辽宁省鸡源空肠弯曲菌耐药性监测与分析

目的了解辽宁省内鸡源空肠弯曲杆菌耐药性情况。方法采用特异性选择培养基分离出空肠弯曲菌,并使用生化反应和分子生物学方法双重方法进行鉴定,并进行耐药性分析。结果采集的辽宁省某屠宰场的鸡盲肠共198份样品,分离鉴定得到60株空肠弯曲菌,分离率为30.3%。同时对60株空肠弯曲菌进行了药物敏感性检测。结论 60株空肠弯曲菌几乎均对红霉素、庆大霉素、克林霉素和萘啶酸耐药,其MIC90值均高于所测试的最高药物浓度。空肠弯曲杆菌氟苯尼考和泰利霉素的敏感性最强。     

微生物添加剂中枯草芽孢杆菌的测量不确定度评估体系建立

目的:研究旨在实验室环境条件下建立微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌活性成分检测方法的评价体系并使用该方法进行测定.方法:本实验依据现行通用标准GB/T 26428—2010、JJF1059.1—2012和RB/T 151—2016,进行了微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌中活性成分的菌落总数不确定度考察.结果:创建了微生物饲...     

利用多重PCR-RFLP同时检测羊肉及掺杂其中的肉类

以纯羊肉为原料,按2%、5%和10%的重量比在羊肉中掺杂鸡肉、猪肉和鼠肉,通过基因组DNA提取试剂盒法提取DNA,利用多重多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)及限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)分析同时检测羊肉及掺杂其中的其他肉类。结果表明,通过多重PCR扩增,可以有效的检测出纯羊肉及其掺杂的鸡肉、猪肉和鼠肉,检出限为2%。     

生鲜乳中β-内酰胺酶微生物法检测

目前对生鲜乳中β-内酰胺酶的检测方法主要有高效液相色谱法和微生物检测法(杯碟法)。其中微生物检测法准确率较高,适于具有微生物检测能力的检验机构使用。本文针对微生物检测法中涉及的一些技术问题及注意事项进行整理和分析,便于相关检验人员借鉴参考。     

利用复式PCR检测牛奶中掺杂的大豆源性成分

以纯牛奶为原料,按不同浓度在牛奶中掺杂大豆,通过热解法、基因组DNA提取试剂盒法、异硫氰酸胍法及热解-异硫氰酸胍联用法提取DNA,利用复式PCR技术同时检测牛奶及大豆源性成分。结果表明,通过热解-异硫氰酸胍联用法提取得到的牛奶和大豆基因组含量最高,利用两对引物进行复式PCR扩增,可以有效的检测出牛奶及其掺杂的大豆源性物质,并将两者区分开来。     

利用多重PCR方法检测牛肉中的掺假肉

应用多重PCR方法鉴别牛肉中掺杂其他肉类。通过查阅相关文献,确定牛肉、猪肉、鸡肉、鼠肉的特异性片段设计引物。牛肉样品通过基因提取试剂盒提取组织DNA,然后加入相应特异性牛肉、猪肉、鸡肉、鼠肉引物和反应试剂,采用多重PCR法同时检测牛肉中掺杂鸡肉、猪肉、鼠肉任意三种肉类混合样品。试验建立的复式PCR方法特异性强,操作简便,对于牛肉中掺杂鸡肉、猪肉、鼠肉的检出限均达到1%(W/W)掺杂量。     

动物源弯曲菌分离纯化鉴定方法优化

【目的】弯曲菌是重要的食源性人畜共患病原菌,通常难以诊断,而动物源方向缺少系统的检测分析方法及相应的优化。为了获得更适宜分离动物来源的空肠弯曲菌和结肠弯曲菌,提高分离效率,降低分离成本,特开展方法优化,填补动物源弯曲菌分离方法建设的空白,为耐药菌株的有效追踪溯源和风险评估提供依据。【方法】对已有的空肠弯曲菌和结肠弯曲菌分离纯化鉴定方法Preston肉汤和Bolton肉汤增菌;CCDA选择性培养分离、弯曲菌显色培养分离、Skirrow选择性培养分离;生化鉴定和分子生物学鉴定做了筛选优化,针对目前存在的分离纯化和鉴定方法进行了调查比较,得到了更适合于健康动物来源的粪便和盲肠中的分离方法。【结果】牛血清预增菌、CCDA选择性分离、弯曲菌显色培养基纯化、哥伦比亚血琼脂进行扩增及分子学方法鉴定,同时建议采用厌氧条件进行培养。该流程简单易行,成本较低,适合于绝大多数实验环境条件,是获取弯曲菌的首选流程,便于推广实施。【结论】通过将现研究阶段存在的大多数检测方法进行了综合分析,整理出一套针对于动物来源的粪便及肠道内容物的检测分析方法,对健康动物中弯曲菌的分离效率能够提高30%,同时空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的分离效率无明显差异。