利用线粒体DNA上的cytB鉴定林蛙及林蛙油

目的：以线粒体DNA上cytB为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)手段,建立林蛙及林蛙油鉴定方法。方法：采用市售成年雌蛙的新鲜组织和林蛙油为实验材料,通过试剂盒提取总DNA;以已报道的东北林蛙、中国林蛙、黑斑蛙和蟾蜍的cytB为模板,设计四对引物;PCR扩增产物回收测序。结果：仅东北林蛙引物的PCR体系获得1100 bp左右大小的产物,产物序列与东北林蛙cytB序列一致性为99%,说明实验对象林蛙为东北林蛙,林蛙油来源为东北林蛙。讨论：利用mtDNA独特的优势,应用PCR扩增cytB,并测序确定了林蛙品种,建立了林蛙种属以及林蛙油基源的鉴定方法,为林蛙油类药材的鉴定提供科学理论依据。