以双水相萃取法从猪心中快速制备细胞色素C

把化工上常用的双水相萃取法应用于生物分离,从猪心中纯化具有药用价值的细胞色素C。以14％聚乙二醇和12％硫酸铵两相系统对粗提液进行萃取,细胞色素C全部浓缩于盐相。对盐相进行去盐后,经人造沸石快速吸附与洗脱、三氯醋酸沉淀等制得细胞色素C半成品,以弱酸性阳离子交换柱进行精制。聚丙烯酰胺凝胶电泳、可见吸收光谱扫描等定性定量分析证明了此法所得产品纯度好,提取率也较高。与传统方法比较,此法工艺简单,成本低,耗时少,尤其适用于大规模生产。     

柱子型直接固定氯化血红素及其应用

用惰性载体Sepharose 4B、琼脂糖、微晶纤维素、人造沸石等分别直接固定氯化血红素,分别装柱后应用于痕量过氧化氢及血清葡萄糖浓度的检测,并比较它们的检测灵敏度。结果表明,以上几种载体经活化后都能很好地固定血红素．固定化的血红素装柱后保持稳定的催化过氧化物的活性,检测灵敏度高,血红素在几种载体上检测灵敏度的大小为：Sepharose 4B〉琼脂糖〉微晶纤维素〉人造沸石。本法操作简单且成本低,柱子型直接固定氯化血红素可反复使用,能快速检测样品中的痕量过氧化氢及用于血清中葡萄糖含量的检测。     

维生素C与氢基酸褐变反应的研究

通过测定色变速度、pH变化和进行可见光吸收光谱的扫描等,考察了维生素C与氨基酸的反应。维生素C以极慢的速度向形成有色物方向变化,氨基酸首先以R基团而非α-氨基与维生素C分子反应,加速褐变。R基团中有氨基或芳香环的氨基酸与维生素C反应速度最快,惰性R基团的氨基酸与维生素C反应极慢。半胱氨酸对维生素C变化及色变有抑制作用。维生素C与氨基酸褐变的有色物的光吸收在340～400nm区域,主要来自于维生素C分子部分,色氨酸的吲哚环有助色作用。在实验的基础上分析了维生素C与氨基酸褐变反应的机理。     

1-乙氧基-2-丙醇/水/癸烷的液液平衡

引　言石油是目前最重要的能源 ,除了液体石油外 ,油砂和油岩也能作为石油资源 .油岩分散存在于砂岩层中 ,只能通过物理的方法开采 ,乳化是可利用的提取方式之一 .为了了解乳化的原理及其体系的变化动态 ,作者曾经考察了 2 乙氧基乙醇、癸烷和水的液液三相平衡[1] .作为系统研     

Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱快速纯化猪心中肌红蛋白和细胞色素C

以Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱结合Sephadex G-75分子排阻色谱快速提取纯化猪心中肌红蛋白（Myoglobin,Mb）和细胞色素C（Cyt C）。在pH值为7.6-8.5范围内,Cyt C吸附在Q SepharoseTMXL强阴离子交换柱上,而Mb会缓慢通过。所以选择QSepharoseTMXL强阴离子交换柱的上样pH值为7.9,洗脱pH值为7.2。电泳检测证明,经过QSepharoseTMXL柱初步纯化所得Mb和Cyt C的产率分别为89.7%和93.2%;再经过Sephadex G-75分子排阻色谱可得到纯的Mb和Cyt C,其产量分别为77.43mg.（kg猪心）-1和86.42mg.（kg猪心）-1。使用QSepha-roseTMXL强阴离子交换色谱能从猪心中快速制备纯的Mb和Cyt C。     

固定甘氨酸制备阳离子交换树脂及其吸附金属离子性能的研究

利用环氧氯丙烷活化法将甘氨酸固定于SephadexG-25凝胶上制备弱酸性阳离子交换树脂。通过树脂对水中Ca2＋和Mg外的静态吸附、动态吸附和解吸等实验,探讨了金属离子溶液初始浓度、树脂pH值和流速等对树脂吸附Ca2＋和Mg2＋的影响以及再生条件。结果表明,环氧氯丙烷活化法固定甘氨酸制备阳离子交换树脂的偶联率为12mg·g-1;树脂对Ca2＋和Mg2＋有良好的吸附／解吸性能,室温下,对Ca件和Mg抖的静态饱和吸附量分别为7．59mg·g-1和6．16mg·g-1,而动态饱和吸附量则分别达到10．83mg·g-1和8．80mg·g-1。该树脂交换柱较好的操作条件如下：以pH值为8．5的0．05mol·L2＋ Tris—HCl溶液作为平衡液,上样流速1mL·min-1;以pH值为1．5的1mol·L-1 NaCl-HCl溶液作为洗脱液,流速0．5mL·min2＋。该树脂性能稳定,再生效果好,可重复多次使用。     

