氨基树脂表面活化提高固定化核酸酶P1连续催化性能

考察了固定化酶常用载体-氨基树脂几何结构及表面活化过程对固定化核酸酶P₁性能的影响,并进行了动力学和连续催化稳定性研究。FESEM、BET及FTIR等表征发现,氨基树脂具有大量酶可利用的孔,在固定化过程中核酸酶P₁主要利用的孔径范围为4～30 nm。相对游离的核酸酶P₁而言,所得固定酶耐酸、耐热性增强;米氏动力学研究表明各组固定酶对底物的亲和力下降,最大反应速率下降;后交联组的重复利用性相对物理吸附、化学交联组明显增强。优化的固定化条件为：酶和载体比例为3：20（质量比）,酶浓度为0.8 g·L^-1,酶液pH为6.0,固定时间为10 h,在优化条件下所得固定酶的单位载体酶活为10013 U·g^-1。同时设计及优化柱连续反应器操作条件,确定反应温度为65℃,进料流量为0.75 ml·min^-1,使得产品的核苷酸浓度维持30 g·L^-1（水解率为60%）以上的累计时长达120 h,有利于核酸酶P₁连续生产核苷酸的工业化应用。     

基于发酵吸附分离耦合制备生物乙醇的研究进展

原位产物分离技术可以解除发酵过程中产生的乙醇对酵母细胞生长的抑制作用。与传统蒸馏相比,原位产物分离可以极大地降低乙醇的分离能耗。分析和评述了乙醇发酵与吸附分离耦合工艺中涉及的吸附剂类型（如沸石、硅质岩、活性炭、树脂及生物质吸附剂等）,脱附方法（如常规热脱附、微波辐照脱附）和耦合模式（如原位耦合模式、异位耦合模式）。提出今后的研究重点在于开发出优良的吸附剂和选择合适的脱附方法。     

葡萄糖-6-磷酸和果糖-6-磷酸的酶法测定

在血液、发酵液或组织液中加入磷酸葡萄糖异构酶（ＰＧＩ，ＥＣ．５．３．１．９）、６－磷酸葡萄糖脱氢酶（ＧＤＨ，ＥＣ．１．１．１．４．９）及还原型辅酶Ⅱ（β－ＮＡＤＰ），利用快速、准确的酶法检测Ｄ－６－磷酸葡萄糖和Ｄ－６－磷酸果糖浓度。对该法的专一性、精确性、准确性以及误差来源及消除方法作了讨论。对其它物质的分析作了探讨     

固相合成胸腺五肽的分离与纯化

胸腺五肽(TP5)是一种很有发展前景的药物,具有胸腺素的全部生理功能。固相合成法是胸腺五肽生产的主流技术,目前,对固相合成的五肽一般采用反相色谱技术纯化,但效率低、成本高,仅限于小规模制备。实验采用离子交换法纯化,并进行了方案优化,发现在pH4 4醋酸盐缓冲液平衡、盐梯度洗脱条件下纯化TP5,一步分离纯度可达98 23%。该法可以满足大规模制备的要求,且成本很低。     

茶袋法固相合成胸腺五肽肽库

利用组合化学技术,采用简便的茶袋法固相合成制备胸腺五肽D型氨基酸取代类似物肽库,共合成32条肽。粗肽得率平均在54%左右。通过高效液相色谱分离得到纯肽,经质谱及HPLC分析,所制类似物相对分子质量与胸腺五肽一致,精制后的肽得率平均在36%左右。     

5’-单磷酸腺苷在乙醇-水中介稳区性质研究

针对5’-单磷酸腺苷(5’-AMP)在溶析结晶中易出现爆发结晶的问题,分别采用静态法和激光法测定了293—323 K下5’-AMP在纯水以及溶剂体积比为0.3—2.0的乙醇-水体系中的溶解度和超溶解度,以指数经验关联式建立了超溶解度关联式,并在试验条件下考察了温度、乙醇流速、pH值和搅拌速率对介稳区宽度的影响。运用中心复合设计预测了5’-AMP在本溶析结晶体系中介稳区间,并用扫描电镜观察了5’-AMP在结晶条件优化前后晶体形态的变化情况,为工业生产中提高结晶产品质量提供了理论指导。     

离子交换树脂吸附TP5的热力学和动力学研究

针对凝胶型阳离子交换树脂对TP5的吸附行为,研究了间歇反应中TP5水溶液的吸附热力学与动力学特性。热力学研究表明,TP5在所用树脂上的吸附平衡数据符合Langmu ir吸附等温方程。在283.15~303.15 K之间,TP5的质量浓度在10 g/L时,离子交换树脂对TP5的吸附过程可分两个阶段,第一阶段受液膜扩散控制,第二阶段主要吸附过程受颗粒扩散的控制。利用TP5在不同条件下的动态吸附性能实验,考察了pH值、温度、溶液初始浓度、搅拌转速等因素的影响。采用两相阻力模型描述了TP5在离子交换介质中的动态吸附性能,通过计算得到了TP5在吸附剂颗粒中的颗粒扩散系数,有助于进一步研究小肽在吸附过程中的传质现象。     

棉纤维固定化酵母发酵产乙醇研究

为评估棉纤维固定化酵母生产乙醇的可行性,首先对棉纤维表面基团进行化学修饰,以提高载体对酵母细胞的吸附能力。其次分析了固定化发酵的稳定性,并从细胞数量角度定量分析固定化发酵和游离发酵的差异性。结果表明,经过F6-2试剂处理后的载体吸附效果有明显提升,其吸附比例达到83.1%,比未处理的固定化载体提高了15.9%。采用修饰的载体进行固定化发酵表现出较好的稳定性,发酵6批的平均转化率和产率分别为96.77%和5.22 g/(L·h),相比游离发酵,分别提高3%和51.7%。固定化发酵体系中,发酵6批后总酵母数为4.86×10⁸CFU/mL,是游离发酵体系的2倍。结果表明,利用修饰的棉纤维进行固定化发酵具有明显的优势和应用可行性。     

MgCl2对黑曲霉柠檬酸发酵影响

黑曲霉柠檬酸发酵培养基中添加０．０８－０．１５ｍｇ／Ｌ的ＭｇＣｌ２,对菌体浓度没显著性影响,但可使柠檬酸产率提高４％－７％,发酵旺盛期断氧３０ｍｉｎ的实验结果与正常发酵结果对照表明,添加０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２的摇瓶产酸率下降１６．２％;空白对照摇瓶产酸率则下降５６．８％,通过对柠檬酸合成酶「ＥＢ４．１．３．７」酶活测定及活体染色计数,我们认为,断氧条件下,０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２使黑曲霉存活     

应用代谢工程超量生产1,6—二磷酸果糖

在代谢工程理论的指导下判断了ＦＤＰ合成途径中的结合和刚性结点，并用化学因子调节代谢流量的分配以超量生产ＦＤＰ。实验发现，ＦＤＰ成途径中Ｇ６Ｐ、ＦＤＰ和ＰＥＰ分支点为主要结点，其中ＰＥＰ结点为刚性结点。