伽马射线辐射结合亚硝基胍诱变选育他克莫司高产菌株

为了选育稳定高产的他克莫司菌株,提高发酵水平,对他克莫司出发菌株采用450 Gy剂量的~(60)Coγ辐射诱变及3 mg/mL亚硝基胍(NTG)处理30 min诱变,并分别结合链霉素和庆大霉素进行抗性筛选。经选育获得一株高产、遗传稳定的他克莫司突变株FIM-17-17,该菌株的摇瓶发酵水平较出发菌株提高了65%。考察该突变株的稳定性,及树脂AB-8、D101、HT60、XAD16、HP20和XDA-8对发酵水平的影响,并在容量1 t的发酵罐进行中试发酵验证。结果表明,突变株FIM-17-17遗传稳定,且在发酵培养基中添加2%的D101树脂后,发酵水平又提高了29.8%,发酵罐中试发酵水平平均达1 319μg/mL。结果提示,利用~(60)Coγ射线辐射和NTG复合诱变能有效获得他克莫司高产菌株。     

响应面法优化子囊霉素发酵工艺

采用响应面法对子囊霉素的发酵培养基及发酵条件进行优化.通过Plackett-Burman设计(PBD)筛选影响子囊霉素产量的关键变量,通过最陡爬坡实验确定响应面分析中心点,再进一步通过中心组合设计(CCD)与响应面分析获得关键变量的最优值.结果表明,影响子囊霉素产量的关键变量糊精、黄豆粉和发酵时间的最优值分别为75g·...     

辐射诱变结合抗自身产物选育替考拉宁高产菌株

采用~(60)Co γ-射线辐射结合抗性筛选技术,对替考拉宁产生菌替考游动放线菌FIM-16的孢子进行诱变处理,以替考拉宁自身抗性作为选择压力,并通过摇瓶发酵对抗性基因突变株进行筛选。结果获得一株摇瓶发酵水平较出发菌株FIM-16提高两倍的高产菌FIM-16-58,且遗传性状相对稳定,菌种传3代发酵水平无明显影响,菌种斜面在4°C稳定保藏两个月;其在1 T发酵罐上发酵,添加0.1%的玉米油可有效抑制泡沫的产生,替考拉宁产量达5.0 g/L以上。