中蜂囊状幼虫病毒VP1基因的优化表达及其免疫原性分析

目的原核表达优化的中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)的VP1基因,并分析其免疫原性。方法根据大肠埃希菌密码子偏爱性对野生型CSBV VP1(wt VP1)基因进行优化(opti VP1),将基因wt VP1和opti VP1分别克隆至p GEX-6P-1原核表达系统,构建原核表达质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1,分别转化E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并对诱导温度、IPTG终浓度及诱导时间进行优化,诱导蛋白经Western blot鉴定;重组蛋白经GSH-琼脂糖凝胶层析纯化;分别用PBS、纯化的GST标签蛋白、纯化的重组蛋白及CSBV纯化病毒免疫小鼠,经间接ELISA法检验各组小鼠的血清抗体效价。结果优化后的VP1基因序列降低了密码子影响指数,提高了密码子适应指数;质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1经鉴定证明构建正确;最佳诱导表达条件为:IPTG终浓度0.8 mmol/L,30℃,220 r/min诱导8 h;诱导表达蛋白占菌体总蛋白百分比由wt VP1菌株(5.49±0.30)%提高至opti VP1菌株(59.7±0.51)%,纯化后纯度可达0.5 mg/ml;兔抗GST标签抗体及兔抗CSBV血清均与优化后的重组蛋白发生特异性反应;重组蛋白组小鼠二免后可产生较高水平抗体,明显高于PBS组和GST标签蛋白组(P0.05)。结论通过密码子优化实现了CSBV结构基因VP1的高效表达,表达蛋白可诱导小鼠机体产生特异性抗体,具有良好的免疫原性,为探讨CSBV感染的分子发病机制和制备抗CSBV病毒的多克隆抗体奠定了基础。     

纯铜和电镀铜包钢在大港土壤中的初期腐蚀行为

通过实验室的实土埋样实验（30 d）、极化曲线、交流阻抗谱（EIS）测试和失重法对纯铜和电镀铜包钢在大港实土中的初期腐蚀行为进行了研究.在腐蚀的初期阶段,纯铜的平均腐蚀速率略低于电镀铜包钢,它的耐土壤腐蚀性能略好;纯铜和电镀铜包钢的腐蚀机制存在一定的差异,纯铜的腐蚀行为受扩散控制影响较大.      

杂散电流对埋地管道的腐蚀及排流方式的研究进展

随着人们对能源需求的不断增加,输油管道和电力设施建设迅速发展,由于空间地理位置限制,管线与电力设施不可避免地并行铺设,杂散电流对埋地管道的腐蚀问题日益突出.根据干扰源不同,可将杂散电流分为直流干扰与交流干扰.分别从直流和交流杂散电流出发,介绍了杂散电流的主要来源、形成原因及腐蚀危害;了解了二者的腐蚀特征以及腐蚀速率差异.通过调研国内外杂散电流腐蚀的相关研究,对直流腐蚀与交流腐蚀机理进行了系统论述与总结,并对交流腐蚀速率低于直流腐蚀速率的原因进行了分析与探讨.分别介绍了直流杂散电流与交流杂散电流的排流方法与排流装置,分析了每种排流方式的优缺点及适用条件,为实际工况中排流方式的选取提供了参考.最后,针对目前杂散电流腐蚀难点,提出了有待解决问题的方法,并对这一领域的研究方向及发展前景进行了展望,为相关研究提供了借鉴.     

张力膜结构找形的非线性分析

阐述了张力膜结构找形的基本理论．针对非线性位移法找形分析中，由于膜结构初始几何形状和预张力分布两类基本变量的人为假定导致计算结果难以收敛的问题，提出了以(应)力密度法计算得到的近似解作为非线性分析的初始值的求解方法，并编制了计算程序．算例分析表明，两种方法结合求解．计算准确且高效．     

电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定畜禽肉中9种重金属元素含量

目的:建立石墨消解-电感耦合等离子体质谱法测定畜禽肉中9种重金属元素,并对7种畜禽肉样品中重金属含量进行分析。方法:采用石墨消解法进行样品前处理,用电感耦合等离子质谱法（ICP-MS）检测重金属含量,并计算各元素含量。结果:铬、铅、砷、镉、钴在0～50 μg/L,铜、锰、镍在0～500 μg/L,锌在0～1000 μg/L浓度范围内线性关系良好（r≥0.9999）,检出限在0.003～0.400 μg/L之间。样品加样回收率在97.2%～104.4%,RSD≤5.0%(n = 6)。对国家标准物质（GSB-27、 GSB-28）的测定结果均在标准值标准偏差范围内。结论:该方法准确度和精密度高,线性范围广,适用于畜禽肉的检测。本研究为广州市畜禽类的安全性评价,监管体系的建立及运行提供科学依据。     

