125I-TOC和125I-F-PGA放射化学纯度的测定

为比较3种测定¹²⁵I标记的奥曲肽（TOC）和叶酸-青霉素酰化酶复合物（F-PGA）的放射化学纯度（RCP）的方法是否具有一致性，采用Iodogen法对TOC和F-PGA进行放射性碘标记，并用高效液相色谱法（HPLC）、三氯醋酸（TCA）沉淀法和纸层析法测定标记物的放射化学纯度（RCP），其中TCA沉淀法设4种蛋白浓度以观察其对RCP测定的影响。结果表明，HPLC和纸层析法均能有效分离标记物和游离碘，且HPLC测定这种标记物的RCP最为精确可信。在TCA沉淀法中，用0.2%的小牛血清白蛋白（BSA）测得的RCP最低,而用其它3个BSA浓度测得的RCP则无明显差异（P＞0.05）；当RCP＜10%时，TCA沉淀法与纸层析法测得的RCP间无明显差异（P＞0.05），而要高于HPLC（P＜0.01）；当RCP＞10%时，对¹²⁵I-TOC而言，TCA沉淀法要略低于HPLC和纸层析（P＜0.05），但后2种方法无明显差异（P＞0.05），且对¹²⁵I-F-PGA而言，3种方法无明显差异（P＞0.05）。3种方法两两之间显著相关（r=0.996～0.999，P＜0.001）。     

Annexin V的125I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了^125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况.标记结果显示,^125I-Annexin V 标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好.生物分布结果显示,^125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收^125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降.表明^125I-Annexin V 适合用作核医学诊断试剂.     

低剂量率γ射线杀伤肿瘤细胞机制的实验研究

用60Co源以1Gy/min剂量率照射Hela细胞,剂量分别为1、2、5、10、15Gy.用AnnexinV和PI双染法观察凋亡细胞形态;DNA梯形条带证实凋亡存在;克隆形成分析细胞增殖能力.结果显示:(1)Hela细胞凋亡率随照射剂量和时间的增加呈上升趋势,照射后168h组各剂量点凋亡率高于其他各时间组.2Gy以下时凋亡率改变不大,达5Gy时凋亡率显著增加,且达峰值(72.57±2.04)%(P＜0.001).(2)早期凋亡细胞,PS外翻,胞膜呈绿色荧光圈.凋亡晚期出现Annexin V-FITC及PI染色均阳性的外绿内红的细胞图像.坏死细胞则为红色.(3)凋亡细胞碎片呈"梯状"条带.(4)1Gy/min的剂量率照射,剂量为2-15Gy,克隆形成率由(58.95±0.36)%降至(1.67±0.35)%(P＜0.001).表明低剂量率γ射线照射可诱导Hela细胞凋亡,其凋亡率与照射剂量相关,在5Gy时凋亡率最高.     

叶酸-青霉素G酰化酶对SKOV3实体肿瘤靶向性的实验研究

采用Iodogen法对叶酸-青霉素G酰化酶(Folate-conjugated Penicillin G Amidase,F-PGA)和PGA进行125I标记。将纯化后的标记物由尾静脉注入荷SKOV3实体瘤裸鼠体内,观察F-PGA对叶酸受体阳性的SKOV3的靶向性。结果显示:标记产品纯化后放化纯度>95%,且体内外稳定性较好;荷SKOV3肿瘤的裸鼠注射125I-F-PGA后4~24 h肿瘤显像较清晰,而注射125I-PGA组所有时相均未见明显的肿瘤部位放射性浓聚影;125I-F-PGA组的肿瘤与健侧肌肉的摄取比值(T/M)明显高于对照组(F=13.38,P=0.014 6),且在非靶组织中清除较快。表明F-PGA在荷瘤鼠体内能特异性地与叶酸受体阳性的SKOV3实体肿瘤进行靶向结合,其T/NT>1,有望用于靶向治疗。     

~(60)Coγ射线对伴刀豆球蛋白(Con A)和脂多糖(LPS)诱导的淋巴细胞的效应

应用~3H-TdR掺入法研先Con A和LPS诱导后的淋巴细胞亚群的辐射效应及其相互关系。体外实验说明Con A细胞具有激活LPS对B细胞的诱导作用。当Con A细胞受10Gy照射后~3H—TdR掺入明显下降,并失去激活作用。LPS细胞受照不能被正常Con A细胞所激活。两种细胞受照后混合培养出现Con A细胞对LPS细胞的抑制作用。应用琼脂扩散盒培养法反映辐射对两种细胞的效应更明显。 8例鼻咽癌病人接受一个疗程的~(60)Co γ线治疗后,其Con A细胞的掺入显著下降,失去激活B细胞的作用。LPS细胞不能被正常Con A细胞所激活。本实验提示Con A细胞的辐射敏感性比LPS细胞高。     

