猪背最长肌PFK-2/FBPase-2荧光定量RT-PCR方法的建立

为研究糖酵解关键酶果糖-6-磷酸-2激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶（6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-
bisphosphatase,PFK-2/FBPase-2）基因转录水平与宰后肉品质间的关系,根据猪PFK-2/FBPase-2 mRNA序列
（GenBank登录号：NM_001143721.1）设计一对特异性引物并选择β-actin作为内参基因,构建含有各自序列的重组
质粒标准品,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量实时-聚合酶链式反应技术检测猪PFK-2/FBPase-2基因转录
水平的方法。结果表明,所建立的方法线性关系好,目的基因与内参基因R2均大于0.999;灵敏度高,两基因检出
下限均为10 拷贝/μL;特异性好,扩增产物均有特异性单一峰。同时根据标准曲线计算可知目的基因与内参基因的
扩增效率分别为104.5%和104.0%,扩增效率接近一致,可对PFK-2/FBPase-2转录水平进行相对定量。本研究选取
PSE肉产生程度不同的三元杂交猪、杜洛克猪和太湖猪,利用建立的方法对不同品种猪宰后45 min背最长肌中PFK-
2/FBPase-2 mRNA转录水平进行测定,结果表明,太湖猪转录水平最高、杜洛克次之、三元杂交猪最低,且3 个品
种间有显著性差异（P＜0.05）。     

牛肉分级标准及分级技术发展概况综述

我国肉牛业起步较晚,肉质较差,高档牛肉的生产无法满足国内市场日益增长的需求。我国尚未真正实施统一的牛肉等级评价体系,无法形成以质论价、优质优价的优良市场机制,制约我国肉牛产业发展。而肉牛产业发达国家很早就开始推行牛肉分级制度,各自拥有一套适合本国肉牛业发展的牛肉等级评价体系,是各国肉牛产业发展的重要保障。本文在对肉牛业发达国家的牛肉分级标准和先进牛肉自动分级技术进行概述的基础上,针对我国牛肉分级标准和分级技术的研究发展现状,提出适合我国国情的牛肉分级研究及开展分级工作的建议。     

鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白提取及多抗制备

鼠伤寒沙门氏菌是沙门氏菌属常见致病菌,其鞭毛蛋白具有抗原性,可诱导免疫系统产生针对该蛋白的抗体。实验采用直接提取法获得鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白,并以该蛋白为抗原免疫小鼠,制备鞭毛蛋白多抗,使用间接ELISA方法测定多抗的效价和特异性。SDS-PAGE实验结果表明,蛋白条带单一,分子量大小为57ku,说明提取的鞭毛蛋白是目标蛋白且纯度较高;间接ELISA检测结果表明,制备多抗的效价为1∶102400,除与猪霍乱沙门氏菌发生交叉反应外,与其他6种沙门氏菌和6种常见非沙门氏菌属的致病菌均不发生反应,说明该抗体的效价较高,特异性较好,可以用于与磁珠的偶联,为免疫磁珠的制备打下基础。     

高浓度CaCl2溶液对某些肌原纤维蛋白的作用研究

用0、100、200、300mmol/LCaCl2溶液处理肌球蛋白、肌动蛋白和肌原纤维,通过SDS-PAGE和免疫印迹电泳研究100、200、300mmol/L高浓度CaCl2溶液处理下肌球蛋白、肌动蛋白、α-肌动素和肌钙蛋白-T的蛋白降解情况。SDS-PAGE结果显示,肌球蛋白、肌动蛋白在100、200、300mmol/LCaCl2溶液处理下1、7d时的电泳结果与对照组相比没有显著差异。免疫电泳结果显示,100、200、300mmol/L高浓度CaCl2溶液处理后,α-肌动素和肌钙蛋白-T与对照组相比发生显著降解,随着浓度升高,降解程度加大,在300mmol/L浓度时,α-肌动素条带密度显著降低,肌钙蛋白-T也裂解为30kD以下的更小片段。     

