产纳豆激酶菌株液体及固体发酵工艺初步研究

对纳豆菌株ZN-4(Bacillus natto)的液体深层发酵和固体浅盘发酵两种发酵工艺分别进行了初步研究,比较了两种工艺对该菌株产纳豆激酶的影响.结果表明,纳豆菌株ZN-4液体深层发酵的最佳培养基配方为:2%的葡萄糖,1%的大豆蛋白胨,Na2HPO40.6%,NaH2PO40.1%,MgSO40.05%,CaCl20.02%;最佳培养基起始pH为7.0,最佳接种量为3%,最适发酵温度为35℃,最佳发酵时间为56h,在此条件下,摇瓶发酵酶活最高可达到1903U/mL;以无机盐溶液浸泡过夜的优质东北大豆为发酵基料的固体浅盘发酵中,初步研究了不同接种量、发酵温度和发酵时间对该菌株产纳豆激酶的影响,结果表明,纳豆菌株ZN-4固体浅盘发酵的最佳接种量为10%,最适发酵温度为37℃,最佳发酵时间为48h,在此条件下,固体发酵酶活最高可达到2200U/g.     

天蚕素抗菌肽发酵培养基优化

选用抗茵肽生产菌KJ02为出发菌,对其发酵培养基进行了研究并使用正交设计优化了发酵培养基。优化后的培养基：葡萄糖3％,蛋白胨l％,酵母膏2％,NaC10．5％。同时在500L中式水平上对该培养基的效果进行了试验,发酵液杀菌效价为13651IU／mL。     

一株抗白色念珠菌的海洋真菌分离鉴定

从广东湛江海域采集到的海泥中分离真菌并通过抗白色念珠菌活性筛选获得强活性菌株GW08072。通过培养特征、形态特征、显微结构分析及ITS rDNA序列比对等方法对菌株GW08072进行分析鉴定,筛选分离到89株真菌,经复筛重复实验得到抗白色念珠菌活性的菌株6株,经复筛得到的GW08072具有较强的抗白色念珠菌活性,经过遗传稳定性跟踪研究发现该菌抗性能够稳定遗传,经鉴定为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。     

纳豆芽孢杆菌液体发酵条件的优化研究

采用单因素试验和正交实验对筛选出的1株纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)的液体发酵培养基和发酵工艺条件进行了优化.确定了最佳的培养基配方为蔗糖2%、大豆蛋白胨1%、硫酸铵0.5%、Na2HPO40.1%、NaH2PO40.1%、CaCl20.02%、MgSO40.1%;最适发酵条件为发酵温度37℃,初始pH值7.0,最适接种量4%、装液量100mL/500mL、转速200 r/min.进行了50 L发酵罐放大培养,10h达到生长高峰期,最适放罐时间为12h左右,此时所获得的菌体数量约为6.0×1010cfu/mL.     

菌丝霉素在酪丁酸梭菌中的表达研究

目的:构建菌丝霉素(Plectasin,Pt)的真核重组表达菌株,研究其在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的表达和抑菌活性,提供一种高效,天然具有抑菌功能的新型食品添加剂和畜类养殖的抗菌制品。方法:先将启动子thl克隆到载体pMTL82151上,得到表达型质粒pMTL82151-thl,然后根据酪丁酸梭菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后的Pt基因,再将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,构建表达质粒pMTL82151-Pt,并接合转化入酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum),通过甲砜霉素抗性筛选阳性重组子,PCR鉴定,SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得菌丝霉素组成型表达菌株,并进行工程菌酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)pMTL82151-Pt发酵表达研究。结果:thl基因与质粒pMTL82151连接,得到表达型质粒pMTL82151-thl,将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,成功构建表达质粒pMTL82151-Pt。实现了Pt基因在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的组成型表达,SDS-PAGE分析显示,在4.4 kDa处有明显的目的条带。工程菌经发酵表达培养后取上清,对金黄色葡萄球菌ATCC25923的半抑制浓度(half-inhibitory concentration IC₅₀)为12.74 μg/mL。结论:本研究中成功将菌丝霉素在酪丁酸梭菌中表达,为以后大批量生产和推广菌丝霉素作为食品添加剂和肉食类畜牧养殖中抗生素替代品奠定了基础。     

