大豆异黄酮苷元的提取及其抗血浆脂蛋白氧化作用

从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元,并对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白氧化作用进行了实验研究.12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂蛋白过氧化程度及氧化易感性的变化.结果表明,大豆异黄酮苷元食用后受试者血浆VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低;在体外进行氧化修饰时,LDL氧化延滞时间明显延长,LDL氧化易感性下降.大豆异黄酮苷元可增强血浆抗氧化能力,尤其增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治心血管疾病的积极作用.     

揄干离褶伞菌丝体溶栓酶特性研究

探讨各种因子对榆干离褶伞溶栓酶活性的影响,观察溶栓酶对纤维蛋白及纤维蛋白原的水解特征和酰胺水解活性.实验结果表明,该酶的最适pH为6,最适温度为35℃,并对tPA底物S-2288最敏感.Mn2 和Mg2 激活酶活性,而Cu2 、EDTA对酶活有抑制作用.该酶不仅直接水解纤维蛋白,还可以水解纤维蛋白原.因此,榆干离褶伞溶栓酶很有可能成为治疗和预防血栓栓塞性疾病的新来源.     

花脸蘑多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究花脸蘑多糖对四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤的保护作用。方法:用CCl4建立小鼠急性化学性肝损伤模型,检测花脸蘑多糖对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及白蛋白(Alb)含量、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量的影响。结果:花脸蘑多糖明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT及AST活性,提高Alb含量及肝组织SOD、GSH-Px活力和GSH含量,并显著降低MDA含量。结论:花脸蘑多糖具有一定的肝保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

榆干离褶伞溶栓酶对内皮细胞损伤大鼠模型的保护作用

目的探讨榆干离褶伞溶栓酶对肾上腺素致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法采用注射肾上腺素结合冰浴的方法制备大鼠血管内皮细胞损伤模型,检测血液循环内皮细胞数(CEC)和血浆血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素E_(1α)(6-keto-PGE_(1α))、组织纤溶酶原激活物(t-PA)以及抗凝酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的含量。结果模型组的CEC和TXB_2水平较正常组明显增高,且t-PA和AT-Ⅲ含量下降。用药组可减少CEC和TXB_2水平,提高6-keto-PGE_(1α)、t-PA和AT-Ⅲ含量。结论榆干离褶伞溶栓酶对血管内皮细胞起保护作用。     

榆干离褶伞溶栓酶对大鼠动脉血栓的抑制作用

目的：研究榆干离褶伞溶栓酶（Lyophyllum ulmarium fibrinolytic enzyme,LUFE）对大鼠动脉血栓形成的抑制作用及其机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组和LUFE低、高剂量组,除假手术组以外,其余4 组均以三氯化铁建立颈动脉血栓模型。造模前阳性对照组和LUFE低、高剂量组分别以10 mg/kg mb阿司匹林以及100、400 mg/kg mb LUFE灌胃7 d。观察血栓质量和颈动脉血管组织病理变化;酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、血小板活化因子（platelet-activating factor,PAF）、可溶性血栓调节蛋白（soluble thrombomodulin,sTM）、E-选择素和组织因子（tissue factor,TF）水平;流式细胞仪检测血小板CD62P表达水平。为观察LUFE对血小板功能的影响,在体外以胶原诱导血小板活化,观察LUFE对大鼠富血小板血浆中P-选择素、β-血小板球蛋白（β-thromboglobulin,β-TG）和血小板膜糖蛋白IIbIIIa（glycoprotein IIbIIIa,GPIIbIIIa）水平的影响;Western blot方法观察LUFE对大鼠血小板磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）表达水平的影响。结果：LUFE能明显减轻血栓质量和血管受损程度,抑制血栓模型大鼠血清sTM、E-选择素、TF、TNF-α、IL-6和PAF水平的上调,下调血小板CD62P的表达。同时,在体外LUFE能够下调胶原诱导的富血小板血浆中P-选择素、β-TG和GPIIbIIIa水平,下调血小板PI3K、Akt和p38 MAPK蛋白的磷酸化水平。结论：LUFE具有抗血栓作用,其机制可能与LUFE对血管内皮细胞的保护作用以及对血小板活化的抑制作用有关。     