HPLC法抽检兽药中利巴韦林的违禁添加情况

建立了兽药制剂中利巴韦林的高效液相色谱测定方法,对兽药制剂中利巴韦林的提取、净化和色谱条件进行了优化。以p H 2.5的水作为溶剂进行超声提取,提取液经C18固相吸附净化,采用高效液相色谱法进行定性和定量分析。在优化条件下,利巴韦林的线性范围为0.1~50.00μg/m L,相关系数R2为0.999 3,检出限为0.017μg/m L。加标水平为10、50、100μg/g时,平均加标回收率73.7%~116.8%。该方法快速、准确、灵敏度高、重复性好,能满足中兽药制剂中利巴韦林含量的检测要求。用该方法对全国12个省份的158种市售兽药样品进行检测,利巴韦林违禁添加总检出为4.3%。     

牛肉等级评定方法和标准

随着我国人民生活水平的提高、膳食结构的改变和国际间合作的不断扩大 ,对牛肉的需求量正不断增加 ,牛肉品质受到了前所未有的重视。由于我国肉牛业起步较晚 ,肉牛行业在诸多方面与发达国家相比还有较大的差距 ,其中一个主要方面就是我国尚无统一的牛肉系统评定方法和标准 ,这使得牛肉生产者、经营者和消费者对牛肉的质量不能达成共识 ,市场运行不够规范 ,很难形成优质优价 ,从而影响了国内牛肉的生产和对外贸易的发展。世界发达国家均有自己牛肉质量系统评定方法和标准 ,美国早在 1916年就完成了肉牛胴体标准 ,192 7年首次建立了政府分级体…     

大理石花纹、生理成熟度对牛肉品质的影响

依据我国农业行业标准《牛肉质量等级》,对不同大理石花纹和不同生理成熟度的牛肉品质进行试验分析,研究显示,大理石花纹对蒸煮损失有显著影响(p<0.05),对pH和剪切力值无显著影响,大理石花纹越丰富,蒸煮损失越小;生理成熟度对pH和蒸煮损失有显著影响(p<0.05),对剪切力值有较为显著影响(p<0.1),且随着生理成熟度的变老,即牛龄增加,牛肉的蒸煮损失和剪切力值呈增大趋势。     

南京军区总医院污水处理站改建工程实例

南京军区总医院污水处理站改建工程结合实际情况与新标准中的相应规定，将病区污水进行分类收集处理，重点强化了对污泥和废气的处理；工程采用P型破碎机、ECOLO除臭等先进技术设备，达到了设计要求。在该工程的基础上分析了新标准的特点，并指出污水分类收集、废气处理以及双排放标准将成为今后工程设计中新的要点。     

抗病毒药物利巴韦林检测技术的研究进展

利巴韦林作为广谱抗病毒药物,是多年来用于治疗病毒性感染疾病的首选药,也是农业部明令禁止在畜禽养殖中使用的禁用药,对其各种检测方法应引起足够重视。综述了抗病毒药物利巴韦林及残留的检测技术研究进展,同时根据利巴韦林代谢的研究对其在动物源产品中的检测方法进行了展望。     

肠炎沙门氏菌EMA-PCR检测方法的建立

将荧光染料叠氮溴化乙锭（ethidium monoazide,EMA）与聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测技术相结合,用于肠炎沙门氏菌活菌的检测。实验参数优化结果表明,当EMA终质量浓度50 μg/mL、曝光时间10 min时,可以抑制约107 CFU/mL肠炎沙门氏菌死菌DNA的扩增;活菌灵敏度检测结果显示,EMA-PCR方法检测限与单一PCR方法一样均为27.5 CFU/mL,说明EMA处理既不会影响活菌DNA的扩增也不会影响PCR方法的灵敏度。利用EMA-PCR方法检测死活混合菌液时发现,添加EMA的实验组DNA条带亮度会随着活菌比例的降低而变暗,且当样品中全是死菌时,没有目标条带出现;而不添加EMA的对照组DNA条带亮度没有变化,当样品中全是死菌时,目标条带依然清晰可见。说明添加EMA可以达到区分死活菌的目的,EMA-PCR方法只检测样品中的活菌,避免了死菌DNA造成假阳性的可能性。