C-反应蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定与国际比对

建立了C-反应蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。作为C-反应蛋白纯品标准物质的潜在定值方法,选取同位素标记亮氨酸和缬氨酸为内标,重量法与待测样品准确混合。利用Zorbax SB-Aq色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式(MRM)测定。对样品的测定不确定度进行计算与分析,测得结果为（41.5±0.9） mmol/kg。利用该方法参加了基于中、日、韩三国计量院合作框架下的国际比对,并取得了比对结果的等效一致。     

国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的准确测量

本研究以三个氘原子(原子量为2)标记的肌酐为测量所用的内标,建立了血清中肌酐测量的液相色谱-同位素稀释串联质谱法.采用该方法为2种不同浓度的冰冻人血清肌酐标准物质定值,并参加了国际物质量咨询委员会组织的国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的测定.比对结果表明(与比对组织国家美国NIST):对于低浓度样品相对偏差0.3%,对于高浓度样品相对偏差0.07%,且不确定度是参加本次国际比对的6个国家中最小的.说明该标准物质的研制及其定值方法达到了国际先进水平.     

脂肪酶对典型动、植物油脂的水解特性

考察了脂肪酶对典型动物油脂(猪油、羊油、牛油)、植物油脂(橄榄油、大豆油、菜籽油)底物的酶解特性,以改进型铜皂-分光光度法测定的脂肪酶水解后体系中的脂肪酸含量表征酶活力大小。结果显示,碱性脂肪酶Leveking-P1000水解油脂的最适pH为8.0,不受底物来源的影响。脂肪酶对动物油脂的水解,受温度影响较大,当温度超过动物油脂的熔点时,脂肪酶对油脂的水解效率显著提高。油脂成分中不饱和脂肪酸越多,越有利于被脂肪酶水解。三种类型的表面活性剂SDS、1231和TX-10对脂肪酶水解不同油脂底物的影响结果相似,即混合乳化体系中表面活性剂浓度在0.2 mg/mL以下时,对脂肪酶水解猪油、牛油和菜籽油均表现出一定的激活作用,而浓度超过0.5 mg/mL则对脂肪酶水解油脂均表现为显著的抑制作用。     

国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的准确测量

本研究以三个氘原子(原子量为2)标记的肌酐为测量所用的内标,建立了血清中肌酐测量的液相色谱-同位素稀释串联质谱法.采用该方法为2种不同浓度的冰冻人血清肌酐标准物质定值,并参加了国际物质量咨询委员会组织的国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的测定.比对结果表明(与比对组织国家美国NIST):对于低浓度样品相对偏差0.3...     

心衰临床诊断标志物-利钠肽标准物质研发的意义

正肽和蛋白类临床诊断标志物的研究在临床化学领域占据重要位置,标志物的检验结果会直接影响医生对疾病的诊断和用药治疗。因此,获得量值准确可靠的检验结果一直是临床化学研究中的核心部分。心肌损伤和心衰疾病严重威胁生命安全。开展早期诊断可以很好指导医生用药,提高生命质     

面向蓄电池的多输入源低功耗充电电路设计

针对蓄电池的储能问题,提出了一种多输入源且可扩充的高效充电电路和相应的控制算法。该充电电路主要由数字控制单元（DCU）、比较器、基于Dickson电荷泵结构的时钟倍压器（CVD）以及模拟开关组成,可以对多个独立能量采集器（EH）进行电能收集。该系统支持通过热插拔方式扩充任意数量的EH。提出的控制算法可以将从各个EH采集到的能量传递到能量储存装置而不会互相干扰。采用0.18 μm CMOS工艺对提出电路进行了具体实现。实验结果显示,相比类似的蓄电池充电系统,该充电电路的功耗最低,只需1.72μW的功耗,能够为三个输入源提供高达96.1%的最大充电效率。     

人血清中C反应蛋白的磁珠富集与质谱检测

采用免疫磁珠富集法,通过结合C反应蛋白单克隆抗体磁珠将血清中C反应蛋白提纯浓缩,用蛋白酶切质谱法对提纯物进行测定。同时对C反应蛋白酶切过程进行优化,提高酶切后肽图覆盖率至86%,选取特征肽段为ESDTSYVSLK。通过质谱定量特征肽段的浓度,得到血清中C反应蛋白的浓度为2.06μg/g。本实验建立血清中C反应蛋白的定量方法,血清中C反应蛋白的质谱定量测定奠定了基础。     

高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱法测定人源瘦素的含量

为准确测定人源瘦素的含量,建立了蛋白水解-高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱（HPLC-IDMS）测定人源瘦素纯品绝对含量的方法,并对人源瘦素蛋白水解时间进行优化。结果表明,人源瘦素中的被测氨基酸在温度为110 ℃,6 mol/L HCl溶液中水解40 h可达平衡。水解样品通过高效液相色谱分离后,使用多反应监测模式（MRM）分别检测脯氨酸m/z 116＞m/z 70（Pro）和 m/z 121＞m/z 74（标记Pro）离子对,缬氨酸m/z 118＞m/z 72（Val）和m/z 123＞m/z 76（标记Val）离子对,亮氨酸m/z 132＞m/z 86（Leu）和m/z 142＞m/z 96（标记Leu）离子对,根据检测结果计算得出人源瘦素纯品的含量为0.582 g/g,扩展不确定度为0.014 g/g（k=2）,这与纯度扣除法测定结果基本一致,标准偏差为4.8%。该方法提高了人源瘦素含量测定的准确度和精密度,使测量结果可溯源至SI单位,为人源瘦素标准物质的研制奠定了基础。     

甲胎蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定

建立了基于特征肽段的甲胎蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。选取3条同位素标记的甲胎蛋白特征肽段作为内标,准确称其质量后与酶切后的甲胎蛋白样品定量混合,采取Phenomenex Kinetex 2.6 μm C18色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式（MRM）测定,并对最优酶切条件、酶切效率以及定值结果的不确定度进行了考察和评定,得到的甲胎蛋白标准物质的最终测量结果为（0.329±0.016）mg/g。