重力下落双“V”型爪苹果采摘器的研制

市面上的苹果采摘器种类繁多,且被广泛使用。现针对市面上采摘器所存在的不足,以实现高效、省力、降低成本为目的,设计了一种无需电机,以重力下落代替人工取果,双"V"型爪进行采摘,其杆子部分可进行拼接,可适应不同高度的苹果树的苹果采摘器。     

基于ELISA克罗诺杆菌单链抗体制备与鉴定

利用基因工程技术制备克罗诺杆菌特异性单链抗体(sc Fv)。从克罗诺杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,利用RT-PCR反转录合成第一链c DNA后再扩增出抗体的重链可变区(VH)和轻链变区(VL)基因片段,采用重叠延伸PCR的方法,用柔性多肽Linker接头(Gly4Ser)3将VH基因和VL基因拼接成sc Fv基因片段,XhoⅠ﹑Eco RⅠ限制性内切酶双酶切sc Fv后克隆到原核表达载体p ET-26b中构建重组质粒sc Fv-pet-26b,挑取阳性克隆提取重组质粒后转入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,通过His柱进行亲和层析,最后利用ELISA检测单链抗体的活性。成功构建了表达克罗诺杆菌单链抗体的基因工程菌株,通过SDS-PAGE和ELISA试验结果表明,诱导表达的罗诺杆菌单链抗体分子量约为30 k Da,其能与罗诺杆菌特异性结合,可作为免疫检测罗诺杆菌的候选抗体分子。     

分散固相萃取结合HPLC法测定张杂谷中新烟碱类杀虫剂的残留

[目的]研究适合谷子中8种新烟碱类杀虫剂的多残留快速检测方法。[方法]试验以乙腈为提取溶剂,PSA、GCB和C18吸附剂净化,0.3%甲酸水-乙腈梯度洗脱,基质匹配标准曲线外标法定量。[结果]在0.01~2.4 mg/L水平范围内,不同基质中的新烟碱类药剂线性相关系数均大于0.991,在0.05、0.20、0.8 mg/kg添加水平下,谷米、谷糠中新烟碱类杀虫剂的平均回收率为75%~105%,RSD为1.9%~14.4%。[结论]分散固相萃取-高效液相检测方法简便、快速、准确、灵敏、节省样品和有机溶剂,可满足谷米和谷糠中8种新烟碱类杀虫剂残留检测的需要。     

离子液体涡旋辅助/表面活性剂乳化-液相微萃取测定牛奶中的三嗪类和苯基脲类除草剂

建立了基于离子液体涡旋辅助/表面活性剂乳化-液相微萃取高效液相色谱测定牛奶中的三嗪类和苯基脲类除草剂残留分析方法。将1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体作为提取剂,离子液体在涡旋辅助作用下分散于牛奶溶液中,同时应用表面活性剂作为乳化剂,加速分析物从水相到离子液体的传质速率,防止离心时离子液体附着于管壁。使用醋酸和硫酸钠去除牛奶中的脂肪和蛋白质,减少对分析物的提取干扰。同时考查了离子液体的种类和体积,表面活性剂的种类和体积,涡旋提取时间,离子对浓度和样品p H值对萃取效率的影响。在优化实验条件下,1~400μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9963~0.9998;最小检出限和定量限以最小提取浓度的3倍和10倍信噪比计算分别为0.018~0.095μg/L和0.10~0.38μg/L。使用该方法进行了低脂牛奶、高压消毒牛奶、纯牛奶和鲜牛奶中6种分析物的检测,同时进行3个不同浓度的添加回收实验,回收率为70.34~100.02%,RSD为2.06~9.95%。     

恩诺沙星抗体免疫检测及其分子识别机制研究

兽药恩诺沙星对人体具有较强的毒副作用,检测恩诺沙星残留对保障食品安全具有重要的作用。本研究将恩诺沙星与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物注射免疫BALB/c小鼠制备恩诺沙星单克隆抗体,并建立基于单克隆抗体的酶联免疫法检测样品羊奶中恩诺沙星的方法。将筛选出的杂交瘤细胞注射小鼠提取腹水,并以此单克隆抗体建立直接竞争ELISA方法。其半数抑制率(IC50)为0.71±0.05 ng/m L,最低检测限(IC15)为0.04±0.02 ng/m L。检测羊奶样品含恩诺沙星在10~200 ng/m L时回收率为96.56~105.10%,且与HPLC法检测呈良好线性关系(R2=0.9998)。最后利用计算机生物信息学构建恩诺沙星抗体的可变区三维结构并与抗原进行分子对接。结果显示Arg98、Asp99、Gly101、Thr50、Ser51、Ala82、Tyr85等氨基酸残基在抗体抗原识别过程中起关键作用。这些信息对今后抗体结构修饰具有理论指导意义。