powell优化方法对模型中各个动力学参数进行了优化。模型计算结果与实验数据的比较表明，建立的数学模型能够合理地描述和解释壳聚糖降解的动力学过程，有助于加深对壳聚糖酶法降解机理的认识，对生产特定聚合度的壳聚糖具有指导意义。     

红豆杉单组分多糖的超滤预处理及连续分离工艺

以红豆杉枝叶部位总多糖为原料,采用超滤方法对原料进行预处理,并对工艺进行优化,最佳优化条件为:截留相对分子质量为5kDa,温度为25℃,压力为20psi(1psi=6894.76kPa),pH值为6.8。 在此条件下,将浓度为10g/L的1L红豆杉多糖溶液超滤至125mL,再添加去离子水至1L,反复超滤4次,得到的红豆杉多糖的截留率和脱色率分别为87.2%和75.6%。进一步以红豆杉单组分多糖间歇色谱分离工艺参数为基础,采用自行设计制作的连续色谱设备,建立了连续离子交换色谱分离红豆杉酸性单组分多糖PST-1的分离工艺,处理量达到每批次100.08L,PST-1纯度在99.0%以上,收率达到50.0%。     

新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化

从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16S rRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens. Plackett Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为：黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面（RSM）优化的最佳培养基质量浓度为：黄豆饼粉2.72 g/L,可溶性淀粉 26.67 g/L,(NH4)2SO4 3.95 g/L,K2HPO4 1.8 g/L,NaCl 2 g/L,MgSO4 0.5 g/L,CaCO3 0.72 g/L,CuSO4 0.02 g/L,FeSO4 0.02 g/L,MnSO4 0.02 g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48 U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、¹H-NMR及¹³C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.     

一株产新型水溶性抗真菌化合物的海洋芽胞杆菌发酵动力学的研究

从浙江省台州市东海中筛选得到的一株对白色念珠菌有较好抑制作用的微生物,经16S r DNA鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens ZJU-2011)。采用单因素优化方法在5 L发酵罐进行分批发酵实验,得到了最佳发酵条件为:接种量为体积百分比10%,装液量为体积百分比60%,通气量500 L·h-1,转速500 r·min-1,温度28℃,发酵时间24 h。在此基础上,通过假设还原糖浓度是淀粉水解以及菌体生长和次级代谢物产生消耗的综合作用,根据培养基消耗、菌体生成量和抗真菌化合物产生与发酵时间的关系,采用Logistic方程和Luedeking-Piret方程建立底物消耗、菌体的生长和抗真菌化合物生成的动力学模型,并拟合了模型参数。结果表明,模型计算值与实验数据拟合度分别为0.978,0.99和0.90。该模型能较好地预测芽孢杆菌分批发酵生产抗真菌抗生素的动力学过程。     

SPEC 70 SLS阳离子树脂分离牛乳中乳铁蛋白

建立了乳铁蛋白和乳过氧化物酶的反相液相色谱检测法;并采用SPEC 70 SLS离子交换树脂,研究了一步法分离脱脂牛乳中乳铁蛋白和乳过氧化物酶的工艺条件。高效液相条件:波长220 nm,流速1 mL/min,乙腈体积分数在20 min内从25%增加到75%。SPEC 70 SLS树脂静态吸附条件优化:温度15℃,pH7.0,时间3 h。在此条件下,乳铁蛋白标准品的吸附量(质量比)为22.0 mg/g。乳铁蛋白吸附过程符合Langmuir吸附等温线模型,最大吸附量为21.73 mg/g。在静态脱脂牛乳吸附过程中,乳铁蛋白和乳过氧化物酶的吸附量分别为7.64,6.89 mg/g,优于CM Sepharose FF和SP Sepharose FF。     

利用可再生纤维素资源生物转化生成木糖醇的研究进展

每年农林业生产都会产生大量含半纤维素的废料 ,如处理不当会污染环境。传统的采用半纤维素水解液生产木糖醇的方法需要经过多步提纯 ,然后通过精制木糖加氢制备 ,成本很高。利用微生物直接转化水解液中的木糖生成木糖醇已成为目前研究的热点。文中着重介绍了目前国内外在水解液脱毒和水解液发酵方面所取得的进展