油梨深加工的研究

一系列研究结果表明,油梨很适合与牛乳配合,经过乳酸发酵制成发酵油梨制品。将油梨果肉先于等量热水中热烫,再添加0.05%D-异抗坏血酸钠趁热打浆;预先将含11%全脂乳粉和2%脱脂乳粉的乳液加热至90℃,糖液加热至沸,然后按乳液中最终含8%蔗糖和8%～10%油梨果肉的比例,将糖液、油梨浆和乳液趁热混合搅打1min,5～8MPa均质,85～90℃、1min杀菌,并迅速冷却、接种乳酸菌,42～43℃下发酵4～4.5h,冷藏后熟,可制得色泽明亮(乳黄),滋味协调,口感均匀、细腻,无苦味,品质稳定的油梨酸乳。该工艺巧妙地避开了对油梨的强热处理,解决了防褐变和抑苦味的问题,方法简便易行,为解决油梨加工的瓶颈,带动油梨产业的发展开辟了1条新途径。     

纳他霉素的耐光和耐热性初步研究

在正常情况下,纳他霉素是一种非常稳定的天然食品防腐剂,但高温、紫外线等会影响纳他霉素的稳定性。本文研究了不同的光照和光照时间以及温度对纳他霉素抑菌性的影响,结果表明不同的光照影响较大,其中紫外光照对其抑菌性影响最明显,60min即可完全失去活性,而避光保存对其抑菌性基本无影响;温度对其抑菌性影响也较大,随着温度的增加其抑菌性显著下降,在130℃热处理30min后基本失去了抑菌活性,而在室温下其抑菌性基本不受影响。     

基于遗传算法优化BP神经网络的小球藻生长模型的建立与应用

[目的]探讨用遗传算法优化BP 神经网络对小球藻生长模型的建立与应用.[方法]使用遗传算法对BP 神经网络的权值和阈值进行优化,并使用该网络模型,以小球藻培养时间和残余葡萄糖为输入,菌体光密度值(OD<,680>)为输出,对小球藻在500 L多功能生物反应器中的生长情况进行了建模,还探讨了该模型的应用情况.[结果]经过遗传算法优化的BP 神经网络,其泛化值的误差平方和比BP神经网络的小,因而预测值更加接近实际值.t 检验表明,所建立的模型是可信的.验证表明,该模型具有良好的拟合度,能够很好地描述在500 L 多功能生物反应器中培齐的小球藻的生物量(OD<,680>)与残余葡萄糖和培养时间之间的关系.[结论]所建立的模型可用于试验结果的预测,对小球藻的培养控制具有指导意义.     

耐高温植酸酶毕赤酵母工程菌发酵中试条件优化

本文对植酸酶毕赤酵母基因工程菌PEY-2的发酵条件进行研究,结果表明:其摇瓶最佳产酶条件为诱导时间72h,诱导前适宜增殖时间48 h,接种量10％,种龄24h,诱导初始pH 6.0,生长阶段初始pH 5.5.在此基础上进行了50 L罐的发酵中试,50 L罐诱导产酶量达5.0×103 IU/mL,实现了高密度发酵.热稳定...     

新型环氧化物水解酶产酶菌株的筛选及产酶条件优化

以苄基缩水甘油醚(Benzyl glycidyl ether,BGE)为唯一碳源从土壤中筛选到了8株环氧化物水解酶(Epoxidehydrolase,EH)产酶菌株,其中一株黑曲霉G5对映体选择性很高,能将BGE立体选择性水解,保留(R)-BGE。该菌株产生EH的最佳培养基组成为:蔗糖1.0%、玉米浆2.0%、NaCl 1.0%,初始pH为4.0。250 mL三角瓶装30 mL,120 r/min摇床上30℃培养30h后收集菌体,生物量和ee(Enantiomeric excess,对映体过量)值均达到最高。