ConA诱导CD_4~ 和CD_8~ 细胞的调节功能和辐射效应的研究

使用单克隆抗体CD_4和CD_8,采用Panning法分离并获得B,CD_4~ 和CD_8~ 细胞亚群。间接免疫荧光试验鉴定获得的细胞纯度分别是82.7％,90.4％和90.8％;台盼蓝拒染法测定细胞活性,三者均达92％以上。~3H-TdR掺入法比较ConA激活的CD_4~ 和CD_8~ 细胞的辐射敏感性,发现两种细胞都含有辐射敏感和抗性两个组分,在辐射敏感成分中,两者的辐射敏感性相同,而在辐射抗性成分中,ConA CD_4~ 细胞更不敏感。用LPS诱导的B淋巴细胞,ConA诱导的CD_4~ ,CD_8~ 细胞,以及经过10Gy~(60)Coγ射线颜射的ConA诱导的CD_4~ 和CD_8~ 细胞,进行匹配分组培养,~3H-TdR掺入法观察ConA CD_4~ 、ConA CD_8~ 细胞的抑制功能及其辐射效应。发现ConA CD_4~ 和ConA CD_8~ 细胞都有抑制LPS诱导的B淋巴细胞转化的功能,照射对两者的抑制功能没有影响。ConA CD_4~ 细胞可以增强ConA CD_8~ 细胞的抑制功能;反之,ConA CD_8~ 细胞也可以增强ConA CD_4~ 细胞的抑制功能,照射使两者的增强效应消失。     

压阻式触觉传感器对法向力和剪切力的检测

灵活的触觉传感器应该具有像皮肤一样的功能,能够检测施加力的大小和方向.改进的压阻式触觉传感器,主要由中心芯和4个侧壁组成,法向力和剪切力的感测元件不同.将压阻式触觉传感器嵌入到一个聚二甲基硅氧烷(PDMS)弹性体中,以实现力的柔性检测.通过仿真分析,得到此种触觉传感器对法向力的检测范围为600 Pa~65 kPa,可测得的最小剪切力为900 Pa.通过进一步分析,得到施加法向力和剪切力时法向力感测元件阻值的变化曲线,可得此种触觉传感器能够有效降低法向力感测元件与剪切力感测元件之间的干扰.所开发的触觉传感器可以灵活检测施加的法向力和剪切力,可应用于机器人手臂和假肢上.     

125I标记紫杉醇的方法

摘要:采用改良的氯胺T法,先用稳定的NaI与紫杉醇作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇(paclitaxel),建立了125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后放射化学纯度,采用纸层析测定标记产物在不同温度、储存溶剂条件下的体外稳定性,红外光谱鉴定产物。改良Ch-T法所得标记产物的标记率与硝酸氧化法和传统氯胺T法相比较。结果显示,采用改良氯胺T法标记率约63.1%±5.7%,放射化学纯度约96.3%±1.3%;标记物储存于4℃生理盐水或乙醇储存体系中24h、120h,放化纯度分别＞95%和约90%;在血浆中稳定性也较好,在4℃ 、37℃放置24h,放化纯度分别为92.3%±0.4%、89.5%±0.6% 。以上结果表明,改良氯胺T法标记紫杉醇方法简便,标记率高,标记产物稳定性较好,能够满足放射性示踪实验的要求。     

刀豆蛋白A诱导的CD_4~+和CD_8~+细胞调节功能及其辐射效应的研究

使用单克隆抗体CD_4和CD_5,采用Panning法分离并获得B、CD_4~+和CD_8~+细胞亚群,间接免疫荧光试验鉴定获得的细胞纯度分别是82.7％、90.4％和90.8％;台盼蓝拒染法测定细胞活性,三者均达92％以上。用LPS诱导的B淋巴细胞,刀豆蛋白A(ConA)诱导的CD_4~+、CD_8~+细胞,以及经过10Gy ~(60)Co γ线照射的ConA诱导的CD_4~+和CD_8~+细胞,进行匹配分组培养,~3HTdR参入法观察ConA CD_4~+和ConA CD_8~+细胞的抑制功能及其辐射效应。发现ConA CD_4~+和ConA CD_8~+细胞都有抑制LPS诱导的B淋巴细胞转化的功能,10Gy的γ射线照射对两者的抑制功能没有影响。ConA CD_4~+细胞可以增强ConA CD_8~+细胞的抑制功能;反之,ConA CD_8~+细胞也可以增强ConA CD_4~+细胞的抑制功能;10Gy γ射线照射使两者的增强效应消失。     

123I-Annexin V在人体内的辐射吸收剂量估算

为估算123I-AnnexinV在人体内的辐射吸收剂量并评价其安全性,用125I-AnnexinV作为示踪剂,测定放射性碘标记的AnnexinV在小鼠体内各脏器放射性分布并换算至标准人体内分布数据。按国际通用的由美国核医学会医学内照射吸收剂量委员会(Medicalinternalradiationdosecommittee,MIRD)提出的方法,将其输入Mirdose-3软件,估算人体内123I-AnnexinV辐射吸收剂量。实验结果表明,肝脏和肾脏是辐射吸收剂量最大的器官,其吸收剂量别为2.77×10-3mGy/MBq和2.71×10-3mGy/MBq,红骨髓内照射吸收剂量最低,约为1.78×10-5mGy/MBq,其它脏器的内照射吸收剂量在1.5×10-4mGy/MBq―10.5×10-4mGy/MBq之间,有效剂量当量(Effectivedoseequivalent,EDE)为5.55×10-4mSv/MBq。这为临床安全应用123I-AnnexinV提供了参考资料。