Q Sepharose^TM-XL强阴离子交换色谱快速纯化精氨酸激酶及其多克隆抗体的研究

利用QSepharose^TM-XL强阴离子交换色谱从虾的精氨酸激酶粗提液中纯化出精氨酸激酶。以其免疫大白兔．然后利用QSepharose^TM-XL强阴离子交换色谱从高免疫兔血清中纯化精氨酸激酶的多克隆抗体。采用SDS-PAGE检测精氨酸激酶及其抗体的纯度,并进行了活性测定。结果表明．利用QSepharose^TM-XL强阴离子交换色谱纯化出的精氨酸激酶及其多克隆抗体纯度高、活性强。建立了快速高效、操作方便而又适合实际应用的制备精氨酸激酶及其多克隆抗体的方法．可为精氨酸激酶及食品过敏的相关研究提供帮助。     

以蚯蚓为原料制备生物态含铁蛋白质纯品

以获取高营养性的蚯蚓含铁蛋白质为目的，根据蚯蚓体内血红蛋白分子结构的特性与分布状态，采用了双水相萃取等分离纯化工艺进行了制备生物态含铁蛋白质纯品的研究。结果表明，用聚乙二醇（12％，W／W）．硫酸铵（12％，W／W）组成的双水相萃取样品后直接用等电点沉淀法，即在pH约为5．1的缓冲液中进行透析可获得高纯度的蚯蚓含铁蛋白。在此基础上若再采用Q Scpharosc fast flow离子交换层析和梯度洗脱的方法就能使产品的质量进一步提高。综合分析说明了研究中所采用的工艺较简单，成本不高，可操作性好，且能获得高品质的含铁蛋白质产品。研究为从食品层面上利用开发蚯蚓、推动饲养蚯蚓产业的发展和制备补血功能食品等提供了实验数据。     

亲和层析快速提取白果和大豆的抗氧化蛋白

用环氧氯丙烷活化法把血红素结合于惰性分子筛填料SephadexG-25上作为配基做成亲和层析柱,用于从白果或大豆中提取具有抗氧化活性的蛋白。此层析柱以去离子水为平衡液、0.2mol/L的NaAc-HAc缓冲液(pH3.6)为洗脱液,层析得到的蛋白经亚油酸-硫氰酸钾抗氧化活性测定证明具有较高的抗氧化活性。白果全蛋白的抗氧化活性为7.92%,经此方法提纯后得到2种抗氧化多肽,活性达到17.45%;而大豆中的抗氧化蛋白经纯化则得到多种,抗氧化活性由全蛋白时的10.52%提高至30.72%。这是一个新的、只需一个步骤即可从白果或大豆蛋白提取液中提取到具有高抗氧化活性蛋白的方法,具有成本低,快速高效的特点。     

Q Sepharose^TM XL强阴离子交换色谱快速纯化猪心中肌红蛋白和细胞色素C

以Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱结合Sephadex G-75分子排阻色谱快速提取纯化猪心中肌红蛋白（Myoglobin,Mb）和细胞色素C（Cyt C）。在pH值为7.6-8.5范围内,Cyt C吸附在Q SepharoseTMXL强阴离子交换柱上,而Mb会缓慢通过。所以选择QSepharoseTMXL强阴离子交换柱的上样pH值为7.9,洗脱pH值为7.2。电泳检测证明,经过QSepharoseTMXL柱初步纯化所得Mb和Cyt C的产率分别为89.7%和93.2%;再经过Sephadex G-75分子排阻色谱可得到纯的Mb和Cyt C,其产量分别为77.43mg.（kg猪心）-1和86.42mg.（kg猪心）-1。使用QSepha-roseTMXL强阴离子交换色谱能从猪心中快速制备纯的Mb和Cyt C。