榆干离褶伞发酵液体外抗氧化性能研究

目的:研究榆干离褶伞发酵液的体外抗氧化作用。方法:利用比色法测定榆干离褶伞发酵液对羟基自由基.OH、H2O2、二苯基苦味酰基苯肼(DPPH)的清除能力和红细胞自氧化溶血的影响以及H2O2诱导的肝损伤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果:榆干离褶伞发酵液具有清除.OH、H2O2和DPPH自由基能力,降低红细胞溶血率,提高肝组织SOD、GSH-Px、CAT活性并抑制肝组织MDA的生成。结论:榆干离褶伞发酵液具有体外抗氧化作用。     

猴头菌多糖对小鼠H22 肝癌移植瘤的抑制作用

目的：观察猴头菌多糖对小鼠移植性实体瘤H22的影响,并初步探讨其作用机制。方法：将H22瘤株接种于小鼠,制备移植性实体瘤模型。将70只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、猴头菌多糖低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg,以体质量计),正常组10只,其余各组12只,连续灌胃10d。阳性对照组以20mg/kg隔日腹腔注射环磷酰胺,末次给药后次日处死,计算肿瘤抑制率、胸腺及脾脏指数,检测荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平;测定白细胞数和白蛋白含量。结果：不同剂量的猴头菌多糖抑瘤率均高于26%,显著提高胸腺指数,提高血中TNF-α和IL-2的水平,降低实体瘤组织VEGF的水平;不同程度的提高白蛋白水平;猴头菌多糖组白细胞数与模型组比较无明显差异,显著高于阳性对照组。结论：猴头菌多糖对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其机制可能是通过调节免疫功能和抑制肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

榆干离褶伞溶栓酶对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的：探讨榆干离褶伞（Lyophyllum ulmarium,L.u）溶栓酶对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞（humanumbilical vein endothelial cell,HUVEC）损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导HUVEC氧化损伤,采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法观察细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞线粒体跨膜电位（ΔΨm）和总活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;Western blotting法检测Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3等蛋白的表达水平。结果：L.u溶栓酶可显著提高HUVEC的存活率,明显抑制H2O2诱导的细胞内ROS生成和线粒体跨膜电位的下降,并能降低Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的表达水平。结论：L.u溶栓酶对氧化应激损伤的HUVEC有保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

薰衣草精油对HepG2细胞的抗增殖作用研究

研究了薰衣草精油对HepG2细胞的生长抑制作用.用溴化二苯偶氮盐(MTT)法观察薰衣草精油和20％的薰衣草精油含药血清对HepG2的生长抑制作用;HE染色法观察薰衣草精油对HepG2细胞形态学的影响;流式细胞术检测薰衣草精油对HepG2细胞凋亡的影响.结果:薰衣草精油明显抑制HepG2细胞的增殖,并呈浓度依赖性;20％的薰衣草精油血清对HepG2细胞的抑制率与5-氟尿嘧啶血清相比无显著性差异;薰衣草精油处理HepG2后细胞数及体积减少,胞浆和细胞核浓缩;不同质量浓度的薰衣草精油作用HepG2后出现明显的凋亡细胞群及坏死细胞.结果表明,薰衣草精油可以通过诱导细胞凋亡或坏死的方式抑制HepG2细胞的生长.     

榆干离褶伞菌丝体中溶栓酶的分离纯化

采用离子交换层析、凝胶过滤层析及快速蛋白液相色谱等蛋白质分离纯化技术,从榆干离褶伞菌丝体中分离纯化了一种溶栓酶。实验结果表明,其分子量约为50ku,比活性为750.6Unit/mg,活性得率为12.5%。榆干离褶伞很有潜力成为治疗血栓的新的药物来源。