X65钢焊接接头在模拟浅表海水和深海环境中的腐蚀行为对比

在实验室模拟条件下,采用失重法及电化学等方法并结合腐蚀形貌显微观察,研究了X65钢焊接接头在浅表海水和深海(1000 m)环境中的短期腐蚀行为及其机理。结果表明,X65钢焊接接头在浅表海水环境下的腐蚀速率大于深海环境下的腐蚀速率,浅表海水环境以点蚀为主,深海环境只在熔合线附近腐蚀相对较快,焊缝区腐蚀不明显;在模拟浅表海水和深海环境下,热影响区(HAZ)的腐蚀电位均低于焊缝和母材区,导致焊缝区域存在电偶效应,加速了HAZ的腐蚀,形成较厚的腐蚀产物膜。     

高效液相色谱法测定玉米中的游离酚和结合酚

建立了高效液相色谱法同时测定玉米中游离酚和结合酚的检测方法,包括原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、芦丁、橙皮素、槲皮素。有机溶剂提取玉米中的游离酚,碱法提取玉米中的结合酚,以ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl(4.6 mm×250mm,5μm)为分析柱,乙腈(A)和含0.4%乙酸的超纯水(B)为流动相梯度洗脱,采用二极管阵列检测器280 nm波长检测。14种酚类化合物在一定浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 4~0.999 9,加标回收率为90%~108%,相对标准偏差为0.03%~3.59%。试验结果表明,该方法能用来同时测定玉米中的游离酚和结合酚。     

蒙皮支撑新型轻钢龙骨墙柱的屈曲性能

采用标准V型连接件连接薄壁方钢管构成墙柱的承重骨架,是一种新型的轻钢龙骨结构。墙柱外侧或内侧包覆墙板材料构成的组合墙体,是这种轻钢结构房屋中主要的竖向受力构件。由于其结构形式的特殊性,目前尚缺乏适用的设计理论和设计规范。首先根据应变能等效原则,给出这种特殊形式的轻钢龙骨墙柱的等效截面。墙板材料对于轻钢龙骨墙柱的屈曲性能有着重要影响,考虑墙板材料对于墙柱的蒙皮支撑效应,建立双侧有相同墙板材料和单侧有墙板材料时墙体的总势能方程,采用里兹法导出这两种支撑条件下轻钢龙骨墙柱的轴压弹性屈曲荷载计算公式,给出的计算公式可供工程设计和应用参考。     

X80管线钢在硫酸盐还原菌作用下的腐蚀行为

目的 通过实验模拟硫酸盐还原菌（SRB）对X80钢的腐蚀，探究硫酸盐还原菌的腐蚀过程。方法 通过细菌培养实验，计数得到固着SRB和浮游SRB的生长曲线以及溶液中pH值的变化曲线。通过腐蚀电化学测试，研究了SRB对X80腐蚀的影响。通过浸泡实验，获得SRB对腐蚀速率的影响。采用扫描电镜和激光共聚焦显微镜对SRB腐蚀后的表面形貌和最大点蚀深度进行了分析，利用EDS和XPS对腐蚀产物的成分进行了分析。结果 在接种SRB的溶液中，X80钢表面固着的SRB比浮游的SRB多；随着培养时间增长，溶液pH增大。接种SRB环境中，X80钢阻抗和线性极化电阻均小于无菌环境中的值，有菌环境中腐蚀电流密度大于无菌环境中的值。随着浸泡时间增长，最大点蚀坑深度变深。通过EDS能谱分析发现，在含有SRB的环境中，S元素和O元素的含量较无菌环境中高，XPS结果表明，SRB环境中腐蚀产物多为Fe的硫化物。结论 固着SRB使试样表面的铁溶解为铁离子，铁离子与溶液中的硫酸根离子在SRB生命活动的作用下生成铁的硫化物，从而促进了X80钢的腐蚀。     

基于筛选双菌种的大米-牛奶双蛋白酸奶的研制

以大米蛋白水解物和全脂乳粉为主要原料,自筛菌种（谷糠乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种）为发酵剂,感官评定、发酵酸度、黏度为评价指标,对大米-牛奶双蛋白酸奶的培养基、发酵工艺条件和食品添加剂进行初步研究。结果表明,发酵培养基：大米蛋白水解物（水解度7.5%）添加量在40%以下（乳粉蛋白60%以上）发酵的酸奶感官评分均在70分以上。最佳发酵工艺条件：菌种配比2:1（谷糠乳杆菌：乳酸乳球菌乳酸亚种）,大米蛋白与乳粉蛋白百分比30:70,接种量3%,培养温度42 ℃。最佳食品添加剂：蔗糖最佳添加量为4%~6%,增稠剂最佳组合为0.15%果胶+0.60%明胶或0.40%明胶+0.60% HPDSP。在最佳培养基、食品添加剂和工艺条件下发酵10 h可制备的大米-牛奶双蛋白酸奶具有凝乳状态稳定、色泽均匀、口感细腻、米香风味良好等特点。